鲤鱼iNOS全长cDNA的获得及在感染条件下的差异表达分析

发布时间：2020-12-04 18:06

　　一氧化氮是一种多功能的气态生物信使,由多种细胞或组织产生,它可以降低甚至杀灭感染因子,而过量的一氧化氮又会造成机体组织损伤,加快炎症进程,诱导型一氧化氮合成酶（i NOS）是合成一氧化氮分子的关键限速酶,因此掌握i NOS的作用机制从而对其调控显得至关重要。实验旨在获得i NOS的全长c DNA序列,为进一步利用RT-PCR、Northernblot等方法研究i NOS蛋白在鲤鱼中的调节机制奠定基础,并利用荧光定量技术检测i NOS在体内体外受到外来刺激后的表达变化情况,以及其表达是否有组织特异性。实验目的:获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶c DNA全长序列,并通过体内体外实验探究i NOS在刺激因子刺激下的表达变化及其组织特异性表达规律;实验方法:以鲤鱼外周血白细胞c DNA文库中获得的i NOS的EST序列为基础,采用文库筛选和c DNA 5’末端快速扩增技术（5’-RACE）相结合的方法,获得鲤i NOS c DNA全长序列,体外实验用脂多糖（LPS,1.0μg/m L）刺激原代培养的外周血白细胞4 h、12 h,刀豆蛋白A（Con A,1.0μg/m L）刺激4 h、24 h,提取... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 鱼类先天性免疫研究进展
        1 鱼类先天性免疫概述
        2 鱼类先天性免疫器官
        3 鱼类先天性免疫细胞
        4 先天性免疫分子
    第二章 诱导型一氧化氮合成酶研究进展
        1 iNOS的结构和功能
        2 iNOS的表达及表达调控机制
        3 iNOS与炎症疾病的关系
第二篇 研究内容
    第一章 鲤鱼iNOS全长cDNA的获得及鉴定分析
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第二章 丝裂原刺激前后iNOS在白细胞中的差异表达分析
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第三章 鞭毛蛋白诱导iNOS在头肾组织中的表达
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
        4 小结
    第四章 嗜水气单胞菌感染鲤鱼后iNOS在不同组织中的表达
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
结论
参考文献
导师简介
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]诱导型一氧化氮合成酶及其相关分子的研究进展[J]. 林海珊,欧敏.  现代医学. 2015(05)
[2]鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白提取及多抗制备[J]. 颜成英,汤晓艳,王敏,康大成,李朋颖,龚艳.  食品工业科技. 2014(22)
[3]诱导型一氧化氮合酶抑制剂的研究进展[J]. 张浩,昝金行,刘培勋.  中国新药杂志. 2013(06)
[4]鱼类非特异性免疫研究进展[J]. 李莉,李春梅.  河南农业科学. 2012(02)
[5]鱼类免疫系统的研究进展[J]. 王俊相,李玉萍,孔令富,李莲军.  四川畜牧兽医. 2010(07)
[6]鸭沙门氏菌鞭毛抗原的提取与抗原性鉴定初报[J]. 徐耀辉,乔宏兴,臧金灿,李翠平,卢建洲.  中国农学通报. 2007(09)
[7]水生动物10种非特异性免疫分子的研究进展[J]. 龙华.  长江大学学报(自科版). 2005(11)
[8]鲤鱼外周血白细胞的分离和体外培养[J]. 丰培金,卢强,李莲瑞,张俊辉.  中国兽医学报. 2004(04)
[9]鱼类主要组织相容性复合体研究现状与展望[J]. 轩兴荣,蔡完其.  上海水产大学学报. 2001(04)

硕士论文
[1]鲤鱼TLR5基因克隆、鉴定及对嗜水气单胞菌感染的应答[D]. 孙真.吉林大学 2014



本文编号：2898023