不同脂肪酸对中华绒螯蟹脂肪酸结合蛋白FABP3，FABP9，FABP10的表达调控
发布时间：2020-12-28 03:02
中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）又称河蟹,属甲壳纲,十足目,方蟹科,绒螯蟹属,目前已经成为我国重要养殖的经济蟹类。脂类在鱼类、虾蟹类等水产动物的生长、生理活动中发挥十分重要的作用,而肝胰腺是中华绒螯蟹脂类代谢中心,脂类含量对其结构、功能和生化组成具有重要影响。脂肪酸结合蛋白FABP的种类和分布与其结合的脂肪酸、组织的脂肪酸需求及其参与的功能有着密切关系。研究表明甲壳动物FABP的种类分化较少但参与多种生理过程,而目前对其配基及亲和力及功能的研究甚少。本研究在已有的研究结果基础上,采用RT-PCR技术从中华绒螯蟹肝胰腺组织中克隆了FABP3、FABP9和FABP10基因,通过分子生物学手段构建原核表达载体,经过表达和纯化获得Es-FABP3、9和10三种可溶性目的蛋白并以此蛋白作为材料,利用稳态荧光光谱对中华绒螯蟹FABP与脂肪酸等疏水配基的亲和力进行分析,并在离体条件下通过荧光定量PCR研究单一脂肪酸对Es-FABP3、9和10的调控作用。通过以上研究阐明中华绒螯蟹FABP与脂肪酸的亲和力,脂肪酸代谢相关基因FABP3、FABP9和FABP10在不同脂肪酸调控下的相互...
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
中华绒螯蟹菌液PCR琼脂糖凝胶电泳图，从左到右依次为pMD-19T-FABP3,
图 2-3 三种 pMD-19T-FABP 质粒双酶切结果1：PMD19-T-FABP3 双酶切条带；2：PMD3：PMD19-T-FABP10 双酶切条带 restriction enzyme results of three kinds of pM: restriction enzyme bone of PMD19-T-FABP3;-T-FABP9; 3: restriction enzyme bone of PMD1达载体 pET-15b-FABP 菌液 PCR 反应9 和FABP10 片段与双酶切后的原核表ET-15b-FABP3、pET-15b-FABP9 和 pETBP3-F，FABP3-R；FABP9-F，FABP9-R；定，通过 1.2%琼脂糖凝胶电泳检测(图双酶切检测后，证明能够切下 FABP3、
图 2-4 三种重组质粒 pET-15b-FABP 验证A：M：DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2：pET-15b-FABP3 菌液 PCR 电泳图；3-4pET-15b-FABP9 菌液 PCR 电泳图；4-5：pET-15b-FABP10 菌液 PCR 电泳图B：M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp)；1：pET-15b-FABP3 双酶切；2：pET-15b-FAB双酶切；pET-15b-FABP10 双酶切Figure 2-4 The certification of the three kinds of recombinant plasmid pET-15b-FABPA: M: DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2: PCR agarose gel electrophoresis ofpET-15b-FABP3; 3-4: PCR agarose gel electrophoresis of pET-15b-FABP9; 5-6: PCR agarose geelectrophoresis of pET-15b-FABP10B: M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp); 1: The restriction enzyme results ofpET-15b-FABP3; 2: The restriction enzyme results of pET-15b-FABP9; 3: The restriction enzymeresults of pET-15b-FABP102.2.4 三种重组蛋白的表达
本文编号：2943013
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【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
中华绒螯蟹菌液PCR琼脂糖凝胶电泳图，从左到右依次为pMD-19T-FABP3,
图 2-3 三种 pMD-19T-FABP 质粒双酶切结果1：PMD19-T-FABP3 双酶切条带；2：PMD3：PMD19-T-FABP10 双酶切条带 restriction enzyme results of three kinds of pM: restriction enzyme bone of PMD19-T-FABP3;-T-FABP9; 3: restriction enzyme bone of PMD1达载体 pET-15b-FABP 菌液 PCR 反应9 和FABP10 片段与双酶切后的原核表ET-15b-FABP3、pET-15b-FABP9 和 pETBP3-F，FABP3-R；FABP9-F，FABP9-R；定，通过 1.2%琼脂糖凝胶电泳检测(图双酶切检测后，证明能够切下 FABP3、
图 2-4 三种重组质粒 pET-15b-FABP 验证A：M：DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2：pET-15b-FABP3 菌液 PCR 电泳图；3-4pET-15b-FABP9 菌液 PCR 电泳图；4-5：pET-15b-FABP10 菌液 PCR 电泳图B：M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp)；1：pET-15b-FABP3 双酶切；2：pET-15b-FAB双酶切；pET-15b-FABP10 双酶切Figure 2-4 The certification of the three kinds of recombinant plasmid pET-15b-FABPA: M: DNA Marker 1000 (a: 1000bp; b: 400bp)；1-2: PCR agarose gel electrophoresis ofpET-15b-FABP3; 3-4: PCR agarose gel electrophoresis of pET-15b-FABP9; 5-6: PCR agarose geelectrophoresis of pET-15b-FABP10B: M：DNA Marker 5000 (a: 5000bp; b: 1000bp); 1: The restriction enzyme results ofpET-15b-FABP3; 2: The restriction enzyme results of pET-15b-FABP9; 3: The restriction enzymeresults of pET-15b-FABP102.2.4 三种重组蛋白的表达
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