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鲤鱼肽聚糖识别蛋白2(PGRP2)天然免疫作用的初步研究

发布时间:2021-05-10 15:15
  天然免疫是生物体内一种与生俱来的免疫保护机制,能够很好的保护生物体抵御外来病原的入侵以及启动相关的免疫信号通路。天然免疫系统是通过一些在进化中高度保守的模式识别受体(PRRs)来识别微生物。这些PRRs能够识别外界病原微生物的一些特定组分也就是病原相关分子模式(PAMPs),从而激活相关的信号通路来启动天然免疫反应,进而有效的清除和消灭病菌。肽聚糖识别蛋白(PGRPs)是一类重要的天然免疫受体家族,广泛分布于很多无脊椎动物和脊椎动物中的各个组织和器官中。天然免疫正是通过进化上保守的PRRs识别PAMPs来激活相关通路,如PGRPs等可以识别病原微生物的入侵,PGRPs能够结合并且在某些情况下水解细菌细胞壁的肽聚糖(PGN),因为肽聚糖是几乎所有细菌细胞壁的组成成分,所以PGRPs对于生物体抵抗外来病原的入侵、启动相关免疫应答尤为重要。本实验经PCR扩增得到鲤鱼PGRP2的ORF全长为1449 bp,分析了保守结构域预测、信号肽预测、不同物种序列分析以及进化分析。本实验以我国常见的淡水鱼种—鲤鱼为材料,通过提取经嗜水气单胞菌免疫刺激的鲤鱼各个组织的RNA来探究PGRP2在mRNA水平上的... 

【文章来源】:山东师范大学山东省

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 综述
    1 天然免疫和肽聚糖
    2 肽聚糖识别蛋白
        2.1 肽聚糖识别蛋白的发现和命名
        2.2 肽聚糖识别蛋白的分类和结构
        2.3 肽聚糖识别蛋白的表达
        2.4 肽聚糖识别蛋白的功能
        2.5 本论文的研究意义
第二章 鲤鱼PGRP2 基因结构及序列分析
    1 前言
    2 实验方法
        2.1 实验方法
    3 实验结果
        3.1 鲤鱼PGRP2 氨基酸序列保守结构域
        3.2 鲤鱼PGRP2 信号肽预测
        3.3 不同物种PGRP氨基酸序列比对
        3.4 不同物种PGRP进化树分析
    4 讨论
第三章 鲤鱼PGRP2 基因在发育阶段和免疫刺激后的表达模式分析
    1 前言
    2 实验材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3 实验结果
        3.1 正常鲤鱼各组织PGRP2 基因表达的定量检测
        3.2 鲤鱼不同发育阶段的PGRP2 基因表达的定量检测
        3.3 注射嗜水气单胞菌刺激后鲤鱼PGRP2 基因表达的定量检测
        3.4 浸泡嗜水气单胞菌刺激后鲤鱼PGRP2 基因表达的定量检测
    4 讨论
第四章 鲤鱼PGRP2 基因的体外表达以及功能检测
    1 前言
    2 实验材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
    3 实验结果
        3.1 鲤鱼PGRP2 ORF扩增
        3.2 鲤鱼PGRP2 菌落PCR及测序鉴定
        3.3 鲤鱼PGRP2 原核表达载体构建
        3.4 鲤鱼PGRP2 的表达及纯化
        3.5 重组PGRP2 体外活性及功能检测
    4 讨论
结论
参考文献
致谢



本文编号:3179585

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