G蛋白偶联受体在日本囊对虾肠道菌群动态平衡调控中的功能研究
发布时间：2020-12-24 02:53
后生动物体腔或肠腔内有许多微生物群落,这些群落中既有对宿主生命活动有益的菌群,也有损害宿主新陈代谢,破坏宿主肠道微环境,甚至导致宿主患病的有害菌。例如,导致对虾产生肠炎病的产气菌,产生红肢病的鳗弧菌以及产生烂眼病的霍乱弧菌等。除此之外,宿主肠道内还有大量中性菌。宿主如何耐受如此多的细菌并保持其胃肠道内微生物群落的稳态尚未得到充分揭示。以前的研究表明,除了抗菌肽之外,双氧化物酶（Dual oxidase,DUOX）系统在肠道微生物群落的稳态中起着重要作用。在生物肠道细胞中,DUOX系统可以产生活性氧（Reactive oxygen species,ROS）,而产生的ROS则可直接破坏微生物的DNA、RNA、蛋白质和脂质等,使这些物质降解从而杀灭微生物。DUOX系统受多种途径调控,目前较少研究的是G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptor,GPCR）途径。GPCR是一种7跨膜受体,广泛分布于各种动物,并且在这些动物中发挥着非常重要的功能,如视觉、嗅觉、味觉和免疫等。在GPCR调控的DUOX表达途径中,GPCR结合配体活化后,可经由快速的钙离子（Calcium io...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２．利用ＲＮＡｉ敲降ＭｙＧＰＣＲｓ的表达，经口感染鳗弧菌后对奸肠道内过氧化氢的水平检??测
妨ＤＣ／ａＷ和歸ＤＬ／ＯＹ２的转录水平都显著降低。然而，当尸Ｃ斯被敲低后，??邱Ｘ）Ｌ／〇Ｙ７的表达水平没有变化；当歸ＧＰＣ７？（５和歸（？尸０？／２被敲低后歸’Ｚ）ｆ／ＯＹ２??的表达水平没有变化（图２．４）。总之，我们筛选得到了?２种ＧＰＣＲ，＾＿ＧＰＣ／？７??和歸ＧＰＣｉ？川，它们可以调控ＲＯＳ的产生。??Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ??〇?１．？１?〇?．?．?５?１－５１?．２?，?５ｌ?．２?！?５．?￡?．?６．??Ｓｇ?Ｓｇ?１５１?丁?这?Ｓ１．５?１，５?Ｓｇ??ａｇ１＊０－?ｒ１１］?〇．§?ｉ．〇?Ｐｎ?ｑ．§１＊０＇?ｒｎ?ｍ?□．〇?ｉ．〇－?ｒ２１］【§?＂?士?〇．§?ｉ．〇－?Ｆｉ?＾??〇?Ｓ，?ｉ?Ｓ?Ｂ?＊?２?＾?圍巧?２?５?ｑ?ｍ??？?§０－５?＿?５?窆０５?ＪＬ?？ｓ０－５＇?Ｈ?？?ｇ＊°－５＇?５５０．５．?＊?５５０．５－?＿??ｉ°Ｊｌ，ｌｌ?ｉ°〇〇ｌＵｉ－?ｊ°ＪＵＩ?ｊ〇?Ｊｌ．ｌｍ?ｉ°〇，Ｌｌ＊－??ｎｙｍ??〇?＾??§?§?§?§?ｉ?ｉ??１＇！］?Ｊ?Ｓｃ?１Ｓ１?Ｓｇ?１，！１?ＳＳ?１，ｓｌ?Ｉｃ?１＇！１?Ｓｇ?１！＇??ｉ？：：ＩＤｉ?ｉ；：：ｌ［ｋ?ｉ？：：ｌＤｉ?ｉｔ：：ＩＤ＾?ｉ？：：Ｄ＾?ｉ？：：ｌＱＩ??ｍ?ｎ?ｆ??ｃ?ｃ?ｃ??｜？?１－５１?Ｉｎ?１－５ｉ??瞇?１．。．円?ｌ｜ｉ．〇?ｒ＾
从消化道转录组测序获得了场＇ＧＰＣＡ７和姆的ｃＤＮＡ序列。??姆ＧＰＣ７？７ｃＤＮＡ全长５９１６?ｂｐ，开放阅读框５１４２?ｂｐ，编码具有１７１３个氨基酸的??蛋白质，理论分子量为１９３．８?ｋＤａ，理论等电点为８．５?（图２．５?Ａ）。结构域分析显??示，除７个跨膜结构域（２４５?ａａ）外，Ａｆ／ＧＰＣＲ７的Ｎ端具有信号肽结构域（２１?ａａ），??之后是两个Ｃ型凝集素结构域（１５１?ａａ、１２２?ａａ），一个ＧＰＳ结构域（５３?ａａ）以??及一个低复杂度区域（１７?ａａ）（图２．５?Ｂ）。我们获得的川的ＤＮＡ序列??长２７３６?ｂｐ，开放阅读框２３９７?ｂｐ，编码具有７９８个氨基酸的蛋白质，理论分子量??为８８．２?ｋＤａ，理论等电点为８．９４?（图２．５?Ｃ）。结构域分析显示，姆ＧＰＣＲ１０含有??一个７跨膜结构域（２９４?ａａ）以及４个低复杂性区域（１５?ａａ、２０?ａａ、１３?ａａ、１０?ａａ）??（图?２．５?Ｄ）。??为了分析歸＇ＧＰＣＲ７和Ｍ／ＧＰＣＲ１０的分子进化关系，我们使用ＭＥＧＡ５．０构??建了一个系统发育进化树。所有ＧＰＣＲｓ被分为２大支：其中第一大支的ＧＰＣＲｓ??又分为两个亚支：节肢动物（包括对虾和昆虫）和脊椎动物；第二大支的ＧＰＣＲｓ??分为３个亚支：对虾、昆虫和脊椎动物等。７＾ＧＰＣＲ７和１０分别位于两个大的分??支中。说明Ａ々ＧＰＣＲ７和１０分别属于ＧＰＣＲ的不同类群（图２．６Ａ）。姆？ＧＰＣＷ??和姆ＧＰＣＲ／Ｏ的进化树和序列比对显示，这两种ＧＰＣＲ进化上都不保守，与日??本囊对虾进化上相近的凡纳滨对虾中的脂蛋白受体与婦ＧＰＣＲ７的相似性只有??４０．６％，而腺苷Ａ２受体与的相似性
【参考文献】：
期刊论文
[1]南美白对虾养殖环境及其肠道细菌多样性分析[J]. 孙振丽,宣引明,张皓,蒋明,潘云生,张益明,龚叶平,陆小平,余德山,薛仁宇,胡小龙,曹广力,贡成良. 中国水产科学. 2016(03)
[2]南美白对虾肠道细菌菌群分析[J]. 宛立,王吉桥,高峰,杨士勇,王年斌. 水产科学. 2006(01)
本文编号：2934838
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．２．利用ＲＮＡｉ敲降ＭｙＧＰＣＲｓ的表达，经口感染鳗弧菌后对奸肠道内过氧化氢的水平检??测
妨ＤＣ／ａＷ和歸ＤＬ／ＯＹ２的转录水平都显著降低。然而，当尸Ｃ斯被敲低后，??邱Ｘ）Ｌ／〇Ｙ７的表达水平没有变化；当歸ＧＰＣ７？（５和歸（？尸０？／２被敲低后歸’Ｚ）ｆ／ＯＹ２??的表达水平没有变化（图２．４）。总之，我们筛选得到了?２种ＧＰＣＲ，＾＿ＧＰＣ／？７??和歸ＧＰＣｉ？川，它们可以调控ＲＯＳ的产生。??Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ?Ｃ??〇?１．？１?〇?．?．?５?１－５１?．２?，?５ｌ?．２?！?５．?￡?．?６．??Ｓｇ?Ｓｇ?１５１?丁?这?Ｓ１．５?１，５?Ｓｇ??ａｇ１＊０－?ｒ１１］?〇．§?ｉ．〇?Ｐｎ?ｑ．§１＊０＇?ｒｎ?ｍ?□．〇?ｉ．〇－?ｒ２１］【§?＂?士?〇．§?ｉ．〇－?Ｆｉ?＾??〇?Ｓ，?ｉ?Ｓ?Ｂ?＊?２?＾?圍巧?２?５?ｑ?ｍ??？?§０－５?＿?５?窆０５?ＪＬ?？ｓ０－５＇?Ｈ?？?ｇ＊°－５＇?５５０．５．?＊?５５０．５－?＿??ｉ°Ｊｌ，ｌｌ?ｉ°〇〇ｌＵｉ－?ｊ°ＪＵＩ?ｊ〇?Ｊｌ．ｌｍ?ｉ°〇，Ｌｌ＊－??ｎｙｍ??〇?＾??§?§?§?§?ｉ?ｉ??１＇！］?Ｊ?Ｓｃ?１Ｓ１?Ｓｇ?１，！１?ＳＳ?１，ｓｌ?Ｉｃ?１＇！１?Ｓｇ?１！＇??ｉ？：：ＩＤｉ?ｉ；：：ｌ［ｋ?ｉ？：：ｌＤｉ?ｉｔ：：ＩＤ＾?ｉ？：：Ｄ＾?ｉ？：：ｌＱＩ??ｍ?ｎ?ｆ??ｃ?ｃ?ｃ??｜？?１－５１?Ｉｎ?１－５ｉ??瞇?１．。．円?ｌ｜ｉ．〇?ｒ＾
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【参考文献】：
期刊论文
[1]南美白对虾养殖环境及其肠道细菌多样性分析[J]. 孙振丽,宣引明,张皓,蒋明,潘云生,张益明,龚叶平,陆小平,余德山,薛仁宇,胡小龙,曹广力,贡成良. 中国水产科学. 2016(03)
[2]南美白对虾肠道细菌菌群分析[J]. 宛立,王吉桥,高峰,杨士勇,王年斌. 水产科学. 2006(01)
本文编号：2934838
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