基因工程菌全细胞催化制备葡甘低聚糖
发布时间：2021-03-07 01:06
葡甘低聚糖是一种水溶性的高分子多糖,它作为功能性低聚糖,可以改善动物肠道微生物菌群,提高机体的免疫功能及抗氧化性等,广泛应用于食品、药品以及饲料行业。其特殊的生理功能和广泛的应用前景,极大地引起了学者们的兴趣。本文通过含有β-甘露聚糖酶基因的重组工程菌利用全细胞催化的方式制备葡甘低聚糖,并对其酶解工艺条件进行响应面优化,之后对酶解产物进行薄层色谱检测,并对酶解产物进行脱色和去单糖处理。Rossate-pET32a-CH3是本实验室构建的含有β-甘露聚糖酶基因的重组工程菌,酶活力较高。该重组工程菌利用全细胞催化的方式水解魔芋粉制备葡甘低聚糖,通过单因素优化分析,探究不同酶解温度、酶解时间、pH值、底物浓度以及加酶量对魔芋粉水解率的影响。单因素优化结果显示,酶解反应的最佳温度为50℃,最佳时间为12 h,最佳pH值为7.0,最佳底物浓度为3%,最佳酶量为1000U。由于酶解时间和加酶量这两个因素对魔芋粉水解率的影响显著性不明显,选取反应温度（A）、底物浓度（B）、pH值（C）为三个变量,以酶解反应的水解率Y为响应面值,利用Design-Expert软件根据BOx-Behnken的原理设计试...
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?Ｄ－甘露糖的标准曲线??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?Ｓ化ｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｄ－ｍａｎｎｏｓｅ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]外源寡糖对山羊瘤胃液酶活及粗饲料瘤胃降解率的影响[J]. 林英庭,祁茹,王利华,朱风华,赵发盛,胡静. 动物营养学报. 2014(12)
[2]饲料中添加甘露寡糖对团头鲂幼鱼生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响[J]. 孙盛明,谢骏,朱健,戈贤平,江晓浚. 动物营养学报. 2014(11)
[3]全细胞催化制备单糖酸及其鉴定[J]. 王荥,周鑫,徐勇,勇强,余世袁. 林产化学与工业. 2014(05)
[4]气相色谱法及其应用[J]. 王芹,冯景春,冯开. 广东化工. 2014(12)
[5]黑曲霉嗜热β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的克隆表达及其魔芋降解产物分析[J]. 倪玉佳,周旻昱,欧阳嘉,郑兆娟,勇强. 生物技术通报. 2014(06)
[6]酶法制备魔芋甘露寡糖和产物分析[J]. 何丹,郭熊,杨双莲,李俊俊,黄遵锡,唐湘华. 中国酿造. 2013(05)
[7]酶法制备甘露低聚糖[J]. 康立新,周玉玲,马立新. 食品科技. 2012(07)
[8]响应面法及其在药学领域中的应用[J]. 张艳,李永哲. 吉林化工学院学报. 2012(07)
[9]响应曲面法优化酸法魔芋葡甘露聚糖水解工艺[J]. 罗清楠,谭玉荣,刘宏,庞杰,赵国华. 食品科学. 2012(06)
[10]微生物全细胞催化技术在工业生产中的应用[J]. 万红贵,赵宗松,蒋导航,袁建锋,吴启赐. 安徽农业科学. 2011(04)
博士论文
[1]黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究[D]. 李剑芳.江南大学 2007
硕士论文
[1]香蕉低聚糖的分离、结构鉴定及品种比较[D]. 唐雪娟.华南理工大学 2014
[2]魔芋低聚糖的制备及其性质研究[D]. 张琳.吉林大学 2013
[3]β-甘露聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质研究[D]. 胡文波.河南师范大学 2012
[4]产β-甘露聚糖酶内生菌的筛选及酶学特性研究[D]. 赵丹丹.河南师范大学 2011
[5]半乳甘露低聚糖的酶法制备及其应用研究[D]. 何紫姣.暨南大学 2011
[6]魔芋葡甘露寡糖的酶解制备及其分离纯化的研究[D]. 王绍云.中国农业科学院 2009
[7]大枣低聚糖的分离纯化及结构研究[D]. 蒋梅峰.山西大学 2009
[8]β-甘露聚糖酶的生产及其酶法制备魔芋葡甘露低聚糖的研究[D]. 徐春梅.江南大学 2008
[9]瓜尔胶的接枝改性和酶解法制备半乳甘露低聚糖的研究[D]. 赵晓峰.广西大学 2008
本文编号：3068132
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?Ｄ－甘露糖的标准曲线??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?Ｓ化ｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｄ－ｍａｎｎｏｓｅ??
?巧解时间００??图２－２溫度对水解率的影响?图２－３反应时间对水解率的影响??Ｆｉｇ．?２－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?化ｍｐｅｒａＵｉｒｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?巧ｇ．?２－３?巨ｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｈｙｄｒｏｌｙｔｉｃ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａｈ??ｒ３化??验了不同ｐＨ值对水解率的影响（图２－４）。图２－４表明，低于ｐＨ?７．０，水解率逐渐上升，??之后，随着ｐＨ值的升高，水解率却有所下降。由于酶促反应的反应条件比较溫和，中??性ｐＨ更加适合该反应的进行，酸性或者碱性ｐＨ都容易使得酶活降低，致使水解率降??低。所Ｗ，选化ｐＨ?７．０为最佳反应ｐＨ值。??（４）
?巧物巧度从）??图２－４?ＰＨ对水解率的影响?图２品吁物产＜章严解率白甲Ｐ向??＾?，?，?，，，．?Ｆｉｇ．?２－５?Ｅｆｆｅｃ化?ｏｆ?ｓｕｂｓｔｒａ化?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ??Ｆｉｇ．?２＊４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐＨ?ｖａ山ｅ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａ化?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?ｒａ化?．??４０??３５??．?化?－??ｇ２ｓＫ??斯２０??１０??５??０??－??５００?１０００?２０００?３０００?４０００?５０００??ｉｎｗｔ?（ｕ）??图２－６加酶量对水解率的影响??巧ｇ．?２－６?巨ｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｅｎｚｙｍｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｎ?ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ?巧化??２．４．４魔芋粉酶解的喃应面试验??（１）响应面试验结果??选取２．４．３单因素试验结果中对魔芋粉水解率较为思著的３个因素，根据响应面法??中Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ的原理设计试验方案，选取１７个试验点开始试验。各因素所选的水平??值如表２－１。试验当中的变量分别为反应温度（Ａ）、底物浓度（Ｂ）、ｐＨ值（Ｃ），Ｗ??酶解反应的水解率Ｙ为响应面值，尖验方案及结果如表２－２。??由表２－２可知，在这１７组试验中，魔芋粉的水解率最低为１９．５３％，含量在４０％Ｗ??上的有５组
【参考文献】：
期刊论文
[1]外源寡糖对山羊瘤胃液酶活及粗饲料瘤胃降解率的影响[J]. 林英庭,祁茹,王利华,朱风华,赵发盛,胡静. 动物营养学报. 2014(12)
[2]饲料中添加甘露寡糖对团头鲂幼鱼生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响[J]. 孙盛明,谢骏,朱健,戈贤平,江晓浚. 动物营养学报. 2014(11)
[3]全细胞催化制备单糖酸及其鉴定[J]. 王荥,周鑫,徐勇,勇强,余世袁. 林产化学与工业. 2014(05)
[4]气相色谱法及其应用[J]. 王芹,冯景春,冯开. 广东化工. 2014(12)
[5]黑曲霉嗜热β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的克隆表达及其魔芋降解产物分析[J]. 倪玉佳,周旻昱,欧阳嘉,郑兆娟,勇强. 生物技术通报. 2014(06)
[6]酶法制备魔芋甘露寡糖和产物分析[J]. 何丹,郭熊,杨双莲,李俊俊,黄遵锡,唐湘华. 中国酿造. 2013(05)
[7]酶法制备甘露低聚糖[J]. 康立新,周玉玲,马立新. 食品科技. 2012(07)
[8]响应面法及其在药学领域中的应用[J]. 张艳,李永哲. 吉林化工学院学报. 2012(07)
[9]响应曲面法优化酸法魔芋葡甘露聚糖水解工艺[J]. 罗清楠,谭玉荣,刘宏,庞杰,赵国华. 食品科学. 2012(06)
[10]微生物全细胞催化技术在工业生产中的应用[J]. 万红贵,赵宗松,蒋导航,袁建锋,吴启赐. 安徽农业科学. 2011(04)
博士论文
[1]黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶及制备魔芋低聚糖研究[D]. 李剑芳.江南大学 2007
硕士论文
[1]香蕉低聚糖的分离、结构鉴定及品种比较[D]. 唐雪娟.华南理工大学 2014
[2]魔芋低聚糖的制备及其性质研究[D]. 张琳.吉林大学 2013
[3]β-甘露聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质研究[D]. 胡文波.河南师范大学 2012
[4]产β-甘露聚糖酶内生菌的筛选及酶学特性研究[D]. 赵丹丹.河南师范大学 2011
[5]半乳甘露低聚糖的酶法制备及其应用研究[D]. 何紫姣.暨南大学 2011
[6]魔芋葡甘露寡糖的酶解制备及其分离纯化的研究[D]. 王绍云.中国农业科学院 2009
[7]大枣低聚糖的分离纯化及结构研究[D]. 蒋梅峰.山西大学 2009
[8]β-甘露聚糖酶的生产及其酶法制备魔芋葡甘露低聚糖的研究[D]. 徐春梅.江南大学 2008
[9]瓜尔胶的接枝改性和酶解法制备半乳甘露低聚糖的研究[D]. 赵晓峰.广西大学 2008
本文编号：3068132
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