米尔伊丽莎白菌快速分子检测方法的建立与应用

发布时间：2021-05-31 14:42

　　米尔伊丽莎白菌（Elizabethkingia miricola）是一种临床新兴的条件致病菌,可造成新生儿和免疫缺陷人群菌血症、尿路感染等,近年来,被报道可引起蛙类歪头、白内障及内脏出血等症状,导致蛙出现暴发性死亡。米尔伊丽莎白菌感染对我国蛙类养殖业造成了巨大的经济损失。同时,该菌也可作为一种潜在的人畜共患菌,对人类健康具有潜在威胁。因此,建立一种准确、快速的米尔伊丽莎白菌检测方法对米尔伊丽莎白菌感染引发病害的诊断及防控措施的建立均具有重要意义。本研究以米尔伊丽莎白菌为研究对象,建立双重PCR和荧光定量PCR检测方法,以期为米尔伊丽莎白菌感染的早期检测及流行病学调查提供技术支持。1.米尔伊丽莎白菌双重PCR检测方法的建立:分别以伊丽莎白菌的PNGase F基因、米尔伊丽莎白菌的ure G基因为分子靶标,设计两对扩增片段长度为1192 bp与246 bp的特异性引物,优化反应条件,并对其特异性、灵敏性进行评价。结果显示:该双重PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性。PNGase F基因引物仅对伊丽莎白菌属内物种出现了特异性扩增,而ure G基因引物仅能对米尔伊丽莎白菌进行特异性扩增;能检... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

伊丽莎白菌PNGaseF序列比对（局部）

图2.2双重PCR退火温度优化

图2.3双重PCR退火时间优化

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3208448