白斑综合症病毒（WSSV）进入造血组织细胞的途径，红螯螯虾网格蛋白轻链的克隆及制备抗体的检测

发布时间：2020-12-04 21:30

　　对虾白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)属线形病毒科(Nimaviridae)白斑病毒属(Whispovirus),是一种环状双链DNA病毒,能感染对虾、螯虾等各种虾类。该病毒宿主范围广,传染力强,致死率高,是养殖虾类的主要病原,但目前该病毒的对宿主细胞的侵染机制仍不清楚。本文通过不同的内吞抑制剂及内吞标志物,对WSSV进入造血组织细胞的途径进行了分析。此外,对红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)造血组织细胞的网格蛋白轻链c DNA进行克隆,并制备得到了特异性的抗体。本研究有助于进一步对WSSV的感染机制进行深入地研究,并对虾养殖业中WSSV病害的防治提供了有益的借鉴和科学的依据。(1)借助相关的内吞途径抑制剂及内吞标志物,研究WSSV进入造血组织细胞的相关内吞途径。结果表明,网格蛋白抑制剂Chlorpromazine(CPZ)能有效地抑制WSSV侵染,并且与转铁蛋白及网格蛋白共定位,说明WSSV是通过网格蛋白介导的内吞途径进入造血组织细胞。此外,在内吞的过程中,需要dynamin和细胞膜上胆固醇的参与,并且需要经过酸化。(... 

【文章来源】：自然资源部第三海洋研究所福建省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

WSSV生活周期示意图

8图 1-4：WSSV 感染原代培养的红螯螯虾的造血组织细胞及血细胞的情况[6D．未感染病毒的血细胞和造血组织细胞；B、E．感染病毒 2h 后的血细胞和造血组织细胞；C、F．毒 24 h 后的血细胞和造血组织细胞。

前言而在体外实验中，WSSV 均能感染克氏原螯虾和红螯螯虾（Cheraxquadricarinatus）的血细胞及造血组织细胞，并且在感染病毒后的两种细胞中，均能检测到 WSSV 基因组的转录，但仅能在造血组织细胞的细胞核观察到增殖出的子代病毒。而进一步的实验表明，WSSV 的主要结构蛋白 VP26、VP28 和VP51 无法在感染后的血细胞中表达，仅能在感染后的造血组织细胞中表达[60]。

【参考文献】：
期刊论文
[1]白斑综合症病毒(WSSV)感染对虾的途径及滴度研究[J]. 戴俊逸,李文婷,杨丰.  应用海洋学学报. 2013(01)
[2]对虾白斑综合征病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因的系统进化分析[J]. 李嵚,杨丰,张景海,陈英杰.  沈阳药科大学学报. 2004(02)
[3]对虾白斑综合征杆状病毒体内增殖模型的建立[J]. 黄灿华,石正丽,张建红,张立人,陈棣华,J．R．Bonami.  中国病毒学. 1999(04)
[4]用对虾的致病病毒人工感染克氏原螯虾[J]. 魏静,陆承平,杨丛海.  南京农业大学学报. 1998(04)
[5]用聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测无包埋体对虾病毒[J]. 朱山,郭福生,涂小林,陆承平,吴时友.  南京农业大学学报. 1998(02)



本文编号：2898267