环境光色对白条双锯鱼（Amphiprion frenatus）幼鱼的影响及相关基因克隆研究
发布时间：2020-06-20 12:46
【摘要】：白条双锯鱼(Amphiprion frenatus)俗称红小丑,隶属于硬骨鱼纲(Osteichthyes),辐鳍鱼纲(Actinopterygii),鲈形目(Perciformes),雀鲷科(Pomacentridae),海葵鱼亚科(Amphiprioninae),双锯鱼属(Amphiprion)。因为红小丑体色和红番茄相似,在欧美地区人们也称它为番茄小丑。白条双锯鱼分布在西太平洋和非洲东部海域,是最常见的海水性观赏鱼类,由于其美丽的外观和较容易饲养的生活习性受到众多海水水族爱好者的青睐。海水观赏鱼的野生资源与市场需求的关系越来越紧张。大量的毁灭式捕捞不仅导致了海水观赏鱼数量的减少,更是对自然环境产生了不可修复的破坏。通过对白条双锯鱼的人工繁育和养殖相关研究,为人工养殖雀鲷科海水观赏鱼的生产提供理论依据。1.白条双锯鱼的人工繁育首先挑选体格较大、健康的白条双锯鱼成鱼进行人工配对,然后给予亲鱼营养强化促使其产卵。受精卵经过7-10天方可孵化为仔鱼,初孵仔鱼以营养强化后的轮虫为食,后期可逐步替换为卤虫无节幼体、人工配合饲料。在繁育期间需要注意水质的清洁和稳定。2.环境光色对白条双锯鱼的影响研究在循环水养殖条件下,设置白色、红色、黄色、蓝色、绿色五个光照试验组,每组三个重复,试验周期120天。结果表明,各试验组幼鱼特定生长率无显著性差异(P0.05),但试验鱼的增重率在红光组和绿光组间差异显著(P0.05)。试验鱼红光组红色皮肤胡萝卜素含量显著高于蓝光、黄光和绿光组(P0.05);白光组红皮中胡萝卜素含量显著高于蓝光组(P0.05);在眼、肝、肌肉和白色皮肤组织中胡萝卜素含量在各试验组间无显著性差异(P0.05)。白光组肝组织中酪氨酸酶活性活性显著高于红光组(P0.05);在眼、皮肤、肌肉组织中各试验组酪氨酸酶活性无显著性差异(P0.05)。3.白条双锯鱼酪氨酸酶基因的克隆及分析通过RACE技术从白条双锯鱼中克隆得出酪氨酸酶基因cDNA序列,全长为2095bp。包括一个1620bp的开放阅读框,5’上游区有一段非编码区(UTR)区域大小为313bp,3’下游区有一段大小为162bp的UTR区。TYR基因的氨基酸序列与乌鳢(channa argus)同源性最高,达到了85%;与红鳍东方渶(Takifugu rubripes)相似性为83%,与鲑鱼(salmon)同源性为78%。系统进化树显示白条双锯鱼与乌鳢聚在一支,而后与青溕有较近的亲缘关系。同属内种间亲缘关系表现为最近。本研究初步掌握了在实验室循环水养殖条件下白条双锯鱼的人工繁育技术;光色对白条双锯鱼有一定的影响,在红色光环境下体表组织胡萝卜素含量增加,而体中酪氨酸酶活性减弱。胡萝卜素有提高鱼体色泽鲜艳度的作用。酪氨酸酶基因的克隆分析为基因调控体色的机理研究提供理论基础。
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4
【图文】：
上海海洋大学硕士学位论文NCBI 里的 BLAST 和 SMART program 分析比对分析发现，其包括一个 1620bp的开放阅读框，编码 539 个氨基酸。5’上游区有一段非编码区（UTR）区域大小为 313bp，3’下游区有一段大小为 162bp 的非编码（UTR）区。该 cDNA 能够完整编码一个蛋白质，经软件预测成熟的 TYR 蛋白分子量约为 60.89 kDa，等电点为 6.27。2.2 氨基酸序列同源性分析本实验首次扩增了白条双锯鱼酪氨酸酶基因的完整编码区，经 Blast 对边发现，白条双锯鱼 TYR 基因的氨基酸序列与乌鳢（Ophiocephalus argus ）同源性最高，达到了 85%；与红鳍东方豚（Takifugu rubripes）相似性为 83%，与鲑鱼（Oncorhynchus）同源性为 78%。
图 4-2 白条双锯鱼与其他物种 TYR 进化树Fig.4-2 Phylogenetic analysis of A. Frenatus TYR with other reported TYRTYR 系统进化树如图，结果显示硬骨鱼聚为一簇，哺乳动物都聚在一簇，白条双锯鱼与乌鳢聚在一支，而后与青溕有较近的亲缘关系。同属内种间亲缘关系表现为最近。这一结果正确的反应了所选物种间的进化关系。3 讨论黑色素是一类小颗粒的蛋白衍生物，广泛存在于动植物的黑色素细胞中[103]。黑色素是一种光防护色素，既影响着相关部位的颜色，又可以吸收紫外线，减少阳光的伤害[104]。酪氨酸酶是一种含有铜离子的金属氧化酶，普遍存在于生物体中。酪氨酸酶对黑色素的形成和生理免疫功能均有重要的作用。烟草天蛾表皮中的酪氨酸酶具有促进黑色素产生和修复受伤皮肤的功能[105]。黑色素的形成包含一系列复杂的羟化反应过程，酪氨酸酶的地位至关重要。首先，在酪氨酸酶的催化作用
本文编号：2722438
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4
【图文】：
上海海洋大学硕士学位论文NCBI 里的 BLAST 和 SMART program 分析比对分析发现，其包括一个 1620bp的开放阅读框，编码 539 个氨基酸。5’上游区有一段非编码区（UTR）区域大小为 313bp，3’下游区有一段大小为 162bp 的非编码（UTR）区。该 cDNA 能够完整编码一个蛋白质，经软件预测成熟的 TYR 蛋白分子量约为 60.89 kDa，等电点为 6.27。2.2 氨基酸序列同源性分析本实验首次扩增了白条双锯鱼酪氨酸酶基因的完整编码区，经 Blast 对边发现，白条双锯鱼 TYR 基因的氨基酸序列与乌鳢（Ophiocephalus argus ）同源性最高，达到了 85%；与红鳍东方豚（Takifugu rubripes）相似性为 83%，与鲑鱼（Oncorhynchus）同源性为 78%。
图 4-2 白条双锯鱼与其他物种 TYR 进化树Fig.4-2 Phylogenetic analysis of A. Frenatus TYR with other reported TYRTYR 系统进化树如图，结果显示硬骨鱼聚为一簇，哺乳动物都聚在一簇，白条双锯鱼与乌鳢聚在一支，而后与青溕有较近的亲缘关系。同属内种间亲缘关系表现为最近。这一结果正确的反应了所选物种间的进化关系。3 讨论黑色素是一类小颗粒的蛋白衍生物，广泛存在于动植物的黑色素细胞中[103]。黑色素是一种光防护色素，既影响着相关部位的颜色，又可以吸收紫外线，减少阳光的伤害[104]。酪氨酸酶是一种含有铜离子的金属氧化酶，普遍存在于生物体中。酪氨酸酶对黑色素的形成和生理免疫功能均有重要的作用。烟草天蛾表皮中的酪氨酸酶具有促进黑色素产生和修复受伤皮肤的功能[105]。黑色素的形成包含一系列复杂的羟化反应过程，酪氨酸酶的地位至关重要。首先，在酪氨酸酶的催化作用
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1 马本贺;环境光色对白条双锯鱼（Amphiprion frenatus）幼鱼的影响及相关基因克隆研究[D];上海海洋大学;2016年
本文编号：2722438
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