日本镜蛤(Dosinorbis japonica)数量性状、营养成分及幼体生态学研究
【学位授予单位】:大连海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:S917.4
【图文】:
和ITS1-R5'→ACACGAGCCGAGTGATCCACPCR扩增了线粒体 CO1 基因的 3'端709 bp的序列。PCR反应体系为50 uL,每个反应体系内含:模版DNA(50 ng2uL,20 mmol/dm3Mg2+的 10×buffer 5.0 uL,dNTP(10 mmol/dm3) 1.0 uL,(BBI)0.4 uL,primer F 1.0 uL,primer R1.0 uL,Template 1.0 uL,加 ddH50 uL;PCR 反应在 Eppendorf 的热循环仪上进行,反应条件为:94 ℃预min,然后进行 35 个循环,每个循环包括 94 ℃变性 40 s;52 ℃退火 30 s,延伸 60 s。最后 72 ℃充分延伸 7 min,PCR 产物用 1%琼脂糖凝胶电泳进行挑选较为好的 PCR 产物送上海生工生物工程技术服务有限公司进行单向测测。2.2 序列比对将得到的 DNA 序列输入到 BLAST 页面(https://blast.ncbi.nlm.nih.govcgi)进行物种对比,之后得到相应的结果,利用 MEGA5 进化树构建方法2.3 结果2.3.1 传统分类法(形态学鉴定)
和ITS1-R5'→ACACGAGCCGAGTGATCCACPCR扩增了线粒体 CO1 基因的 3'端709 bp的序列。PCR反应体系为50 uL,每个反应体系内含:模版DNA(50 ng2uL,20 mmol/dm3Mg2+的 10×buffer 5.0 uL,dNTP(10 mmol/dm3) 1.0 uL,(BBI)0.4 uL,primer F 1.0 uL,primer R1.0 uL,Template 1.0 uL,加 ddH50 uL;PCR 反应在 Eppendorf 的热循环仪上进行,反应条件为:94 ℃预min,然后进行 35 个循环,每个循环包括 94 ℃变性 40 s;52 ℃退火 30 s,延伸 60 s。最后 72 ℃充分延伸 7 min,PCR 产物用 1%琼脂糖凝胶电泳进行挑选较为好的 PCR 产物送上海生工生物工程技术服务有限公司进行单向测测。2.2 序列比对将得到的 DNA 序列输入到 BLAST 页面(https://blast.ncbi.nlm.nih.govcgi)进行物种对比,之后得到相应的结果,利用 MEGA5 进化树构建方法2.3 结果2.3.1 传统分类法(形态学鉴定)
【参考文献】
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本文编号:2730775
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