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硫氧还原蛋白与肿瘤蛋白在WSSV感染中作用及凡纳滨对虾感染WSSV后代谢物的变化

发布时间:2021-05-09 06:30
  白斑综合征病毒(WSSV)是一个严重影响对虾养殖业的病毒,它于1992年首先发现于东南亚地区,此后相继在世界范围内传播开来。由于其可以侵染的宿主范围非常广泛,所以每年都会给对虾养殖业带来巨大的经济损失。该病毒可以侵入多种宿主,包括多种水产动物,如对虾、蟹、淡水虾和小龙虾、以及水生节肢动物和浮游动物[5-6]。本实验拟通过分子生物学以及蛋白质组学的一些方法,来研究硫氧还原蛋白Thiordoxin(TRX)和肿瘤蛋白onoprotein(OP)与WSSV的作用情况,并通过1H20NMR核磁共振光谱分析法分析感染了WSSV的凡纳滨对虾代谢产物的变化情况,以及TRX、Lv20P38、CAT和POD四种基因在凡纳滨对虾感染了WSSV后的变化情况,从而来进一步的探讨WSSV的治病机理[1-4]。Part201:硫氧还原蛋白Thiordoxin(TRX),是一个重要的细胞内抗氧化蛋白,它具有一系列生物学功能。有研究表明,TRX的基因表达量在感染WSSV的动物体内呈上升趋势。然而,TRX在WSSV感染中的作用及对相关信号通路的影响尚不清楚。序列分析表明,TRX可以与WSSV上的结构蛋白WSSV030(... 

【文章来源】:大连海洋大学辽宁省

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
1. 引言
    1.1. 白斑综合征(WSSV)简介
    1.2. 硫氧还原蛋白Thiordoxin(TRX)简介与研究现状
    1.3. 肿瘤蛋白oncoprotein(OP)简介与研究现状
    1.4. RNA干扰技术的简介与研究现状
    1.5. NMR核磁共振光谱分析法简介与研究现状
2. 硫氧还原蛋白Thioredoxin (TRX)与WSSV的相互作用
    2.1. TRX蛋白的原核表达
        2.1.1. 实验材料
        2.1.2. 实验方法
        2.1.3. 实验结果
    2.2. TRX与WSSV结构蛋白VP362 与TK的相互作用
        2.2.1. 实验材料
        2.2.2. 实验方法
        2.2.3. 实验结果
    2.3. TRX对相关基因表达及WSSV感染的影响
        2.3.1. 实验方法
        2.3.2. 实验结果
    2.4. 讨论
3. 凡纳滨对虾肿瘤蛋白oncoprotein(OP)与WSSV的相互作用
    3.1. OP蛋白的原核表达
        3.1.1. 实验材料
        3.1.2. 实验方法
        3.1.3. 实验结果
    3.2. OP与WSSV及VP28N、VP28C的相互作用
        3.2.1. 实验材料
        3.2.2. 实验方法
        3.2.3. 实验结果
    3.3. OP在对虾体内的分布及中和试验
        3.3.1. 实验方法
        3.3.2. 实验结果
    3.4. 讨论
4. ~1H核磁共振(NMR)光谱分析法分析感染WSSV的凡纳滨对虾的代谢情况的研究
    4.1. 实验材料
        4.1.1. 实验试剂
        4.1.2. 实验用虾
        4.1.3. 实验仪器
    4.2. 实验方法
        4.2.1. WSSV的制备
        4.2.2. WSSV感染凡纳滨对虾
        4.2.3. ~1H核磁共振(NMR)光谱分析法分析感染WSSV的凡纳滨对虾的肝胰腺组织
    4.3. 实验结果
        4.3.1. RT-PCR检测感染WSSV的凡纳滨对虾病毒增殖的结果
        4.3.2. ~1H核磁共振(NMR)光谱分析法分析感染WSSV的凡纳滨对虾的肝胰腺组织的结果
        4.3.3. 多元分析
    4.4. 讨论
5. WSSV感染对TRx、LvP38、CAT、POD四种基因转录表达的影响
    5.1. 实验材料
        5.1.1. 实验试剂
        5.1.2. 实验用虾
        5.1.3. 实验仪器
    5.2. 实验方法
    5.3. 实验结果
        5.3.1. TRx、LvP38、CAT和POD四种基因在类淋巴组织中的表达情况
        5.3.2. TRx、LvP38、CAT和POD四种基因在鳃组织中的表达情况
    5.4. 讨论
6. 小结
参考文献
研究生期间发表的论文
致谢
附录


【参考文献】:
期刊论文
[1]感染白斑综合征病毒的斑节对虾免疫酶变化特征[J]. 王专伟,黄建华,杨其彬,周发林,朱彩艳,杨丽诗,江世贵.  湖北农业科学. 2011(09)
[2]Proteomic20Analyses20of20the20Shrimp20White20Spot20Syndrome20Virus[J]. Yan-wei TAN and Zheng-li SHI (State key Laboratory of Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences (CAS), Wuhan 430071, China).  Virologica Sinica. 2008(03)
[3]抗白斑综合征病毒(WSSV)感染途径研究进展[J]. 罗展,黄倢,周丽.  海洋水产研究. 2007(05)
[4]氨氮促使携带白斑综合症病毒凡纳滨对虾发病及其血细胞、酚氧化酶和过氧化氢酶变化[J]. 邱德全,杨士平,邱明生.  渔业现代化. 2007(01)
[5]人工选育中国对虾两个群体WSSV感染相关免疫与生化因子的变化[J]. 刘庆慧,黄倢,杨冰,刘莉.  海洋水产研究. 2005(06)
[6]感染白斑综合症病毒(WSSV)对虾相关免疫因子的研究[J]. 雷质文,黄倢,杨冰,俞开康.  中国水产科学. 2001(04)
[7]斑节对虾白斑综合症杆状病毒(WSBV)的形态和感染的组织病理研究[J]. 周化民.  徐州师范大学学报(自然科学版). 1999(04)



本文编号:3176808

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