克氏原螯虾proPO和Chst11基因在抗WSSV过程中的作用研究
发布时间：2021-04-23 00:01
克氏原螯虾（Procambarus clarkii）,隶属于节肢动物门（Arthropoda）、甲壳纲（Crustacea）、十足目（Decapoda）、原螯虾属（Procambarus）,是我国重要的淡水经济虾类,亦被作为甲壳动物研究领域的模式生物。近年来,因其肉味鲜美广受国内外人们的欢迎,克氏原螯虾养殖产量随之也逐年攀升。然而,随着人工养殖面积持续扩大,白斑综合征病毒（White spot syndrome virus,WSSV）等病原菌给克氏原螯虾养殖业带来了重大经济损失。因此,对克氏原螯虾抗病毒机制及抗病克氏原螯虾品系培育的研究十分有必要。本研究在前期对克氏原螯虾转录组分析的基础之上,聚焦于可能在克氏原螯虾抗WSSV过程中发挥了重要功能的2个基因:碳水化合物磺基转移酶11（Carbohydrate sulfotransferase11,Chst11）和酚氧化酶原（prophenoloxidase,proPO）,对proPO和Chst11基因在抗WSSV过程中的作用进行了研究,并在proPO基因上成功筛选到克氏原螯虾抗WSSV相关的SNP位点,研究结果可为甲壳动物抗病毒机制提供理...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
第一章 文献综述
1.1 研究问题的由来
1.2 国内外研究现状分析
1.2.1 白斑综合症病毒
1.2.2 proPO和 Chst基因相关研究进展
1.2.3 单核苷酸多态性（SNP）
1.3 研究目的及意义
第二章 克氏原螯虾Chst11 基因c DNA克隆及表达分析
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 总RNA的提取
2.4 反转录
2.5 Chst11基因序列的克隆
2.6 Chst11序列分析
2.7 Chst11在克氏原螯虾各组织中的表达分析
2.8 Chst11 在病毒、细菌及CpG免疫增强剂刺激下的表达分析
3 结果与分析
3.1 Chst11基因的克隆及生物信息分析
3.2 Chst11在克氏原螯虾不同组织中的表达分析
3.3 克氏原螯虾Chst11 基因在病毒、细菌及CpG免疫增强剂刺激下的表达分析
4 讨论
第三章 克氏原螯虾Chst11 在抗WSSV过程中的作用研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 克氏原螯虾Chst11基因原核表达
2.4 Chst11重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的作用
2.5 Chst11 重组蛋白对WSSV复制的影响
3 结果与分析
3.1 Chst11蛋白的表达与纯化
3.2 Chst11对WSSV复制的影响
3.3 Chst11对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
3.4 Chst11 蛋白对WSSV感染克氏原螯虾死亡率的影响
4 讨论
第四章 proPO重组蛋白在克氏原螯虾抗WSSV过程中的研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 引物设计
2.4 克氏原螯虾在WSSV感染下proPO的表达水平
2.5 克氏原螯虾proPO的原核表达
2.6 proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
2.7 proPO重组蛋白对克氏原螯虾体内WSSV复制的影响
2.8 proPO重组蛋白对WSSV感染的克氏原螯虾死亡率的影响
3 结果与分析
3.1 proPO在 WSSV刺激下的表达模式
3.2 proPO重组蛋白的表达与纯化
3.3 proPO重组蛋白对WSSV复制的影响
3.4 proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
3.5 proPO重组蛋白对WSSV感染克氏原螯虾死亡率的影响
4 讨论
第五章 proPO抗 WSSV相关SNP分子标记开发与鉴定
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 引物设计
2.4 proPO基因内含子扩增及序列分析
2.5 proPO基因抗WSSV SNP分子标记的开发和鉴定
3 结果与分析
3.1 proPO内含子扩增及序列分析
3.2 proPO抗 WSSV SNP开发和鉴定
4 讨论
参考文献
攻读硕士期间发表论文情况
致谢
本文编号：3154698
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
第一章 文献综述
1.1 研究问题的由来
1.2 国内外研究现状分析
1.2.1 白斑综合症病毒
1.2.2 proPO和 Chst基因相关研究进展
1.2.3 单核苷酸多态性（SNP）
1.3 研究目的及意义
第二章 克氏原螯虾Chst11 基因c DNA克隆及表达分析
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 总RNA的提取
2.4 反转录
2.5 Chst11基因序列的克隆
2.6 Chst11序列分析
2.7 Chst11在克氏原螯虾各组织中的表达分析
2.8 Chst11 在病毒、细菌及CpG免疫增强剂刺激下的表达分析
3 结果与分析
3.1 Chst11基因的克隆及生物信息分析
3.2 Chst11在克氏原螯虾不同组织中的表达分析
3.3 克氏原螯虾Chst11 基因在病毒、细菌及CpG免疫增强剂刺激下的表达分析
4 讨论
第三章 克氏原螯虾Chst11 在抗WSSV过程中的作用研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 克氏原螯虾Chst11基因原核表达
2.4 Chst11重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的作用
2.5 Chst11 重组蛋白对WSSV复制的影响
3 结果与分析
3.1 Chst11蛋白的表达与纯化
3.2 Chst11对WSSV复制的影响
3.3 Chst11对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
3.4 Chst11 蛋白对WSSV感染克氏原螯虾死亡率的影响
4 讨论
第四章 proPO重组蛋白在克氏原螯虾抗WSSV过程中的研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 引物设计
2.4 克氏原螯虾在WSSV感染下proPO的表达水平
2.5 克氏原螯虾proPO的原核表达
2.6 proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
2.7 proPO重组蛋白对克氏原螯虾体内WSSV复制的影响
2.8 proPO重组蛋白对WSSV感染的克氏原螯虾死亡率的影响
3 结果与分析
3.1 proPO在 WSSV刺激下的表达模式
3.2 proPO重组蛋白的表达与纯化
3.3 proPO重组蛋白对WSSV复制的影响
3.4 proPO重组蛋白对克氏原螯虾免疫相关基因的影响
3.5 proPO重组蛋白对WSSV感染克氏原螯虾死亡率的影响
4 讨论
第五章 proPO抗 WSSV相关SNP分子标记开发与鉴定
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物
2.2 主要试剂及仪器设备
2.3 引物设计
2.4 proPO基因内含子扩增及序列分析
2.5 proPO基因抗WSSV SNP分子标记的开发和鉴定
3 结果与分析
3.1 proPO内含子扩增及序列分析
3.2 proPO抗 WSSV SNP开发和鉴定
4 讨论
参考文献
攻读硕士期间发表论文情况
致谢
本文编号：3154698
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3154698.html
