无乳链球菌浓度与水温对罗非鱼免疫相关基因转录水平的影响

发布时间：2021-03-22 18:47

　　本试验选取与罗非鱼抗菌机制（溶菌→抗原呈递→除菌）相关的C型溶菌酶、MHCⅡ、IgM、Hepcidin基因作为研究目标,采用中心复合试验设计和响应曲面分析法,在试验室条件下研究了温度（18-34℃）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）浓度（0.4-6.4×105cfu/mL）对此4个基因在吉富罗非鱼幼鱼肠（intestine）、肝脏组织（hepatopancreas）基因表达量的联合效应。结果表明:（1）温度一次效应、二次效应对罗非鱼肠、肝脏组织IgM基因表达量均有极显著影响（P<0.01）;无乳链球菌浓度一次效应对基因表达量无显著影响（P>0.05）。只在肠组织,温度与无乳链球菌浓度间互作效应显著（P<0.05）,且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏IgM基因表达量模型（方程中T代表温度,S代表无乳链球菌）:Y-i=0.89416-0.11213T+0.40982S-5.49×10-3T×S+3.69×10-3T2-0.041717S2Y-h=5.91988-0.49657T-0.3665S+8.25×10-3T×S+0.01... 

【文章来源】：广东海洋大学广东省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 无乳链球菌概述
    1.2 鱼类免疫相关因子的表达调控
        1.2.1 不同因子胁迫对鱼类IgM表达的影响
        1.2.2 鱼类主要组织相容性复合体的表达研究
        1.2.3 环境因子对鱼类溶菌酶表达的影响
        1.2.4 Hepcidin在鱼类中的表达调控
    1.3 研究目的与意义
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究意义
2 水温、无乳链球菌浓度对吉富罗非鱼IgM基因表达的联合效应
    2.1 试验材料与方法
        2.1.1 材料来源
        2.1.2 试验设计
        2.1.3 试验管理
        2.1.4 组织样品的采集
        2.1.5 Trizol法提取总RNA
        2.1.6 总RNA的DNase I酶消化
        2.1.7 温度、无乳链球菌应激下吉富罗非鱼IgM基因的表达差异
        2.1.8 统计分析
    2.2 试验结果
        2.2.1 模型的恰当性
        2.2.2 模型的建立
        2.2.3 双因子对基因表达量影响的响应曲面分析
        2.2.4 模型拟合度与学生化残差正态概率分析
    2.3 讨论
        2.3.1 无乳链球菌浓度对罗非鱼IgM基因表达的影响
        2.3.2 温度对罗非鱼IgM基因表达的影响
        2.3.3 模型的建立及意义
3 水温、无乳链球菌浓度对吉富罗非鱼MHCⅡ基因表达的联合效应
    3.1 试验材料与方法
        3.1.1 材料来源
        3.1.2 试验设计
        3.1.3 试验管理
        3.1.4 组织样品的采集
        3.1.5 Trizol法提取总RNA
        3.1.6 总RNA的DNase I酶消化
        3.1.7 温度、无乳链球菌应激下吉富罗非鱼MHCII基因的表达差异
        3.1.8 统计分析
    3.2 试验结果
        3.2.1 模型的恰当性
        3.2.2 模型的建立
        3.2.3 温度、无乳链球菌浓度对MHCII基因表达量的响应曲面分析
        3.2.4 模型拟合度与学生化残差正态概率分析
    3.3 讨论
4 水温与无乳链球菌浓度对吉富罗非鱼C型溶菌酶基因表达的联合效应
    4.1 试验材料与方法
        4.1.1 材料来源
        4.1.2 试验设计
        4.1.3 试验管理
        4.1.4 组织样品的采集
        4.1.5 Trizol法提取总RNA
        4.1.6 总RNA的DNase I酶消化
        4.1.7 双因子组合应激下罗非鱼C型溶菌酶基因的表达差异
        4.1.8 统计分析
    4.2 试验结果
        4.2.1 模型的恰当性
        4.2.2 模型的建立
        4.2.3 双因子组合对C型溶菌酶基因表达量的影响的响应曲面分析
        4.2.4 模型拟合度与学生化残差正态概率分析
    4.3 讨论
        4.3.1 无乳链球菌浓度对罗非鱼C型溶菌酶基因表达的影响
        4.3.2 温度对罗非鱼C型溶菌酶基因表达的影响
        4.3.3 模型的建立及意义
5 水温与无乳链球菌浓度对吉富罗非鱼Hepcidin基因表达的联合效应
    5.1 试验材料与方法
        5.1.1 材料来源
        5.1.2 试验设计
        5.1.3 试验管理
        5.1.4 组织样品的采集
        5.1.5 Trizol法提取总RNA
        5.1.6 总RNA的DNase I酶消化
        5.1.7 双因子组合应激下罗非鱼Hepcidin基因的表达差异
        5.1.8 统计分析
    5.2 试验结果
        5.2.1 模型的恰当性
        5.2.2 模型的建立
        5.2.3 双因子组合对Hepcidin基因表达量的影响的响应曲面分析
        5.2.4 模型拟合度与学生化残差正态概率分析
    5.3 讨论
6 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师介绍


【参考文献】：
期刊论文
[1]低温驯化下4种不同品系罗非鱼血清皮质醇与免疫相关指标的变化[J]. 何杰,强俊,徐跑,朱志祥.  中国水产科学. 2014(02)
[2]高温对吉富罗非鱼幼鱼生长及超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活力的影响[J]. 杨洪帅,王辉,刘加慧,梁国栋.  广东海洋大学学报. 2014(01)
[3]温度对尼罗罗非鱼无乳链球菌毒力的影响[J]. 刘志刚,可小丽,卢迈新,朱华平,高风英.  水产学报. 2013(11)
[4]两种不同低温应激方法对吉富罗非鱼（Oreochromis niloticus）死亡率、血清皮质醇和天然免疫因子的影响[J]. 何杰,强俊,朱志祥,徐跑.  海洋与湖沼. 2013(04)
[5]饲料脂肪水平对褐菖鲉血清生化指标、免疫及抗氧化酶活力的影响[J]. 施兆鸿,岳彦峰,彭士明,李云航,孙鹏,尹飞,王建钢.  中国水产科学. 2013(01)
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[7]急性温度应激对吉富品系尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）幼鱼生化指标和肝脏HSP70 mRNA表达的影响[J]. 强俊,杨弘,王辉,徐跑,何杰.  海洋与湖沼. 2012(05)
[8]饲料中维生素D3水平对黄鳝抗菌肽hepcidin基因表达的影响[J]. 黎德兵,李超,张龚炜,唐勇,周定刚,李学伟.  动物营养学报. 2012(08)
[9]海豚链球菌感染对不同品系罗非鱼血液生化指标和肝脏HSP70 mRNA表达的影响[J]. 强俊,杨弘,王辉,徐跑,柒壮林,何杰.  水产学报. 2012(06)
[10]近江牡蛎HSC70基因对溶藻弧菌感染的反应[J]. 刘志刚,张其中,张占会,崔淼.  中国水产科学. 2012(03)

博士论文
[1]基于全基因组序列分析筛选罗非鱼源无乳链球菌ZQ0910株保护性抗原及其免疫保护性研究[D]. 王蓓.中国海洋大学 2013

硕士论文
[1]MHC-Ⅱ类分子在鲤鱼黏膜免疫中的作用[D]. 张彦.山东师范大学 2010
[2]高温逆境下大菱鲆体表生理生化特性研究[D]. 黄智慧.中国海洋大学 2010



本文编号：3094302