锦鲤疱疹病毒的分离鉴定及急性和潜伏感染检测方法的建立
发布时间：2021-01-04 05:30
锦鲤疱疹病毒（Koi herpesvirus[KHV]）,2005年重新命名为鲤疱疹病毒Ⅲ型（Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3）,属于Allloherpesviridae科,自然宿主为普通鲤鱼和锦鲤,死亡率高达80%-100%。1998年报道至今,短短十几年,除了北非,全世界都有KHVD暴发引起大面积鲤鱼死亡的报道。因此,KHV已成为全球进出口贸易重点检测对象,KHV疾病也是OIE要求必须上报的重大疾病,我国农业部将其定为Ⅱ类动物疫病。KHV致病性强,发病急,死亡率高,传播速度快,严重威胁着鲤鱼和锦鲤养殖业的发展,给全世界的淡水养殖业造成了巨大的经济损失。锦鲤疱疹病毒感染的表现形式可以分为急性感染和潜伏感染。急性感染时,病毒大量复制,表现为锦鲤疱疹病毒病临床症状。潜伏感染时,病毒以非整合状态的基因组形态游离在宿主细胞核内,一定条件下病毒可重新被激活引起宿主临床症状并导致死亡,这是导致KHV呈世界性流行和快速传播的一个重要原因。因此,建立快速准确检测KHV的方法在防控疾病的流行和传播中具有重要意义。本研究从四川某鲤鱼养殖场暴发的传染病中分离得到一株KHV病毒,并...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１鳃组织严重坏死??Ｆｉｇ．２－１?Ｇｉｌｌ?ｔｉｓｓｕｅ?ｏｆ?ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｆｉｓｈ??
０?３?６?９?１２?１５?１８?２１??感染后天数／ｄ??图２－３组织悬液人工感染实验结果??Ｆｉｇ．２－３?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ??３．４病毒分离??病鱼组织匀浆滤菌并感染ＣＣＢ细胞后，盲传３代可以稳定地观察到典型的细胞病??变效应（ＣＰＥ），细胞融合、聚集、后期呈破渔网状（图２－４ｂ），而对照组ＣＣＢ细胞生长??致密且无空泡出现（图２－４ａ），将病毒株分离株暂命名为ＫＨＶ－ＳＣ。??（ａ）?（ｂ）??图２－４?ＣＣＢ细胞接种病毒后产生病变效应??（ａ）?ＣＣＢ正常细胞单层（ｘ１００）?；?（?ｂ?）接种组织匀浆液６?ｄ后的ＣＣＢ细胞（ｘ１００?）??Ｆｉｇ．２－４?Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｖｉｒｕｓ??（ａ）?Ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｅｌｌｓ（ｘｌＯＯ）；?（ｂ）?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｖｉｒｕｓ（ｘｌＯＯ）??２７??
３．４病毒分离??病鱼组织匀浆滤菌并感染ＣＣＢ细胞后，盲传３代可以稳定地观察到典型的细胞病??变效应（ＣＰＥ），细胞融合、聚集、后期呈破渔网状（图２－４ｂ），而对照组ＣＣＢ细胞生长??致密且无空泡出现（图２－４ａ），将病毒株分离株暂命名为ＫＨＶ－ＳＣ。??（ａ）?（ｂ）??图２－４?ＣＣＢ细胞接种病毒后产生病变效应??（ａ）?ＣＣＢ正常细胞单层（ｘ１００）?；?（?ｂ?）接种组织匀浆液６?ｄ后的ＣＣＢ细胞（ｘ１００?）??Ｆｉｇ．２－４?Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｖｉｒｕｓ??（ａ）?Ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｅｌｌｓ（ｘｌＯＯ）；?（ｂ）?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｖｉｒｕｓ（ｘｌＯＯ）??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]桉液对锦鲤疱疹病毒细胞内复制影响的试验[J]. 王好,刘丽凡,于丹,王友超,周井祥. 中国兽医杂志. 2016(10)
[2]鲤疱疹病毒3型研究进展[J]. 郑树城,王庆,李莹莹,曾伟伟,王英英,刘春,梁红茹,石存斌. 病毒学报. 2016(01)
[3]锦鲤疱疹病毒病鲤组织病理观察[J]. 张涛,宋文华,富丽静,胡宗云,李赫,闫有利,杜华,张健,张继飞. 水产学杂志. 2015(04)
[4]锦鲤疱疹病毒GZ1301株的分离与鉴定[J]. 李莹莹,王庆,曾伟伟,潘厚军,王英英,刘春,梁红茹,石存斌,吴淑勤. 水产学报. 2014(08)
[5]抗锦鲤疱疹病毒的植物药物筛选及其效果比较[J]. 李俊超,马杰,曾令兵,范玉顶,徐进,周勇,张辉. 淡水渔业. 2014(03)
[6]液相芯片技术同时检测真鲷虹彩病毒和锦鲤疱疹病毒方法的建立[J]. 尹伟力,耿金培,刘宁,岳志芹,郑小龙,刘荭,许红岩. 水产科学. 2014(03)
[7]一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定[J]. 朱霞,李新伟,王好,吕文亮,周井祥. 中国预防兽医学报. 2011(05)
博士论文
[1]锦鲤疱疹病毒（KHV-hIj）株的分离与表达载体构建[D]. 薛淑群.东北林业大学 2012
硕士论文
[1]锦鲤疱疹病毒Nested-PCR检测方法的建立及初步应用[D]. 刘世超.南京农业大学 2012
本文编号：2956241
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１鳃组织严重坏死??Ｆｉｇ．２－１?Ｇｉｌｌ?ｔｉｓｓｕｅ?ｏｆ?ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｆｉｓｈ??
０?３?６?９?１２?１５?１８?２１??感染后天数／ｄ??图２－３组织悬液人工感染实验结果??Ｆｉｇ．２－３?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ??３．４病毒分离??病鱼组织匀浆滤菌并感染ＣＣＢ细胞后，盲传３代可以稳定地观察到典型的细胞病??变效应（ＣＰＥ），细胞融合、聚集、后期呈破渔网状（图２－４ｂ），而对照组ＣＣＢ细胞生长??致密且无空泡出现（图２－４ａ），将病毒株分离株暂命名为ＫＨＶ－ＳＣ。??（ａ）?（ｂ）??图２－４?ＣＣＢ细胞接种病毒后产生病变效应??（ａ）?ＣＣＢ正常细胞单层（ｘ１００）?；?（?ｂ?）接种组织匀浆液６?ｄ后的ＣＣＢ细胞（ｘ１００?）??Ｆｉｇ．２－４?Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｖｉｒｕｓ??（ａ）?Ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｅｌｌｓ（ｘｌＯＯ）；?（ｂ）?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｖｉｒｕｓ（ｘｌＯＯ）??２７??
３．４病毒分离??病鱼组织匀浆滤菌并感染ＣＣＢ细胞后，盲传３代可以稳定地观察到典型的细胞病??变效应（ＣＰＥ），细胞融合、聚集、后期呈破渔网状（图２－４ｂ），而对照组ＣＣＢ细胞生长??致密且无空泡出现（图２－４ａ），将病毒株分离株暂命名为ＫＨＶ－ＳＣ。??（ａ）?（ｂ）??图２－４?ＣＣＢ细胞接种病毒后产生病变效应??（ａ）?ＣＣＢ正常细胞单层（ｘ１００）?；?（?ｂ?）接种组织匀浆液６?ｄ后的ＣＣＢ细胞（ｘ１００?）??Ｆｉｇ．２－４?Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｖｉｒｕｓ??（ａ）?Ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｃｅｌｌｓ（ｘｌＯＯ）；?（ｂ）?ＣＣＢ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｖｉｒｕｓ（ｘｌＯＯ）??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]桉液对锦鲤疱疹病毒细胞内复制影响的试验[J]. 王好,刘丽凡,于丹,王友超,周井祥. 中国兽医杂志. 2016(10)
[2]鲤疱疹病毒3型研究进展[J]. 郑树城,王庆,李莹莹,曾伟伟,王英英,刘春,梁红茹,石存斌. 病毒学报. 2016(01)
[3]锦鲤疱疹病毒病鲤组织病理观察[J]. 张涛,宋文华,富丽静,胡宗云,李赫,闫有利,杜华,张健,张继飞. 水产学杂志. 2015(04)
[4]锦鲤疱疹病毒GZ1301株的分离与鉴定[J]. 李莹莹,王庆,曾伟伟,潘厚军,王英英,刘春,梁红茹,石存斌,吴淑勤. 水产学报. 2014(08)
[5]抗锦鲤疱疹病毒的植物药物筛选及其效果比较[J]. 李俊超,马杰,曾令兵,范玉顶,徐进,周勇,张辉. 淡水渔业. 2014(03)
[6]液相芯片技术同时检测真鲷虹彩病毒和锦鲤疱疹病毒方法的建立[J]. 尹伟力,耿金培,刘宁,岳志芹,郑小龙,刘荭,许红岩. 水产科学. 2014(03)
[7]一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定[J]. 朱霞,李新伟,王好,吕文亮,周井祥. 中国预防兽医学报. 2011(05)
博士论文
[1]锦鲤疱疹病毒（KHV-hIj）株的分离与表达载体构建[D]. 薛淑群.东北林业大学 2012
硕士论文
[1]锦鲤疱疹病毒Nested-PCR检测方法的建立及初步应用[D]. 刘世超.南京农业大学 2012
本文编号：2956241
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