二种益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能、免疫酶和消化酶活性、肠道菌群结构及TLR9基因表达量的影响
发布时间：2021-03-19 17:58
本实验旨在研究持续性和非持续投喂枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌及其复合菌对军曹鱼幼鱼生长性能、免疫酶、消化酶、肠道菌群结构及TLR9基因表达量的影响,为益生菌在水产养殖业中的应用提供指导。选取平均体重为22.0±0.15g的健康军曹鱼幼鱼840尾,随机分成7个处理（组号:T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6）,每处理3重复,重复40尾鱼。T0组投喂基础饲料,T1、T2、T3组前30d分别投喂含枯草芽孢杆菌1×107cfu/g、嗜酸乳杆菌1×107cfu/g、含枯草芽孢杆菌+嗜酸乳杆菌（1:1）2×107cfu/g的饲料,后20d投喂基础饲料;T4、T5和T6组分别投喂T1、T2、T3组饲料50d,分别在0d、10d、20d、30d、40d、50d检测各实验组血清LZM、SOD、ACP和AKP活性;在0d、30d、50d时获取军曹鱼的肠道,通过高通量测序技术和PCR-DGGE技术分析其肠道菌群结构与多样性,并对优势菌群进行物种注释。在实验结束时称重,计算各处理组的生长性能,并测定肝脏和肠道淀粉酶、蛋白酶活性,测定军曹鱼TLR9基因在肝脏、肾脏、脾脏和肠道中的表达量。结果表明:T0、T1和T...
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
1.1 军曹鱼生物学特征及养殖概况
1.1.1 军曹鱼生物学特征
1.1.2 军曹鱼养殖概况
1.2 益生菌及其在鱼类中的应用
1.2.1 益生菌的定义
1.2.2 益生菌的特性及生理功能
1.2.3 益生菌的作用机理
1.2.4 益生菌在鱼类中的应用
1.2.5 益生菌的研究及应用中存在的问题
1.2.6 展望
1.3 鱼类肠道菌群及研究技术
1.3.1 鱼类肠道菌群的形成
1.3.2 鱼类肠道菌群的数量和组成
1.3.3 鱼类肠道菌群对鱼类机体健康的影响
1.3.4 肠道菌群的分析技术
1.4 研究目的及意义
2 二种益生菌对军曹鱼生长性能、免疫酶及消化酶活性的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 实验主要仪器
2.1.2 实验试剂
2.1.3 益生菌种类及增殖
2.1.4 实验设计及饲料制作
2.1.5 实验用鱼及饲养管理
2.1.6 样品采集及分析方法
2.1.7 计算公式及统计分析
2.2 结果
2.2.1 益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能的影响
2.2.2 益生菌对军曹鱼幼鱼血清免疫酶活性的影响
2.2.3 益生菌对军曹鱼幼鱼消化酶活性的影响
2.3 讨论
2.3.1 益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能的影响
2.3.2 益生菌对军曹鱼幼鱼血清免疫酶的影响
2.3.3 益生菌对军曹鱼幼鱼肝脏及肠道淀粉酶、蛋白酶活性的影响
2.4 小结
3 二种益生菌对军曹鱼肠道菌群结构的影响
3.1 材料与方法
3.1.1 实验设计及仪器试剂
3.1.2 样品采集
3.1.3 肠道菌群总DNA的提取
3.1.4 细菌 16S rDNA V3区PCR扩增
3.1.5 细菌基因组总DNA 16S rDNA V3区扩增片段DGGE分析
3.1.6.数据统计与处理
3.2 实验结果
3.2.1 肠道细菌总DNA琼脂糖电泳结果
3.2.2 细菌 16S rDNA V3区PCR扩增琼脂糖电泳
3.2.3 肠道细菌DGGE电泳图
3.2.4 军曹鱼前肠菌群结构分析
3.2.5 军曹鱼后肠菌群结构分析
3.3 讨论
3.3.1 不同益生菌对军曹鱼幼鱼前肠菌群结构的影响
3.3.2 不同益生菌对军曹鱼幼鱼后肠菌群结构的影响
3.4 小结
4 二种益生菌对军曹鱼TLR9基因表达的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 实验设计及仪器试剂
4.1.2 样品组织的获取
4.1.3 组织总RNA的抽提
4.1.4 总RNA完整性及浓度的检测
4.1.5 总RNA反转成cDNA第一链
4.1.6 TLR9基因表达量的测定
4.1.7 数据统计与处理
4.2 结果与分析
4.2.1 军曹鱼幼鱼不同组织总RNA琼脂糖电泳结果
4.2.2 益生菌对军曹鱼幼鱼肝脏TLR9基因表达量的影响
4.2.3 益生菌对军曹鱼幼鱼肾脏TLR9基因表达量的影响
4.2.4 益生菌对军曹鱼幼鱼脾脏TLR9基因表达量的影响
4.2.5 益生菌对军曹鱼幼鱼肠道TLR9基因表达量的影响
4.3 讨论
4.4 小结
5 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]池塘和工厂化养殖牙鲆肠道菌群结构的比较分析[J]. 李存玉,徐永江,柳学周,杨洪军,史宝,史学营,朱学武. 水产学报. 2015(02)
[2]一种复合益生菌对斜带石斑鱼生长及免疫特性影响的研究[J]. 李小梅,杨丽冬,张家学,舒琥,张海发. 饲料工业. 2015(02)
[3]基于高通量测序的池塘养殖半滑舌鳎消化道菌群的结构特征分析[J]. 张正,李彬,王印庚,廖梅杰,王岚,荣小军. 水生生物学报. 2015(01)
[4]基于高通量测序技术分析肠道菌群及其影响因素的研究进展[J]. 郑艺,张家超,郭壮,张和平. 中国食品学报. 2014(11)
[5]两种疾病发生对养殖半滑舌鳎肠道菌群结构的影响分析[J]. 张正,廖梅杰,李彬,王印庚,王岚,荣小军,陈贵平. 水产学报. 2014(09)
[6]饲料中添加枯草芽孢杆菌对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫力和抗氧化功能的影响[J]. 程远,黄凯,黄秀芸,钟灵香,武林华,黄清,唐丽宁. 动物营养学报. 2014(06)
[7]鱼类肠道微生物的研究进展[J]. 杨彬彬,邵庆均. 中国饲料. 2013(23)
[8]不同月份养殖草鱼幼鱼消化道微生物群落动态变化研究[J]. 倪加加,余育和. 水产学报. 2013(10)
[9]乳酸菌及其代谢产物对刺参幼体肠道菌群和非特异性免疫的影响[J]. 宫魁,王宝杰,刘梅,蒋克勇,邱楚雯,骆作勇,范瑞用,王雷. 海洋科学. 2013(07)
[10]复合益生菌对草鱼养殖水体水质和菌群结构的影响[J]. 郑佳佳,彭丽莎,张小平,孙健栋,傅罗琴,王一冰,胡彩虹,李卫芬. 水产学报. 2013(03)
博士论文
[1]养殖半滑舌鳎常见疾病的病理学观察与感染微生态分析[D]. 张正.中国海洋大学 2012
[2]对虾微生态制剂的研究和应用[D]. 李继秋.中国海洋大学 2004
硕士论文
[1]鲍病原菌的分离、鉴定及微生物群落动态变化与病害相关性研究[D]. 侍浏洋.厦门大学 2014
[2]饲料中补充有益菌对凡纳滨对虾抗病力及其肠道微生物组成影响的研究[D]. 职通瑞.上海海洋大学 2014
[3]地衣芽孢杆菌KL6对鲤鱼生产性能及消化酶活性的影响[D]. 刘阳.天津师范大学 2012
[4]鱼类肠道可定植乳酸杆菌分子生态的研究[D]. 王雯雯.中国农业科学院 2011
[5]不同组合益生菌对鲫鱼生长性能、免疫功能及肠道菌群结构影响研究[D]. 张强.四川农业大学 2010
[6]果寡糖、甘露寡糖和芽孢杆菌对牙鲆免疫功能和肠道微生态的影响[D]. 李富东.集美大学 2010
[7]饵料中添加芽孢杆菌对草鱼生长的影响及机理探讨[D]. 陈南南.浙江大学 2010
[8]PCR-DGGE对六种淡水鱼类肠道菌群结构的比较研究[D]. 许振国.曲阜师范大学 2009
[9]养殖鱼肠道菌群分子生态的研究[D]. 黄光祥.华中农业大学 2008
[10]益生素对异育银鲫消化酶活性、肠道菌群及生产性能的影响[D]. 刘波.南京农业大学 2004
本文编号：3089980
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
1.1 军曹鱼生物学特征及养殖概况
1.1.1 军曹鱼生物学特征
1.1.2 军曹鱼养殖概况
1.2 益生菌及其在鱼类中的应用
1.2.1 益生菌的定义
1.2.2 益生菌的特性及生理功能
1.2.3 益生菌的作用机理
1.2.4 益生菌在鱼类中的应用
1.2.5 益生菌的研究及应用中存在的问题
1.2.6 展望
1.3 鱼类肠道菌群及研究技术
1.3.1 鱼类肠道菌群的形成
1.3.2 鱼类肠道菌群的数量和组成
1.3.3 鱼类肠道菌群对鱼类机体健康的影响
1.3.4 肠道菌群的分析技术
1.4 研究目的及意义
2 二种益生菌对军曹鱼生长性能、免疫酶及消化酶活性的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 实验主要仪器
2.1.2 实验试剂
2.1.3 益生菌种类及增殖
2.1.4 实验设计及饲料制作
2.1.5 实验用鱼及饲养管理
2.1.6 样品采集及分析方法
2.1.7 计算公式及统计分析
2.2 结果
2.2.1 益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能的影响
2.2.2 益生菌对军曹鱼幼鱼血清免疫酶活性的影响
2.2.3 益生菌对军曹鱼幼鱼消化酶活性的影响
2.3 讨论
2.3.1 益生菌对军曹鱼幼鱼生长性能的影响
2.3.2 益生菌对军曹鱼幼鱼血清免疫酶的影响
2.3.3 益生菌对军曹鱼幼鱼肝脏及肠道淀粉酶、蛋白酶活性的影响
2.4 小结
3 二种益生菌对军曹鱼肠道菌群结构的影响
3.1 材料与方法
3.1.1 实验设计及仪器试剂
3.1.2 样品采集
3.1.3 肠道菌群总DNA的提取
3.1.4 细菌 16S rDNA V3区PCR扩增
3.1.5 细菌基因组总DNA 16S rDNA V3区扩增片段DGGE分析
3.1.6.数据统计与处理
3.2 实验结果
3.2.1 肠道细菌总DNA琼脂糖电泳结果
3.2.2 细菌 16S rDNA V3区PCR扩增琼脂糖电泳
3.2.3 肠道细菌DGGE电泳图
3.2.4 军曹鱼前肠菌群结构分析
3.2.5 军曹鱼后肠菌群结构分析
3.3 讨论
3.3.1 不同益生菌对军曹鱼幼鱼前肠菌群结构的影响
3.3.2 不同益生菌对军曹鱼幼鱼后肠菌群结构的影响
3.4 小结
4 二种益生菌对军曹鱼TLR9基因表达的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 实验设计及仪器试剂
4.1.2 样品组织的获取
4.1.3 组织总RNA的抽提
4.1.4 总RNA完整性及浓度的检测
4.1.5 总RNA反转成cDNA第一链
4.1.6 TLR9基因表达量的测定
4.1.7 数据统计与处理
4.2 结果与分析
4.2.1 军曹鱼幼鱼不同组织总RNA琼脂糖电泳结果
4.2.2 益生菌对军曹鱼幼鱼肝脏TLR9基因表达量的影响
4.2.3 益生菌对军曹鱼幼鱼肾脏TLR9基因表达量的影响
4.2.4 益生菌对军曹鱼幼鱼脾脏TLR9基因表达量的影响
4.2.5 益生菌对军曹鱼幼鱼肠道TLR9基因表达量的影响
4.3 讨论
4.4 小结
5 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]池塘和工厂化养殖牙鲆肠道菌群结构的比较分析[J]. 李存玉,徐永江,柳学周,杨洪军,史宝,史学营,朱学武. 水产学报. 2015(02)
[2]一种复合益生菌对斜带石斑鱼生长及免疫特性影响的研究[J]. 李小梅,杨丽冬,张家学,舒琥,张海发. 饲料工业. 2015(02)
[3]基于高通量测序的池塘养殖半滑舌鳎消化道菌群的结构特征分析[J]. 张正,李彬,王印庚,廖梅杰,王岚,荣小军. 水生生物学报. 2015(01)
[4]基于高通量测序技术分析肠道菌群及其影响因素的研究进展[J]. 郑艺,张家超,郭壮,张和平. 中国食品学报. 2014(11)
[5]两种疾病发生对养殖半滑舌鳎肠道菌群结构的影响分析[J]. 张正,廖梅杰,李彬,王印庚,王岚,荣小军,陈贵平. 水产学报. 2014(09)
[6]饲料中添加枯草芽孢杆菌对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫力和抗氧化功能的影响[J]. 程远,黄凯,黄秀芸,钟灵香,武林华,黄清,唐丽宁. 动物营养学报. 2014(06)
[7]鱼类肠道微生物的研究进展[J]. 杨彬彬,邵庆均. 中国饲料. 2013(23)
[8]不同月份养殖草鱼幼鱼消化道微生物群落动态变化研究[J]. 倪加加,余育和. 水产学报. 2013(10)
[9]乳酸菌及其代谢产物对刺参幼体肠道菌群和非特异性免疫的影响[J]. 宫魁,王宝杰,刘梅,蒋克勇,邱楚雯,骆作勇,范瑞用,王雷. 海洋科学. 2013(07)
[10]复合益生菌对草鱼养殖水体水质和菌群结构的影响[J]. 郑佳佳,彭丽莎,张小平,孙健栋,傅罗琴,王一冰,胡彩虹,李卫芬. 水产学报. 2013(03)
博士论文
[1]养殖半滑舌鳎常见疾病的病理学观察与感染微生态分析[D]. 张正.中国海洋大学 2012
[2]对虾微生态制剂的研究和应用[D]. 李继秋.中国海洋大学 2004
硕士论文
[1]鲍病原菌的分离、鉴定及微生物群落动态变化与病害相关性研究[D]. 侍浏洋.厦门大学 2014
[2]饲料中补充有益菌对凡纳滨对虾抗病力及其肠道微生物组成影响的研究[D]. 职通瑞.上海海洋大学 2014
[3]地衣芽孢杆菌KL6对鲤鱼生产性能及消化酶活性的影响[D]. 刘阳.天津师范大学 2012
[4]鱼类肠道可定植乳酸杆菌分子生态的研究[D]. 王雯雯.中国农业科学院 2011
[5]不同组合益生菌对鲫鱼生长性能、免疫功能及肠道菌群结构影响研究[D]. 张强.四川农业大学 2010
[6]果寡糖、甘露寡糖和芽孢杆菌对牙鲆免疫功能和肠道微生态的影响[D]. 李富东.集美大学 2010
[7]饵料中添加芽孢杆菌对草鱼生长的影响及机理探讨[D]. 陈南南.浙江大学 2010
[8]PCR-DGGE对六种淡水鱼类肠道菌群结构的比较研究[D]. 许振国.曲阜师范大学 2009
[9]养殖鱼肠道菌群分子生态的研究[D]. 黄光祥.华中农业大学 2008
[10]益生素对异育银鲫消化酶活性、肠道菌群及生产性能的影响[D]. 刘波.南京农业大学 2004
本文编号：3089980
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