条纹锯鮨在性逆转过程中的组织生理学变化和相关基因的克隆及表达特征分析

发布时间：2021-05-10 04:49

　　条纹锯鮨（Centropristis20striata）是一种名贵的海水养殖鱼类,肉质丰腴、味道鲜美,深受消费者的青睐。目前由于人工繁育中常常存在雄性亲鱼高龄化、雌雄生殖不同步和雄鱼缺乏等现象,很大程度上限制了条纹锯鮨人工繁育工作的进行。因此,探明条纹锯鮨性逆转的机理,利用人工方法提早使雌鱼转雄,是大规模人工繁殖的关键。本研究通过外源埋置的方法诱导条纹锯鮨性别转化,得到功能性的雄鱼,同时使用组织学、生理学、分子生物学的方法对诱导的效果进行分析,旨在为大批量人工苗种生产研究提供理论参考。1条纹锯鮨性逆转过程中的组织学及生理学变化为探讨条纹锯鮨性逆转过程中内分泌调节机理,本文采用药条埋置的方法,将17α-甲基睾酮（17α-MT）和芳香化酶抑制剂药条单独和混合埋置到1+龄条纹锯鮨肌肉中,观察并分析性别转换过程中其组织学特征和生理学变化。结果显示,实验结束后,实验组条纹锯鮨已转化为功能性雄鱼,并获得有活力的精子,而对照组仅有少数个体转雄。（1）实验组条纹锯鮨性腺成熟系数先降低后升高,而对照组则变化不显著。随着埋置药条次数增加实验组鱼外观呈出明显的婚姻色,并可以看到头部的脂肪突起,解剖后性腺已由... 

【文章来源】：上海海洋大学上海市

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
    1 石斑鱼繁殖生物学
        1.1 人工繁殖研究概况
        1.2 雌雄同体与性转化
    2 石斑鱼性逆转的诱导及调控机理
        2.1 石斑鱼性逆转的生殖内分泌调节机理
    3 性别决定与性别分化的分子基础
        3.1 Sox9基因
        3.2 Dmrt1基因
        3.3 WT1基因
        3.4 Sf1基因
        3.5 Cyp19基因
        3.6 Foxl2基因
第二章 17α-甲基睾酮及芳香化酶抑制剂对条纹锯鮨性逆转的影响
    1 材料方法
        1.1 实验鱼
        1.2 埋置药条的制备
        1.3 实验设计和样品处理
        1.4 组织学观察
        1.5 血清中性类固醇激素的测定
        1.6 芳香化酶活性的测定
        1.7 数据分析
    2 结果
        2.1 埋置 17α-甲基睾酮和芳香化酶抑制剂对条纹锯鮨性腺发育、性腺成熟系数及排精率的影响
        2.2 埋置 17α-MT、芳香化酶抑制剂对条纹锯鮨血清中性类固醇激素的影响
        2.3 埋置 17α-MT、芳香化酶抑制剂对条纹锯鮨脑芳香化酶活性的影响
    3 讨论
第三章 Dmrt1基因的克隆及表达分析
    1 实验材料与试剂
        1.1 实验材料
        1.2 实验耗材与试剂
    2 实验方法
        2.1 引物设计
        2.2 总RNA的提取
        2.3 cDNA部分片段的克隆
        2.4 cDNA序列的 3’和 5’RACE克隆
        2.5 cDNA的序列分析与结构预测
        2.6 荧光定量PCR检测Dmrt1表达量
    3 实验结果
        3.1 Dmrt1全长cDNA序列的获得及序列特征
        3.2 同源性分析
        3.3 Dmrt1在成体不同组织中及性逆转过程中性腺中的表达
    4 讨论
第四章 Foxl2基因的克隆及表达分析
    1 实验材料与试剂
    2 实验方法
    3 实验结果
        3.1 Foxl2全长cDNA序列的获得及序列特征
        3.2 同源性分析
        3.3 Foxl2基因在成体不同组织中及性逆转过程中性腺中的表达
    4 讨论
        4.1 Foxl2基因的克隆及序列分析
        4.2 Foxl2基因在条纹锯鮨雌雄成体不同组织中的表达
        4.3 Foxl2基因在诱导条纹锯鮨性逆转期间性腺中的表达
结论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3178710