维生素C对红螯光壳螯虾生长及生长相关基因表达的影响
发布时间：2020-07-13 17:32
【摘要】：本论文以红螯光壳螯虾(Cherax quadricarinatus)为研究对象,综合了营养学、生物化学和分子生物学等学科的方法,辅以电镜技术等,较为详细地研究了维生素C对红螯光壳螯虾生长发育的影响,具体研究结果如下：1.饲料中不同维生素C水平对红螯光壳螯虾生长及相关酶活性的影响维生素C在促进水生生动物生长发育过程中具有重要的作用。为探究维生素C对红螯光壳螯虾生长的影响,进行了为期8周的养殖试验,试验设置了7个维生素C添加组,分别添加0、100、200、400、800、1600、3200mg/kg的维生素C。结果表明,不同含量的维生素C对红螯光壳螯虾的存活率和肝体指数无显著影响,而适量的维生素C对红螯光壳螯虾的增重率具有一定的促进作用,但维生素C的添加量过高也会对其生长产生一定的抑制作用；红螯螯虾肝胰腺中维生素C的积累量与饲料中维生素C的添加量呈正相关,但当饲料中维生素C的添加量超过400mg/kg时,肝胰腺中维生素C的积累量趋于饱和。维生素C显著提高了螯虾肝胰腺、胃和肠中胰蛋白酶活性,对淀粉酶活性无显著影响,同时能显著提高肝胰腺中酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性,本实验结果表明维生素C对红螯光壳螯虾的生长具有促进作用。2.饲料中不同维生素C水平对红螯光壳螯虾肝胰腺超微结构的影响分别取维生素C添加量的低浓度组(Vc添加量为Omg/kg).中浓度组(Vc添加量为400mg/kg)和高浓度组(Vc添加量为3200mg/kg)的红螯光壳螯虾肝胰腺进行电镜切片观察,结果表明,低浓度组中虾的肝胰腺结构有轻微的损伤,微绒毛排列不整齐,有部分脱落变形现象,部分细胞核出现了异染色质化,脂滴积累较少；低浓度和高浓度组中虾肝胰腺结构完整,但中浓度组脂滴的积累量比高浓度组略高,且质地更加均匀。以上结果表明,维生素c的缺乏会影响红螯光壳螯虾肝胰腺结构的完整性,进而影响肝胰腺中营养物质的积累和代谢,然而,维生素c的添加量过高可能也会对红螯光壳螯虾营养物质的积累产生一定的抑制作用。3.红螯光壳螯虾组织蛋白酶L基因的克隆及维生素C对其表达影响的研究以红螯光壳螯虾肝胰腺cDNA为模板,克隆得到红螯光壳螯虾组织蛋白酶L基因全长序列,该该基因全长1810 bp,开放阅读框长度为1026 bp,编码341个氨基酸残基。组织荧光定量PCR结果显示,CqCatL基因在红螯光壳螯虾的多个组织中均有表达,其中肝胰腺中表达量最高,其次为血细胞,在肠及触角腺中也有一定量的表达。在基础饲料中添加不同水平的维生素C后,CqCatL基因的表达量也存在明显差异,其中维生素C的添加量为400 mg/kg的组别中该基因的表达量最高,表明组织蛋白酶L基因在红螯光壳螯虾的生长发育过程中有重要的作用,且其表达量受维生素C的影响。4.红螯光壳螯虾RXR基因和EcR基因的克隆及维生素C对其表达影响的研究以红螯光壳螯虾肝胰腺cDNA为模板,克隆得到红螯光壳螯虾蜕皮相关基因RXR基因全长序列和EcR基因部分序列,其中RXR基因全长1341bp,开放阅读框长度为1299bp,编码432个氨基酸残基,EcR片段长1099bp,编码264个氨基酸残基。组织荧光定量PCR结果显示,这两条基因在红螯光壳螯虾各个组织中都有表达,表明其在红螯光壳螯虾的生长发育过程中具有一定的作用。在不同维生素C添加组中,这两条基因的表达量与实验组1相比均有所提高,表明维生素C对这两条基因的表达具有一定的促进作用,具体的调控机制尚需进一步实验的验证。
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4
【图文】：
逑４００ｍｇ／ｋｇ时，肝膜腺中维生素Ｃ的积累量不再随着维生素Ｃ的添加量的增加而逡逑增加（图２．１）。逡逑９０邋－逡逑ｉｌｌ：逡逑ｌ｜Ｈ逡逑}0！胡－逡逑p哄澹慑澹矗板澹叔义现缅澹斟澹常板澹义希裕藻澹缅义锨桑佩义锨烧迹玻板澹义嫌桑惧义希保板澹义希板澹掊五五五义希卞危插危冲危村危靛危跺危峰义喜粚澖恚梅犹瑰义希模椋澹簦幔颍澹粒螅悖铮颍猓脲澹粒悖椋溴义贤迹玻焙靺莨饪莯r奸巧膜腺中维生素Ｃ含量变化逡逑Ｆｉｇ邋２．１邋Ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｏｆ邋Ａｓｃｏｒｂｉｃ邋Ａｃｉｄ邋ｉｎ邋化邋ｅ邋ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓ邋ｏｆ邋Ｃ．ｇｗ心Ｗｃ（３／７＞７幻逡逑３．３红整光壳呡巧肝膜腺、胃、肠栄化酶活性检测逡逑３．３．１膜蛋白酶活性逡逑义逡逑各饲料组红整光壳蟹幰肝膀腺、胃和肠的膀蛋白酶活性如图２．２所示。肝膜逡逑腺中膜蛋白酶活性随着饲料中维生素Ｃ添加量的增加而呈先升高后降低的趋势，逡逑当维生素Ｃ的添加量为４００邋ｍｇ／ｋｇ时，肝膜腺中膜蛋白酶活性最高，与实验组３逡逑差异不显著，显著高于１、２、５、６、７组（Ｐ＜０．０５）。胃组织中膜蛋白酶活性也逡逑呈先升高后降低的趋势，其中实验组５中膜蛋白酶活性最高，其余各组间膜蛋白逡逑酶活性差异不显著，但均高于实验组１。肠组织中除了实验组７外，其余各组中逡逑膜蛋白酶的活性均高于未添加维生素Ｃ的实验组１，其中４、５、６沮膀蛋白酶活逡逑性显著高于实验组１邋（Ｐ＜０．０５）
３．４．１酸怯x锼崦富钚藻义喜煌橹渌嵝詀愃崦傅幕钚圆钜煜灾渲懈文は僦兴嵝詘锼崦傅幕钚宰铄义细撸搴图∪庵兴嵝詚1酸酶活性较低（图２．４）。肝膀腺中酸性a愃崦傅幕钚运驽义献盼兀玫奶砑恿康脑黾佣噬仙魇疲搴图∪庾橹兴嵝詀愃崦富钚藻义细髯榧洳钜觳幌灾ǎ校荆埃埃担ｅ义希保俊＃卞危溴义希煞粒危卞义希徨澹慑澹慑澹慑澹慑澹海蝈义嫌皴澹插危冲危村危靛危靛危峰义喜煌缮螅梅ɑ义希模椋澹簦幔颍危粒洌溴义贤迹玻床煌兀锰砑幼樗嵝缘崦富盍﹀义希疲椋珏澹玻村澹粒悖簦椋觯椋簦椋澹箦澹铮驽澹粒茫绣澹椋铄澹洌椋妫妫澹颍澹睿翦澹觯椋簦幔恚椋铄澹缅澹欤澹觯澹戾澹铮驽澹茫澹瘢酰幔洌颍椋悖幔颍椋钊纾酰箦义希常矗布钚詘锼崦富钚藻义细文は僦屑钚詘锼崦富钚猿哉兆橥獠钜炀幌灾ㄍ迹玻担Ｑ逯屑钚詚1逡逑酸酶活性呈现了先升高后降低趋势，肌肉组织中各组间的差异不显著（Ｐ＞０．０５）。逡逑各个组织中碱性x锼崦傅幕钚员浠焊伟蛳伲狙澹炯∪狻ｅ义希保瑰义
本文编号：2753766
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4
【图文】：
逑４００ｍｇ／ｋｇ时，肝膜腺中维生素Ｃ的积累量不再随着维生素Ｃ的添加量的增加而逡逑增加（图２．１）。逡逑９０邋－逡逑ｉｌｌ：逡逑ｌ｜Ｈ逡逑}0！胡－逡逑p哄澹慑澹矗板澹叔义现缅澹斟澹常板澹义希裕藻澹缅义锨桑佩义锨烧迹玻板澹义嫌桑惧义希保板澹义希板澹掊五五五义希卞危插危冲危村危靛危跺危峰义喜粚澖恚梅犹瑰义希模椋澹簦幔颍澹粒螅悖铮颍猓脲澹粒悖椋溴义贤迹玻焙靺莨饪莯r奸巧膜腺中维生素Ｃ含量变化逡逑Ｆｉｇ邋２．１邋Ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｏｆ邋Ａｓｃｏｒｂｉｃ邋Ａｃｉｄ邋ｉｎ邋化邋ｅ邋ｈｅｐａｔｏｐａｎｃｒｅａｓ邋ｏｆ邋Ｃ．ｇｗ心Ｗｃ（３／７＞７幻逡逑３．３红整光壳呡巧肝膜腺、胃、肠栄化酶活性检测逡逑３．３．１膜蛋白酶活性逡逑义逡逑各饲料组红整光壳蟹幰肝膀腺、胃和肠的膀蛋白酶活性如图２．２所示。肝膜逡逑腺中膜蛋白酶活性随着饲料中维生素Ｃ添加量的增加而呈先升高后降低的趋势，逡逑当维生素Ｃ的添加量为４００邋ｍｇ／ｋｇ时，肝膜腺中膜蛋白酶活性最高，与实验组３逡逑差异不显著，显著高于１、２、５、６、７组（Ｐ＜０．０５）。胃组织中膜蛋白酶活性也逡逑呈先升高后降低的趋势，其中实验组５中膜蛋白酶活性最高，其余各组间膜蛋白逡逑酶活性差异不显著，但均高于实验组１。肠组织中除了实验组７外，其余各组中逡逑膜蛋白酶的活性均高于未添加维生素Ｃ的实验组１，其中４、５、６沮膀蛋白酶活逡逑性显著高于实验组１邋（Ｐ＜０．０５）
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