饲料脂肪水平和脂肪酸组成对大菱鲆幼鱼脂沉积的影响

发布时间：2021-06-11 23:29

　　以我国重要的冷水性经济养殖鱼类大菱鲆（Scophthalmus maximus L.）为研究对象，在室内循环养殖水系统进行摄食生长实验，以探究饲料中脂肪水平和脂肪酸组成对大菱鲆生长、脂肪酸组成、脂肪沉积及其相关基因表达的影响，在此基础上探讨大菱鲆摄食高脂或高植物油水平饲料后肝脏脂肪过多沉积的分子机制。本文的研究内容和主要研究结果如下：1大菱鲆脂蛋白脂酶、过氧化物酶体增殖物激活受体α和微粒体甘油三酯转移蛋白的克隆、表征分析和组织差异性表达通过同源克隆和RACE技术从大菱鲆中获得脂蛋白脂酶（LPL）、过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）和微粒体甘油三酯转移蛋白（MTP）的cDNA全长。大菱鲆LPL全长共计2074bp，其中5′-非编码区、3′-非编码区和开放阅读框（ORF）分别为152bp、377bp和1545bp，编码514个氨基酸。LPL具有1个跨膜区域。通过氨基酸序列比对发现，大菱鲆LPL与其它已知鱼纲脊椎动物该基因序列具有高度同源性。组织差异性表达结果显示，大菱鲆LPL在肌肉中表达量最高，其次是肝脏和肾脏，而在鳃、脑、脾脏、心脏、肾脏、精巢、小肠和幽门盲囊中表达量较低（P&l... 

【文章来源】：中国海洋大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：213 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
引言
第一章 文献综述
    1 饲料脂肪在鱼体中的代谢
        1.1 脂肪的消化
        1.2 脂肪酸的转运和吸收
        1.3 细胞内的脂肪代谢
            1.3.1 脂肪分解代谢
            1.3.2 脂肪合成代谢
            1.3.3 脂肪转运
    2 脂肪沉积
        2.1 脂肪沉积的概念
        2.2 脂肪沉积的产所
        2.3 脂肪沉积相关的调控因子
            2.3.1 过氧化物酶体增殖物激活受体
            2.3.2 固醇调节元件结合蛋白-1
            2.3.3 肝 X 受体
            2.3.4 肝细胞核因子 4α
            2.3.5 法尼酯衍生物 X 受体
    3 鱼类脂肪沉积影响因素
        3.1 饲料脂肪水平
        3.2 饲料脂肪酸组成
        3.3 激素类
            3.3.1 胰岛素
            3.3.2 瘦素
    4 展望
    5 本研究的目的和意义
        5.1 研究目的
        5.2 研究意义
第二章 大菱鲆脂蛋白脂酶、过氧化物酶体增殖物激活受体和微粒体甘油三酯转移蛋白的克隆、表征分析和组织差异性表达
    1 引言
    2 材料方法
        2.1 样品取样
        2.2 RNA 提取和 cDNA 合成
        2.3 引物的设计和核心片段的克隆
        2.4 3′-RACE PCR
        2.5 5′-RACE PCR
        2.6 序列分析和系统进化分析
        2.7 实时定量 PCR
        2.8 统计分析
    3 实验结果
        3.1 核苷酸和氨基酸序列
        3.2 序列比对和系统进化树分析
        3.3 组织差异性表达
    4. 讨论
    附表和图
第三章 饲料脂肪水平对大菱鲆幼鱼生长、血浆生化指标、脂肪酸组成、脂肪沉积及相关基因表达的影响
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 饲料配方和制备
        2.2 实验养殖和样品
        2.3 化学分析
            2.3.1 体组成分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 RNA 提取、基因核心片段的克隆和实时定量 PCR （qPCR）
            2.4.1 肝脏 RNA 提取和 cDNA 的合成
            2.4.2 引物的设计和核心片段的克隆
            2.4.3 实时定量 PCR
        2.5 计算方法和统计分析
    3 实验结果
        3.1 存活、生长和形体指标
        3.2 鱼体体成分
        3.3 肝脏和肌肉脂肪酸组成
        3.4 血浆生化指标
        3.5 肝脏 LPL、G6PD 和 ME 酶活力及脂肪沉积相关基因表达
    4 讨论
    附表和图
第四章 饲料脂肪酸水平和组成对大菱鲆幼鱼生长和脂肪酸组成的影响
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 饲料配方和制备
        2.2 实验养殖和样品采集
        2.3 化学分析
            2.3.1 体成分分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 钇的含量测定
        2.5 计算方法和统计分析
    3 实验结果
        3.1 存活率、生长和形体指标
            3.1.1 饲料棕榈油（PO）水平
            3.1.2 饲料菜籽油（RO）水平
            3.1.3 饲料豆油（SO）水平
            3.1.4 饲料亚麻籽油（LO）水平
            3.1.5 饲料高 SFA（100%PO）、MUFA（100%RO）、LA（100%SO）、ALA（100%LO）和 n3 LC-PUFA（100%FO）水平
        3.2 鱼体体组成
            3.2.1 饲料 PO 水平
            3.2.2 饲料 RO 水平
            3.2.3 饲料 SO 水平
            3.2.4 饲料 LO 水平
            3.2.5 饲料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
        3.3 饲料脂肪表观消化率（ADC）
        3.4 肝脏和肌肉脂肪酸组成
            3.4.1 饲料 PO 水平
            3.4.2 饲料 RO 水平
            3.4.3 饲料 SO 水平
            3.4.4 饲料 LO 水平
            3.4.5 饲料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
    4 讨论
        4.1 饲料棕榈油（PO）替代水平
        4.2 饲料菜籽油（RO）替代水平
        4.3 饲料豆油（SO）替代水平
        4.4 饲料亚麻籽油（LO）替代水平
        4.5 饲料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
    附表和图
第五章 满足 N3 LC-PUFA 需求下，饲料脂肪酸组成对大菱鲆生长、血浆生化指标、脂肪酸组成、脂肪沉积及相关基因表达的影响
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 饲料配方和制备
        2.2 实验养殖和样品采集
        2.3 化学分析
            2.3.1 体组成分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 RNA 提取和实时定量 PCR （qPCR）
        2.5 计算方法和统计分析
    3 实验结果
        3.1 存活、生长和形体指标
        3.2 鱼体体组成
        3.3 肝脏和肌肉脂肪酸组成
        3.4 血浆生化指标
        3.5 肝脏 G6PD 和 ME 酶活力及脂肪沉积相关基因表达
    4 讨论
    附表和图
第六章 全文总结
参考文献
致谢
个人简历
本文作者博士期间的文章



本文编号：3225478