美人鱼发光杆菌胞外产物的主要生物学特性分析及免疫保护评价
发布时间：2021-04-04 06:09
美人鱼发光杆菌（Photobacterium damselae）是造成多种水产动物发病的主要病原菌,现已被公认为是水产养殖中的一种新病原。本课题组前期从病死大菱鲆（Turbot）分离到1株美人鱼发光杆菌,对该菌和胞外产物（Extracellular products,ECP）进行主要生物学特性及免疫保护评价分析,旨在揭示美人鱼发光杆菌的致病机理及为该病的防控提供参考。从病死大菱鲆心血中分离到1株优势菌株,经传统鉴定方法、生化鉴定和分子生物学方法确定为美人鱼发光杆菌;该菌对大菱鲆的LD50为6.3×105cfu/mL,对卡那霉素和氟苯尼考等敏感。采用饱和硫酸铵超滤浓缩法制备美人鱼发光杆菌的ECP,琼脂平板扩散法对ECP的酶活性进行研究,同时检测其溶血谱及研究环境理化因子对胞外酶活性的影响,应用SDS-PAGE电泳初步分析蛋白成分,运用LC-MS/MS鉴定蛋白成分。结果显示,美人鱼发光杆菌的ECP有溶血酶、蛋白酶、脂肪酶和卵磷脂酶活性;对兔、绵羊、山羊、大菱鲆红细胞的溶血效价分别为23、24、2
【文章来源】：河北科技师范学院河北省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株分离纯化及革兰染色形态特征（100×）
- 肌醇- d-半乳糖酸盐- d-纤维二+ 侧金盏花+ 吲哚- β-葡萄糖醛酸- β-半乳糖苷- α-葡萄糖苷+ 尿素酶+ d-山梨醇- 酚红- 古老糖- α-半乳糖苷应. rDNA 基因扩增出的条带大小在 1000 bp-2
嗜水气单胞菌等位于不同进化分支，而与美人鱼发光杆菌位于同一个分支（图2-4），进一步证实了分离菌株 Phdd QHD-1 为美人鱼发光杆菌。表 2-8 参考菌株信息Table 2-8 Reference strain information菌株名称 菌株编号 登录号 分离时间创伤弧菌 ATCC27562 NR_113792.1 2011.11嗜水气单胞菌 ATCC7966 X60404.2 1991.8迟缓爱德华菌 ATCC15947 NR_024770.1 2000.11美人鱼发光杆菌 ATCC33539 NR_119052.1 1993.8美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 NBRC15633 NR_113783.1 2011.11美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 K-1 NR_037019.1 1994.3美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 NCIMB2058 X78105.1 1994.3美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 PN510 AY147860.1 2002.9霍乱弧菌 ATCC14035 U10955.1 1994.6哈维氏弧菌 ATCC14126 AF426825.1 2001.10鳗弧菌 NCIMB6 NR_042509.1 2006.3副溶血弧菌 ATCC17802 NR_114632.1 2001.6
【参考文献】：
期刊论文
[1]迟缓爱德华菌胞外产物的致病性及生物活性分析[J]. 张志强,李永慧,杨楠,苏硕青,羊扬,康元环,王洪彬,吴同垒,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(11)
[2]斑点叉尾鮰源致病性维氏气单胞菌的分离与生物学特性鉴定[J]. 田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红,徐丽,林汉卿,管国丹. 中国畜牧兽医. 2018(11)
[3]美人鱼发光杆菌溶血素Hlych基因的原核表达及免疫血清制备[J]. 吴同垒,靳晓敏,王洪彬,陈玥,张志强,高桂生,单晓枫,史秋梅. 动物医学进展. 2018(10)
[4]中国大菱鲆产业发展演进与趋势分析[J]. 刘龙腾,朱雪梅,赵明军. 农业展望. 2018(09)
[5]大菱鲆源美人鱼发光杆菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析[J]. 吴同垒,张志强,李巧玲,王洪彬,任海,高桂生,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(08)
[6]美人鱼发光杆菌研究进展[J]. 王洪彬,吴同垒,张志强,高桂生,史秋梅. 黑龙江畜牧兽医. 2018(09)
[7]半滑舌鳎源美人鱼发光杆菌美人鱼亚种的分离鉴定[J]. 杨楠,张志强,吴同垒,王洪彬,史秋梅,高桂生. 中国兽药杂志. 2018(02)
[8]致水貂出血性肺炎铜绿假单胞菌胞外产物生物活性及免疫保护力分析[J]. 张志强,杨楠,李永慧,苏硕青,王洪彬,闫喜军,白雪,吴同垒,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(02)
[9]大菱鲆源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的分离鉴定[J]. 吴同垒,张志强,李巧玲,潘晓艺,张艳英,高桂生,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(02)
[10]维氏气单胞菌TH0426胞外产物酶活性及免疫原性分析[J]. 毕建飞,陈龙,康元环,孙武文,吴同垒,张海月,张冬星,孟良良,单晓枫,钱爱东. 中国兽医学报. 2017(10)
博士论文
[1]海泥蛭弧菌对对虾、鲍和大菱鲆养殖体系微生物群落的影响[D]. 李欢欢.华南理工大学 2015
[2]海水养殖业发展规模经济及规模效率研究[D]. 王大海.中国海洋大学 2014
[3]斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的性质及该菌检测方法的建立研究[D]. 黄小丽.四川农业大学 2007
硕士论文
[1]维氏气单胞菌TH0426株胞外产物免疫原性及免疫蛋白组学的初步研究[D]. 毕建飞.吉林农业大学 2017
[2]养殖密度对循环水养殖大菱鲆生长、生理特性及水质的影响研究[D]. 乔玮.中国海洋大学 2014
[3]斑点叉尾鮰源维氏气单胞菌胞外产物生物特性分析及致病性研究[D]. 华丽.四川农业大学 2013
[4]大黄鱼源美人鱼发光杆菌的分离鉴定与致病性研究[D]. 张飞.集美大学 2013
[5]养殖刺参（Apostichopus japonicus）溃疡病病原菌致病性研究[D]. 杨嘉龙.中国海洋大学 2008
[6]哈维氏弧菌胞外产物及鞭毛蛋白的研究[D]. 陈雅芳.厦门大学 2006
本文编号：3117877
【文章来源】：河北科技师范学院河北省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株分离纯化及革兰染色形态特征（100×）
- 肌醇- d-半乳糖酸盐- d-纤维二+ 侧金盏花+ 吲哚- β-葡萄糖醛酸- β-半乳糖苷- α-葡萄糖苷+ 尿素酶+ d-山梨醇- 酚红- 古老糖- α-半乳糖苷应. rDNA 基因扩增出的条带大小在 1000 bp-2
嗜水气单胞菌等位于不同进化分支，而与美人鱼发光杆菌位于同一个分支（图2-4），进一步证实了分离菌株 Phdd QHD-1 为美人鱼发光杆菌。表 2-8 参考菌株信息Table 2-8 Reference strain information菌株名称 菌株编号 登录号 分离时间创伤弧菌 ATCC27562 NR_113792.1 2011.11嗜水气单胞菌 ATCC7966 X60404.2 1991.8迟缓爱德华菌 ATCC15947 NR_024770.1 2000.11美人鱼发光杆菌 ATCC33539 NR_119052.1 1993.8美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 NBRC15633 NR_113783.1 2011.11美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 K-1 NR_037019.1 1994.3美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 NCIMB2058 X78105.1 1994.3美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 PN510 AY147860.1 2002.9霍乱弧菌 ATCC14035 U10955.1 1994.6哈维氏弧菌 ATCC14126 AF426825.1 2001.10鳗弧菌 NCIMB6 NR_042509.1 2006.3副溶血弧菌 ATCC17802 NR_114632.1 2001.6
【参考文献】：
期刊论文
[1]迟缓爱德华菌胞外产物的致病性及生物活性分析[J]. 张志强,李永慧,杨楠,苏硕青,羊扬,康元环,王洪彬,吴同垒,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(11)
[2]斑点叉尾鮰源致病性维氏气单胞菌的分离与生物学特性鉴定[J]. 田浪,温贵兰,张升波,杨佰启,李昌红,徐丽,林汉卿,管国丹. 中国畜牧兽医. 2018(11)
[3]美人鱼发光杆菌溶血素Hlych基因的原核表达及免疫血清制备[J]. 吴同垒,靳晓敏,王洪彬,陈玥,张志强,高桂生,单晓枫,史秋梅. 动物医学进展. 2018(10)
[4]中国大菱鲆产业发展演进与趋势分析[J]. 刘龙腾,朱雪梅,赵明军. 农业展望. 2018(09)
[5]大菱鲆源美人鱼发光杆菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析[J]. 吴同垒,张志强,李巧玲,王洪彬,任海,高桂生,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(08)
[6]美人鱼发光杆菌研究进展[J]. 王洪彬,吴同垒,张志强,高桂生,史秋梅. 黑龙江畜牧兽医. 2018(09)
[7]半滑舌鳎源美人鱼发光杆菌美人鱼亚种的分离鉴定[J]. 杨楠,张志强,吴同垒,王洪彬,史秋梅,高桂生. 中国兽药杂志. 2018(02)
[8]致水貂出血性肺炎铜绿假单胞菌胞外产物生物活性及免疫保护力分析[J]. 张志强,杨楠,李永慧,苏硕青,王洪彬,闫喜军,白雪,吴同垒,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(02)
[9]大菱鲆源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的分离鉴定[J]. 吴同垒,张志强,李巧玲,潘晓艺,张艳英,高桂生,史秋梅. 中国兽医学报. 2018(02)
[10]维氏气单胞菌TH0426胞外产物酶活性及免疫原性分析[J]. 毕建飞,陈龙,康元环,孙武文,吴同垒,张海月,张冬星,孟良良,单晓枫,钱爱东. 中国兽医学报. 2017(10)
博士论文
[1]海泥蛭弧菌对对虾、鲍和大菱鲆养殖体系微生物群落的影响[D]. 李欢欢.华南理工大学 2015
[2]海水养殖业发展规模经济及规模效率研究[D]. 王大海.中国海洋大学 2014
[3]斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的性质及该菌检测方法的建立研究[D]. 黄小丽.四川农业大学 2007
硕士论文
[1]维氏气单胞菌TH0426株胞外产物免疫原性及免疫蛋白组学的初步研究[D]. 毕建飞.吉林农业大学 2017
[2]养殖密度对循环水养殖大菱鲆生长、生理特性及水质的影响研究[D]. 乔玮.中国海洋大学 2014
[3]斑点叉尾鮰源维氏气单胞菌胞外产物生物特性分析及致病性研究[D]. 华丽.四川农业大学 2013
[4]大黄鱼源美人鱼发光杆菌的分离鉴定与致病性研究[D]. 张飞.集美大学 2013
[5]养殖刺参（Apostichopus japonicus）溃疡病病原菌致病性研究[D]. 杨嘉龙.中国海洋大学 2008
[6]哈维氏弧菌胞外产物及鞭毛蛋白的研究[D]. 陈雅芳.厦门大学 2006
本文编号：3117877
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