解磷细菌的分离鉴定及在精养池塘水体中的初步应用

发布时间：2020-08-06 19:40

【摘要】：在精养池塘水体中,投入的磷元素多沉积于底泥中,仅有小部分转化为浮游植物可吸收利用的可溶性磷,导致磷的利用率不高。而解磷细菌能将难溶性磷从底泥中释放出来,转化为可溶性磷。本研究从土壤中筛选出解磷细菌,研究其适宜的生长条件,并对其在精养池塘水体中的初步应用进行探讨。主要研究结果如下:1.从土壤中分离筛选出2株具有解磷能力的细菌OP2和OP16,通过液体摇瓶培养,表明OP2和OP16具有发现能分解磷酸三钙和卵磷脂,并且对卵磷脂的解磷率分别达到3.09%和4.03%。通过传统生理生化指标并结合16S rDNA测序分析,OP2鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),OP16鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。2.OP16适宜发酵培养基为:玉米淀粉2%、豆饼粉1.5%、磷酸二氢钾0.2%、磷酸氢二钠0.05%,七水硫酸镁0.03%,七水硫酸锰0.05%,碳酸钙0.05%。适宜发酵条件为:2.0%的接种量(V/V)、初始pH值7.5、种龄24h、装量80 mL/250 Ml三角瓶、发酵培养48小时。在此条件下,发酵液中的活菌数为2.42x10~9cfu/mL。3.OP2适宜发酵培养基为:蔗糖1.5%、酵母粉3.0%、磷酸二氢钾0.1%,磷酸氢二钠0.05%,七水硫酸镁0.05%,七水硫酸锰0.05%,碳酸钙0.05%;适宜发酵条件为:接种量2.5%,种龄12h,装量120 mL/250 mL三角瓶,发酵时间48h,pH自然。在此条件下,发酵液中的活菌数为4.2x10~(10)cfu/mL4.在水体中添加解磷细菌菌剂能使水体中活性磷含量提高,并且将OP16和OP2按不同比例配合而成的复合菌剂,对水体中的亚硝酸盐和氨氮具有较好的降解效果,最大去除率均能达到100%和80%。因此OP16和OP2配合而成的复合菌剂,在提高水体活性磷,改善池塘水质的方面具有较强的应用潜力。
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S917.1
【图文】：

溶磷,菌株

图 2-1 观察溶磷圈Figure 1 Observations of the halo ring表 2-2 分离菌株的 D/d 值Table 2-2 D/d value of isolated strain菌株 D/d 值 OP1 1.0 OP2 2 OOP3 1.1 OOP4 1.2 OOP5 1.1 OOP6 1.0 OOP7 1.0 OOP8 1.1 O

磷酸三钙,活性磷,空白,有效磷浓度

图 2-2 解磷细菌对磷酸三钙的溶解re 2-2 phosphate-solubilizing bacteria dissolved of tricalcium phos脂的溶解经有机磷液体培养基摇瓶培养后，培养液中的活性磷含中空白组的有效磷浓度基本维持在 0.037 mg/L。接种培养时间的延长，活性磷含量明显增加。当培养时间量为 2.34 mg/L，为空白组的 64 倍；当菌株 OP16 的达到 4.03 mg/L，为空白组的 108 倍。

卵磷脂,活性磷

图 2-2 解磷细菌对磷酸三钙的溶解Figure 2-2 phosphate-solubilizing bacteria dissolved of tricalcium phosphate3.2.2 解磷菌对卵磷脂的溶解OP2 和 OP16 经有机磷液体培养基摇瓶培养后，培养液中的活性磷含量如图 2-3 示。整个试验过程中空白组的有效磷浓度基本维持在 0.037 mg/L。接种 OP2 的培养中活性磷含量随着培养时间的延长，活性磷含量明显增加。当培养时间为 36 小时时培养液中活性磷含量为 2.34 mg/L，为空白组的 64 倍；当菌株 OP16 的培养时间为小时活性磷最大，达到 4.03 mg/L，为空白组的 108 倍。

【参考文献】