厚壳贻贝含硒GPx克隆及在Cu 2+ 和LPS胁迫下的表达
发布时间：2021-03-07 02:49
海洋生物大多生活于水环境中,面临比陆地环境更严重的环境胁迫,这些环境胁迫包括生物胁迫（寄生虫、细菌、真菌以及病毒）及非生物胁迫（重金属、有机和无机污染等）。筛选当地物种作为环境指示生物,深入开展生物标志物研究是当前环境监测领域的研究热点,可为常规海洋污染监控提供有力补充。由于一些贝类具有固着生活、滤食性以及环境污染耐受性强等特性,世界上已有诸多国家开展以贝类作为环境指示物的研究。本研究以当地特色厚壳贻贝（Mytilus coruscus）为研究对象,克隆了谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）cDNA全长,并分析了其在铜及脂多糖胁迫下的表达。研究结果可为揭示厚壳贻贝谷胱甘肽过氧化物酶响应外界胁迫的应激机制提供理论依据,同时也为厚壳贻贝GPx作为海洋标志物的可能性提供支持。本研究首次从厚壳贻贝中克隆出GPx cDNA全长,命名为McGPx。McGPx cD-NA序列全长为970 bp,其中开放式阅读框包含594 bp,共编码197个氨基酸。第46个氨基酸（U）是由292TGA294编码的硒半胱氨酸（Sec）,表明它是硒依赖性谷胱甘肽过氧化物酶。在3’-U...
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自由基之间的相互关系
图 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一个由大约 100 核为硒代半胱氨酸插入序列（selenocysteine insertion se导 UGA 重新编码为 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可变[79]。在真核生物中已经发现两种形式 SECIS 元模型源自大量的结构研究和定点突变[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3，但其顶环较短。尽管它们的IS 元件存在 2 个保守区。第一个保守区，SECIS 元-Watson–Crick 碱基对，而四联体是体内 Sec 掺入必基序总是包含 2 个串联 G-A，能形成保守的“茎-内rn[81]。第二个保守区位于 I 型的顶环或位于 II 型的内序，同样也是 Sec 插入的关键。螺旋 2 作用被认为可离[82]。SECISaln 是一个预测 SECIS 元件的工具，基
图 1-3 SECIS 元件的二级结构模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽过氧化物酶抗氧化系统中，谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）属于清除 O2-和过氧[21]。在哺乳动物中，GPx 家族根据结构特征、特定底物的结合位细胞定位已经鉴定出八种类型同工酶，分为两大类型，经典型Px2，GPx3，GPx5 和 GPx6）和磷脂氢过氧化物 GPx（GPx4，G经典的 GPx 是多聚体（通常是四聚体）并且具有可溶性，而磷脂和细胞膜相关[85]。仅可以保护生物膜和其他细胞成分免受氧化损伤，还可以通过催调节细胞内信号传递[86]。根据有没有含有硒，又可分为含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。一种含有氧化还原活性半胱氨酸定为硫氧还蛋白过氧化物酶，另一种含有 Sec，其活性位点使用谷[87-88]
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cu2+胁迫对中华绒螯蟹毒性作用及免疫相关基因表达的影响[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,张翠真,陈志和,简少卿,赵大显. 江西农业大学学报. 2018(02)
[2]LPS介导的炎症反应过程及作用机制[J]. 曹承华,贺雅静,高荧苒,施中东,姬新颖. 河南大学学报(医学版). 2017(01)
[3]舟山海域厚壳贻贝软体部分营养成分分析与评价[J]. 何建瑜,赵荣涛,刘慧慧. 南方水产科学. 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家乐,袁一鸣. 遗传. 2010(04)
[5]Cu2+对栉孔扇贝鳃组织抗氧化酶的影响[J]. 王凡,赵元凤,吕景才,刘长发. 湖北农业科学. 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase（PHGPx）: More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文编号：3068270
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自由基之间的相互关系
图 1-2 硒蛋白的生物合成[76]Fig 1.2 Biosynthesis of selenoprotein酸插入序列 SECIS 元件硒蛋白 mRNA 在其 3′UTR 中含有一个由大约 100 核为硒代半胱氨酸插入序列（selenocysteine insertion se导 UGA 重新编码为 Sec 是充分必要的[78]。真核生物可变[79]。在真核生物中已经发现两种形式 SECIS 元模型源自大量的结构研究和定点突变[80]。Ⅰ和Ⅱ的中存在附加的 Helix3，但其顶环较短。尽管它们的IS 元件存在 2 个保守区。第一个保守区，SECIS 元-Watson–Crick 碱基对，而四联体是体内 Sec 掺入必基序总是包含 2 个串联 G-A，能形成保守的“茎-内rn[81]。第二个保守区位于 I 型的顶环或位于 II 型的内序，同样也是 Sec 插入的关键。螺旋 2 作用被认为可离[82]。SECISaln 是一个预测 SECIS 元件的工具，基
图 1-3 SECIS 元件的二级结构模型[79]Fig 1.3 Secondary structure model of SECIS甘肽过氧化物酶抗氧化系统中，谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）属于清除 O2-和过氧[21]。在哺乳动物中，GPx 家族根据结构特征、特定底物的结合位细胞定位已经鉴定出八种类型同工酶，分为两大类型，经典型Px2，GPx3，GPx5 和 GPx6）和磷脂氢过氧化物 GPx（GPx4，G经典的 GPx 是多聚体（通常是四聚体）并且具有可溶性，而磷脂和细胞膜相关[85]。仅可以保护生物膜和其他细胞成分免受氧化损伤，还可以通过催调节细胞内信号传递[86]。根据有没有含有硒，又可分为含硒的谷胱不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。一种含有氧化还原活性半胱氨酸定为硫氧还蛋白过氧化物酶，另一种含有 Sec，其活性位点使用谷[87-88]
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cu2+胁迫对中华绒螯蟹毒性作用及免疫相关基因表达的影响[J]. 毛振方,林奇辰,王彬宇,张翠真,陈志和,简少卿,赵大显. 江西农业大学学报. 2018(02)
[2]LPS介导的炎症反应过程及作用机制[J]. 曹承华,贺雅静,高荧苒,施中东,姬新颖. 河南大学学报(医学版). 2017(01)
[3]舟山海域厚壳贻贝软体部分营养成分分析与评价[J]. 何建瑜,赵荣涛,刘慧慧. 南方水产科学. 2012(04)
[4]三角帆蚌GPX基因cDNA全序列的克隆及其编码蛋白的结构分析[J]. 李西雷,汪桂玲,李家乐,袁一鸣. 遗传. 2010(04)
[5]Cu2+对栉孔扇贝鳃组织抗氧化酶的影响[J]. 王凡,赵元凤,吕景才,刘长发. 湖北农业科学. 2007(01)
[6]Glutathione Peroxidase Revisited—Simulation of the Catalytic Cycle by Computer-Assisted Molecular Modelling[J]. K. -D. AUMANN; N. BEDORF; R. BRIGELIUS-FLOHED;D. SCHOMBURG; AND L. FLOHE(Gesellschaft fur Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mascheroder Weg 1, D-38124 Braunschweig, Germany; Deutsches Institut fur Ernahrungsforschung (DIfE) Arthur-Scheunert-Allee 114. Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
[7]Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase（PHGPx）: More Than an Antioxidant Enzyme?[J]. FULVIO URSINI;MATILDE MAIORINO; AND ANTONELLA ROVERI(Department of Biological Chemistry, University of Padotu, Italy). Biomedical and Environmental Sciences. 1997(Z1)
本文编号：3068270
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