仿刺参体腔液中皮质醇检测方法研究

发布时间：2021-03-11 00:25

　　建立了3龄仿刺参和幼参体腔液中皮质醇的超高效液相色谱—串联质谱的检测方法。样品采用乙腈-0.2%甲酸溶液均质振荡、超声提取,用Captiva EMR-Lipid固相萃取柱净化,BEH C-18色谱柱分离,采用超高效液相色谱—串联质谱仪进行测定。试验结果表明,方法的检出限为0.11μg/L,定量限为0.35μg/L,在空白样品中分别添加皮质醇质量浓度为20、40、100μg/L,其回收率均为77%～105%,该方法基质干扰小,准确,易操作,能够满足仿刺参体腔液中痕量皮质醇的测定。 

【文章来源】：水产科学. 2020,39(04)北大核心

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【部分图文】：

不同提取溶剂对皮质醇提取效率

由于样品基质中蛋白质和脂类含量较为丰富,干扰组分多,对净化方法要求较高,液—液净化法及基质固相分散法难以达到净化要求,其提取液仍需进一步净化方可用于仪器检测。因此本研究通过试验考察对比了Oasis HLB固相萃取柱、OasisPrime固相萃取柱、Captiva EMR-Lipid固相萃取柱和Bond Elut Plexa固相萃取柱的纯化效果(图3),结果发现,Oasis HLB固相萃取柱虽有一定的净化效率,但比较费时,需要经过活化、平衡和淋洗3个步骤。OasisPrime固相萃取柱和Bond Elut Plexa固相萃取柱提取效率较低。只有Captiva EMR-Lipid固相萃取柱提取效率高,操作时间短,只需将提取溶液直接过柱,保持一定的速度,就能快速去除脂肪、磷脂等杂质,减小基质效应,节省时间和溶剂。因此,选择使用Captiva EMR-Lipid 固相萃取柱作为净化小柱。3.5 基质效应的评价

用本试验所建立的方法,对幼参和3龄参体腔液进行检测,幼参体腔液中未检出皮质醇,3龄参混合体腔液中皮质醇的含量为6.91 μg/L,雌3龄参体腔液中皮质醇含量为6.28 μg/L,雄3龄参体腔液中皮质醇含量为6.21 μg/L,实际样品与标准品溶液多重反应监测色谱图见图1。本试验的样品检测结果与周晓梦等[21]结果不同,周晓梦等[21]是用平均体质量(31.68±3.29) g的仿刺参,而本试验用的是平均体质量(15±2.59) g的仿刺参,分析可能是由于个体差异所致。3 讨 论


本文编号：3075536