雌二醇作用下菲律宾蛤仔性别分化的分子机制研究

发布时间：2021-05-11 05:42

　　菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）属软体动物门、双壳纲、帘形目、帘蛤科、蛤仔属,在我国南北沿海均有分布,我国传统“四大养殖贝类”之一,其生长速度快,养殖周期短,适应性强（广温、广盐、广分布）,市场前景广阔。本研究通过组织切片方法对雌二醇刺激条件下的空白组、实验组进行切片显微观察并统计各组的雌雄比,通过荧光定量PCR技术对蛤仔不同发育时期、短期雌二醇处理下蛤仔及长期雌二醇刺激条件下的空白组、实验组中雌雄及雌雄同体蛤仔的Dmrt基因进行表达分析,并通过测序的方法对空白组及雌二醇刺激的实验组进行转录组分析。研究结果为菲律宾蛤仔的早期性腺发育,性别分化及性别调控机制提供理论依据。1、外源性激素作用下蛤仔性别分化情况分析预实验中10μg/L的雌二醇组在测定各组别的雌二醇含量时,该组的雌雄雌二醇含量较空白组有显著的提高。正式实验中,将蛤仔分别在室内常温10μg/L的雌二醇海水中和普通对照海水中养殖,待两个月性腺发育成熟后,进行蛤仔性腺组织切片观察,结果表明,雌二醇处理的实验组组雌、雄蛤仔分别为85、61个,雌雄比为1.39:1;空白组中雌、雄蛤仔分别为68、73个,雌雄比... 

【文章来源】：大连海洋大学辽宁省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 性类固醇激素在水生动物中性别分化的研究进展
    1.2 性别相关基因在水生生物性别分化中的研究进展
    1.3 性别相关转录组学研究进展
    1.4 Dmrt基因的研究
        1.4.1 Dmrt基因的发现及其功能
        1.4.2 Dmrt基因的特点
    1.5 本研究的目的和意义
第二章 外源性激素作用下蛤仔性比及体内性激素含量变化比较
    2.1 材料和方法
        2.1.1 实验材料及实验药品器材
    2.2 激素刺激
        2.2.1 组织切片
    2.3 数据处理和分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 预实验结果
        2.4.2 正式实验结果
    2.5 讨论
第三章 雌二醇刺激下的菲律宾蛤仔转录组分析
    3.1 实验样品
    3.2 实验方法
        3.2.1 实验材料的准备
        3.2.2 Trizol法提取蛤仔总RNA
        3.2.3 建库及测序方法
    3.3 结果
        3.3.1 测序数据质量评估和过滤结果
        3.3.2 转录本拼接及功能基因注释结果
        3.3.3 差异表达筛选与聚类分析结果
        3.3.4 差异基因GO注释结果分析
        3.3.5 KEGG通路注释结果
        3.3.6 转录组验证
    3.4 讨论
第四章 蛤仔Dmrt基因家族特征分析及表达研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验样品
        4.1.2 总RNA的提取与cDNA合成
        4.1.3 基因及对应引物序列
        4.1.4 鉴定Dmrt基因
        4.1.5 实时荧光定量PCR
        4.1.6 数据分析
    4.2 结果
        4.2.1 Dmrt基因家族参数
        4.2.2 Dmrt基因的表达
    4.3 讨论
结论
参考文献
学术成果
致谢



本文编号：3180833