溶藻弧菌rpoN(σ 54 )的敲除及其功能研究

发布时间：2021-01-09 11:04

　　溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）既是海洋中的正常菌群之一,也是其优势菌群之一,还是人类和海洋动物的重要病原菌。鞭毛、胞外多糖和生物膜与病原菌的粘附力、侵染力和致病力的强弱直接相关。△tssJ是溶藻弧菌HN08155（WT）的tssJ基因缺失株。本试验室之前的研究表明,溶藻弧菌tssJ对溶藻弧菌的鞭毛、水不溶性多糖和生物膜的形成具有正调控作用;对WT和△tssJ进行转录组数据分析表明,tssJ的缺失导致96个相关基因表达下调,其中rpoN是众多表达下调基因差异最大的基因之一,所以rpoN可能是这些表型改变的主要调控基因。为此,本文利用新型自杀质粒pLP12构建溶藻弧菌的rpoN基因缺失株（△rpoN）,通过分析WT、△tssJ和△rpoN的表型差异,确定溶藻弧菌rpoN基因的主要功能及其与tssJ之间的相互作用。通过测定WT、△tssJ和△rpoN的生长曲线,发现三种菌株的生长趋势一致,并且都在22h达到生长极限;三者生长速度比较结果为WT>△tsJ>△rpoN。WT、△ tssJ和△rpoN的泳动能力为WT>△tssJ>△rpoN;鞭毛染色试... 

【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１溶藻弧菌基因电泳检测结果??

上游同源臂引物ｒｐｏｉＶ－ＵＦ和ｒｐｏＡ＾ＵＲ、下游同源臂引物／７Ｊ〇ｉＶ－ＤＦ和ｒ／Ｊｏ／Ｖ－ＤＲ，??以质粒?／ｐｏＡ＾－ＴＶ?为模板、ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ?Ｍａｘ?ＤＮＡ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ?扩增?ｒｐｏｉＶ■核心序列外??的两侧翼序列分别为４８２ｂｐ，４７６ｂｐ?（图３）。??１??．?．?＇ｖｉｄ＇ｌ?ｅ＇?．ｉｓ＇？＇？；＂＊＊＊？??Ｍ５：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ５０００；泳道丨?Ｊ：１ＶＵ，ＮＤ??图３?ｒ／ｗ／Ｖ基因的上下游同源臂电泳检测结果??Ｆｉｇ．３?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｔｅｓｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｉｒｐｏＮ?ｇｅｎｅ＇ｓ?ＮＤ?ａｎｄ?ＮＵ??１９??

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【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：2966528