传染性胰腺坏死病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

发布时间：2021-03-13 14:38

　　传染性胰坏死病病毒（Infectious pancreatic necrosis virus）是一种严重的病毒性传染病,它对鳟鱼及蛙鱼的幼鱼有特别明显的传染性及致病性,高致病性毒株可在两个月内导致70%的幼鱼死亡。该病主要危害鲑鳟鱼类的幼鱼,死亡率高达90%以上。传染性胰坏死病病毒是通过鱼卵垂直传播的,已经被感染过的鱼自身已存在抗体,可以抵抗病毒的再次侵袭,但是这些鱼会将自身的病毒感染给其他鱼类,造成的扩散常给鱼类养殖业带来灾难性的损失,是各国进出口鱼的检测对象。本研究将抗IPNV单克隆抗体腹水和抗IPNV VP2重组蛋白多抗血清结合双抗体夹心原理建立一种检测IPNV的胶体金免疫层析试纸条。将金标抗体喷涂在金标垫上,IPNV VP2多抗与山羊抗鼠IgG二抗均喷涂于硝酸纤维素膜上分别作为检测线与质控线,试纸条的两端分别为样品垫与吸收垫。利用辛酸-饱和硫酸铵法纯化血清抗体以及单克隆抗体腹水。纯化后血清抗体的浓度为10.014mg/ml,效价为 1.0×106;腹水抗体的浓度为 2.071mg/ml,效价为 1.0×106。经 Western Blot鉴定,腹水抗体与血清抗体具有良好的反应原... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１试纸条组装模型??Ｆｉ１?Ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＩｍｍｕｎｉｔＣｏｌｌｏｉｄ?Ｇｏｌｄ?Ｓｔｒｉ

图３－１纯化抗ＩＰＮＶ单克隆抗体腹水的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图??１．蛋白质分子量标准２．未纯化的腹水单抗；３．辛酸？硫酸铵法纯化后腹水单抗；??

图３－２重组ＩＰＮＶＶＰ２蛋白的表达与纯化??１．蛋白质分子量标准；２．未经过ＩＰＴＧ诱导的重组蛋白；３．经过ＩＰＴＧ诱导的重组蛋白??

【参考文献】：
期刊论文
[1]用于水产品中硝基呋喃类代谢物检测的胶体金快速检测试剂板的研制[J]. 张敏,桑丽雅,王振国,王伟萍,盛慧萍,柳爱春.  中国食品卫生杂志. 2013(01)
[2]应用辛酸硫酸铵法提纯兔抗鸡传染性法氏囊病IgG抗体[J]. 张燕欣,赵云英,李富桂.  黑龙江畜牧兽医. 2013(01)
[3]饲料中硝基呋喃类药物免疫胶体金检测试纸条的研制[J]. 何方洋,冯才伟,孙震,赵正苗,何丽霞.  饲料工业. 2012(23)
[4]胶体金免疫层析技术在兽医临床诊断中的应用进展[J]. 庄金秋,梅建国,沈志强.  中国动物检疫. 2012(09)
[5]快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒胶体金免疫层析方法的建立[J]. 李雪松,符芳,李海忠,王伟,陈欣,郎越坤,田华彬,周艳君,刘永刚,蔡雪辉,李曦.  中国预防兽医学报. 2011(09)
[6]猪旋毛虫病胶体金检测试纸条的制备[J]. 苑淑贤,姚新华,任科研,李萌,杨金生,苑冬梅,李煜洁,常军亮,杨淑苹.  中国生物制品学杂志. 2011(08)
[7]水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用[J]. 孟盟,曹池,陈汉忠,刘明如,王华俊,奉彬,陈国宝.  畜牧兽医学报. 2011(07)
[8]猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研究[J]. 燕永彬,孙静,艾有为,田丽红.  经济动物学报. 2011(02)
[9]狂犬病病毒抗体胶体金检测试纸的制备[J]. 王铁成,张涛,杨松涛,王化磊,高玉伟,孙玮,靳晓霞,赵平森,冯娜,黄耕,邹啸环,夏咸柱.  生物工程学报. 2011(05)
[10]实验动物弓形虫免疫胶体金快速检测方法的建立及试纸制备[J]. 余建国,何忠平.  福建畜牧兽医. 2011(03)

硕士论文
[1]传染性胰腺坏死病毒VP2抗原表位区间接免疫荧光方法的建立[D]. 王健楠.东北农业大学 2012



本文编号：3080399