晶体敌百虫对黄鳝肝组织、酶活性及相关去毒基因表达的影响
发布时间：2021-04-06 02:00
农药残留对鱼类的危害，一直是人们比较关注的话题，而黄鳝作为一种重要的淡水鱼类，是否也是受农药迫害的对象之一呢？本研究运用组织学方法分析了晶体敌百虫对黄鳝肝脏组织结构造成的影响，探讨了晶体敌百虫对黄鳝肝脏各解毒酶活性的影响，并分析了相关解毒基因的表达情况。结果如下：（1）黄鳝暴露在不同浓度晶体敌百虫12h、24h和36h时，肝脏组织发生不同程度的病变，随着暴露时间的延长，肝脏组织损伤越严重。主要表现由初始的肝细胞肿胀、部分细胞核呈溶解状、胞质疏松、细胞界限模糊，到大部分细胞核裂解出现大片只剩被染粉红的胞浆的空泡样，而未裂解的细胞核挤压于胞浆一侧；而36h时，大部分细胞已坏死，形成无结界的红染物质；此外，随着晶体敌百虫浓度的增加，出现沉着的黄褐色微细颗粒越多。（2）本实验中，SOD、CAT和GSH-PX的活性均是一开始被激活而后被抑制。12h各浓度处理组的SOD、CAT和GSH-PX活性均增强，这可能是机体受到晶体敌百虫胁迫产生了大量活性氧，而为了清除多余的活性氧SOD、CAT和GSH-PX被激活；24h时，1mg/L和5mg/L处理组各保护酶活性仍呈上升趋势，而10mg/L处理组的CAT...
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1 敌百虫毒理学的研究进展
2 鱼类肝功能及病理研究
2.1 肝脏的功能
2.2 肝脏的病理研究方法
2.3 肝脏病变的原因
3 鱼类肝脏保护酶的研究
3.1 超氧化物歧化酶
3.2 过氧化氢酶
3.3 谷胱甘肽过氧化物酶
4 鱼类肝脏去毒相关基因的研究
4.1 细胞色素 P450（CYP）
4.2 谷胱甘肽 S-转移酶（GSTs）
5 本研究目的与意义
第二章 黄鳝肝脏病理变化的组织学观察
1 材料与方法
1.1 实验用鱼
1.2 试剂及仪器
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器
1.3 实验步骤
2 结果与分析
2.1 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 12h 后肝脏组织的变化
2.2 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 24h 后肝脏组织的变化
2.3 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 36h 后肝脏组织的变化
3 讨论
第三章 敌百虫对黄鳝 SOD、CAT 和 GSH-PX 活性的影响
1 材料与方法
1.1 实验对象
1.2 试剂及仪器
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器
1.3 实验方法
1.4 样品处理与取样
1.5 蛋白质含量测定
1.6 测定方法
1.7 数据分析
2 结果与分析
2.1 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 SOD 活性的影响
2.2 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 CAT 活性的影响
2.3 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 GSH-PX 活性的影响
3 讨论
3.1 晶体敌百虫对肝脏 SOD 活性影响分析
3.2 晶体敌百虫对肝脏 CAT 活性影响分析
3.3 晶体敌百虫对肝脏 GSH-PX 活性影响分析
第四章 黄鳝染毒过程中 Cyp1A、GST 和 GPX 基因表达的研究
1 材料与方法
1.1 实验用鱼
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 取样方法
1.5 总 RNA 的提取
1.6 RNA 质量检测
1.7 总 RNA 反转录
1.8 引物设计
1.9 Cyp1A、GST 和 GPX 基因的扩增
1.9.1 PCR 反应体系
1.9.2 PCR 扩增条件
1.10 数据分析
2 结果与分析
2.1 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 Cyp1A 基因表达情况
2.2 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 GST 基因表达情况
2.3 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 GPX 基因表达情况
3 讨论
第五章 结论与展望
1 主要结论
2 研究展望
参考文献
致谢
本文编号：3120534
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：41 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1 敌百虫毒理学的研究进展
2 鱼类肝功能及病理研究
2.1 肝脏的功能
2.2 肝脏的病理研究方法
2.3 肝脏病变的原因
3 鱼类肝脏保护酶的研究
3.1 超氧化物歧化酶
3.2 过氧化氢酶
3.3 谷胱甘肽过氧化物酶
4 鱼类肝脏去毒相关基因的研究
4.1 细胞色素 P450（CYP）
4.2 谷胱甘肽 S-转移酶（GSTs）
5 本研究目的与意义
第二章 黄鳝肝脏病理变化的组织学观察
1 材料与方法
1.1 实验用鱼
1.2 试剂及仪器
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器
1.3 实验步骤
2 结果与分析
2.1 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 12h 后肝脏组织的变化
2.2 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 24h 后肝脏组织的变化
2.3 黄鳝暴露在晶体敌百虫中 36h 后肝脏组织的变化
3 讨论
第三章 敌百虫对黄鳝 SOD、CAT 和 GSH-PX 活性的影响
1 材料与方法
1.1 实验对象
1.2 试剂及仪器
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器
1.3 实验方法
1.4 样品处理与取样
1.5 蛋白质含量测定
1.6 测定方法
1.7 数据分析
2 结果与分析
2.1 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 SOD 活性的影响
2.2 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 CAT 活性的影响
2.3 在不同浓度晶体敌百虫中暴露不同时间对黄鳝肝脏 GSH-PX 活性的影响
3 讨论
3.1 晶体敌百虫对肝脏 SOD 活性影响分析
3.2 晶体敌百虫对肝脏 CAT 活性影响分析
3.3 晶体敌百虫对肝脏 GSH-PX 活性影响分析
第四章 黄鳝染毒过程中 Cyp1A、GST 和 GPX 基因表达的研究
1 材料与方法
1.1 实验用鱼
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
1.4 取样方法
1.5 总 RNA 的提取
1.6 RNA 质量检测
1.7 总 RNA 反转录
1.8 引物设计
1.9 Cyp1A、GST 和 GPX 基因的扩增
1.9.1 PCR 反应体系
1.9.2 PCR 扩增条件
1.10 数据分析
2 结果与分析
2.1 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 Cyp1A 基因表达情况
2.2 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 GST 基因表达情况
2.3 暴露在不同浓度晶体敌百虫不同时间黄鳝的 GPX 基因表达情况
3 讨论
第五章 结论与展望
1 主要结论
2 研究展望
参考文献
致谢
本文编号：3120534
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