低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及葛根素和姜黄素的缓释作用研究
发布时间：2021-06-26 19:34
本研究采用生理生化及分子生物学技术,评估了低氧胁迫对大弹涂鱼（Boleophthalmus pectinirostris）生理的影响,并通过腹腔注射葛根素和姜黄素,探讨其对大弹涂鱼低氧生理应激的缓释作用,研究成果将为彻底阐明鱼类低氧生理应激的分子机制和调控策略的研发提供理论依据。本研究由以下三个部分组成:（1）HIF-1α信号通路在大弹涂鱼耐低氧胁迫中的作用。本研究通过设置常氧组（NG组）和缺氧组（HG组）,探究急性低氧（1、3和6 h）对大弹涂鱼低氧相关酶活性、基因表达及蛋白含量的影响。结果显示,整个低氧过程中,对照组实验鱼肝脏中低氧相关酶活性、基因表达及蛋白含量无显著性差异。缺氧组实验鱼肝脏中乳酸脱氢酶（LDH）、柠檬酸合酶（CS）和丙酮酸激酶（PK）活性呈下调趋势,6 h时达到最低;而葡萄糖激酶（GCK）和磷酸果糖激酶（PFK）活性在3 h时最高,随后逐渐降低;缺氧组实验鱼肝脏中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、葡萄糖转运体-1（GLUT1）、脯氨酰羟化酶（PHD）和Bcl2/腺癌E1B19KD交互蛋白3（BNIP3）基因的mRNA表达量和蛋白含量呈逐渐上调趋势;而肿瘤抑制蛋白...
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 含氧量在水产养殖中的重要性
1.1.1 过高、过低溶解氧对水产养殖鱼类造成的影响
1.1.2 低氧的形成及对水生动物造成的影响
1.2 鱼类应对低氧胁迫的研究进展
1.2.1 糖酵解相关酶在鱼类耐低氧胁迫中的作用
1.2.2 HIF信号通路中关键基因在鱼类耐低氧胁迫中的分子作用
1.2.3 凋亡通路中关键基因在鱼类耐低氧胁迫中的分子作用
1.3 中草药提取物对低氧诱导疾病的缓释作用及重要性
1.3.1 葛根素在鱼类耐低氧胁迫中的缓释作用
1.3.2 姜黄素在鱼类耐低氧胁迫中的缓释作用
1.4 大弹涂鱼应对胁迫的研究进展
1.5 本研究的目的与意义
第二章 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关酶活性、基因表达及蛋白含量的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 材料准备
2.1.2 实验设计
2.1.3 取样
2.1.4 总RNA提取及cDNA合成
2.1.5 基因表达分析
2.1.6 蛋白含量和酶活性分析
2.1.7 统计分析
2.2 结果
2.2.1 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关酶活性的影响
2.2.2 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关基因表达的影响
2.2.3 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关蛋白含量的影响
2.3 讨论
第三章 低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及葛根素的缓释作用研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料准备及实验分组
3.1.2 实验设计
3.1.3 取样
3.1.4 总RNA提取和cDNA合成
3.1.5 基因表达分析
3.1.6 磷酸化含量分析
3.1.7 统计分析
3.2 结果
3.2.1 低氧对大弹涂鱼肝脏AKT和GSK-3β磷酸化含量变化的影响
3.2.2 低氧对大弹涂鱼肝脏低氧基因变化及葛根素缓释作用的影响
3.2.3 低氧对大弹涂鱼鳃低氧基因变化及葛根素缓释作用的影响
3.3 讨论
3.3.1 低氧诱导大弹涂鱼肝脏AKT、GSK-3β的磷酸化变化
3.3.2 葛根素在大弹涂鱼肝组织耐低氧胁迫中的缓释作用
3.3.3 葛根素在鱼类鳃组织耐低氧胁迫中的缓释作用
第四章 低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及姜黄素的缓释作用研究
4.1 材料与方法
4.1.1 材料准备及实验分组
4.1.2 实验设计
4.1.3 取样
4.1.4 总RNA提取和cDNA合成
4.1.5 基因表达分析
4.1.6 统计分析
4.2 结果
4.2.1 低氧对大弹涂鱼肝脏低氧基因变化及姜黄素缓释作用的影响
4.2.2 低氧对大弹涂鱼鳃低氧基因变化及姜黄素缓释作用的影响
4.3 讨论
4.3.1 姜黄素在大弹涂鱼肝组织耐低氧胁迫中的缓释作用
4.3.2 姜黄素在大弹涂鱼鳃组织耐低氧胁迫中的缓释作用
结论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]高溶氧对西伯利亚鲟幼鱼非特异性免疫指标的影响[J]. 王晓雯,朱华,马国庆,HU Hong-xia. 四川农业大学学报. 2017(01)
[2]低温胁迫对鱼类PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的影响[J]. 王金凤,胡鹏,牛虹博,陈良标. 生物学杂志. 2016(06)
[3]姜黄素对草鱼急性肝损伤的保护作用研究[J]. 喻运珍,余少梅,熊文静,张生元,徐志强,郑翠华,周汝珍. 湖北农业科学. 2016(06)
[4]红景天对斑马鱼游泳和耐低氧能力的影响的初步研究[J]. 范能全,彭兰,杨武,张璞,江静子. 药物分析杂志. 2015(08)
[5]葛根素对PI3K/AKT通路介导PASMCS凋亡的影响[J]. 张晓丹,杨艳南,王淑静,朱大岭,王力维,盛洁静,宋莎莎. 中国中药杂志. 2015(15)
[6]The hypoxia signaling pathway and hypoxic adaptation in fishes[J]. XIAO Wuhan. Science China（Life Sciences）. 2015(02)
[7]盐度和溶解氧对刺参非特异性免疫酶活性的影响[J]. 郑慧,李彬,荣小军,廖梅杰,陈贵平,张正,王岚,王印庚,邹安革. 渔业科学进展. 2014(01)
[8]温度和低氧对白鲢乳酸与糖水平的影响[J]. 何伟,曹振东,付世建. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2013(05)
[9]葛根素对大鼠脑缺血再灌注侧皮质区细胞凋亡及p-Akt （Ser473）表达的影响[J]. 韩江全,于奎营,何敏,李向荣,胡泳涛,林冬融,卢俊江. 中国中西医结合杂志. 2012(08)
[10]大弹涂鱼（Boleophthalmus pectinirostris）窒息点及昼夜代谢规律[J]. 曹伏君,郭良珍. 海洋与湖沼. 2011(06)
博士论文
[1]Curcumin治疗胶质母细胞瘤分子机制研究[D]. 吴炳山.南方医科大学 2013
硕士论文
[1]牛磺酸对缺氧/复氧损伤斑马鱼幼鱼脑组织GRP78、GADD34表达的影响[D]. 黄玉莎.南方医科大学 2016
[2]葛根素对PI3K/AKT通路介导PASMCS凋亡的影响[D]. 杨艳南.哈尔滨商业大学 2015
[3]急、慢性缺氧对斑马鱼幼鱼神经系统损伤机制的初步研究[D]. 赵丹.南方医科大学 2014
[4]姜黄素诱导MDA-MB-468乳腺癌细胞凋亡中Akt-FoxO1通路的初步研究[D]. 张莉.华东师范大学 2012
[5]限制溶解氧供应对褐牙鲆幼鱼生长的影响及其机制的实验研究[D]. 李洁.中国海洋大学 2011
[6]齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中PI3K-AKT-GSK-3β信号传导通路的影响[D]. 华福洲.南京医科大学 2010
本文编号：3251949
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 含氧量在水产养殖中的重要性
1.1.1 过高、过低溶解氧对水产养殖鱼类造成的影响
1.1.2 低氧的形成及对水生动物造成的影响
1.2 鱼类应对低氧胁迫的研究进展
1.2.1 糖酵解相关酶在鱼类耐低氧胁迫中的作用
1.2.2 HIF信号通路中关键基因在鱼类耐低氧胁迫中的分子作用
1.2.3 凋亡通路中关键基因在鱼类耐低氧胁迫中的分子作用
1.3 中草药提取物对低氧诱导疾病的缓释作用及重要性
1.3.1 葛根素在鱼类耐低氧胁迫中的缓释作用
1.3.2 姜黄素在鱼类耐低氧胁迫中的缓释作用
1.4 大弹涂鱼应对胁迫的研究进展
1.5 本研究的目的与意义
第二章 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关酶活性、基因表达及蛋白含量的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 材料准备
2.1.2 实验设计
2.1.3 取样
2.1.4 总RNA提取及cDNA合成
2.1.5 基因表达分析
2.1.6 蛋白含量和酶活性分析
2.1.7 统计分析
2.2 结果
2.2.1 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关酶活性的影响
2.2.2 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关基因表达的影响
2.2.3 急性低氧对大弹涂鱼低氧应答相关蛋白含量的影响
2.3 讨论
第三章 低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及葛根素的缓释作用研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料准备及实验分组
3.1.2 实验设计
3.1.3 取样
3.1.4 总RNA提取和cDNA合成
3.1.5 基因表达分析
3.1.6 磷酸化含量分析
3.1.7 统计分析
3.2 结果
3.2.1 低氧对大弹涂鱼肝脏AKT和GSK-3β磷酸化含量变化的影响
3.2.2 低氧对大弹涂鱼肝脏低氧基因变化及葛根素缓释作用的影响
3.2.3 低氧对大弹涂鱼鳃低氧基因变化及葛根素缓释作用的影响
3.3 讨论
3.3.1 低氧诱导大弹涂鱼肝脏AKT、GSK-3β的磷酸化变化
3.3.2 葛根素在大弹涂鱼肝组织耐低氧胁迫中的缓释作用
3.3.3 葛根素在鱼类鳃组织耐低氧胁迫中的缓释作用
第四章 低氧诱导大弹涂鱼低氧生理应激及姜黄素的缓释作用研究
4.1 材料与方法
4.1.1 材料准备及实验分组
4.1.2 实验设计
4.1.3 取样
4.1.4 总RNA提取和cDNA合成
4.1.5 基因表达分析
4.1.6 统计分析
4.2 结果
4.2.1 低氧对大弹涂鱼肝脏低氧基因变化及姜黄素缓释作用的影响
4.2.2 低氧对大弹涂鱼鳃低氧基因变化及姜黄素缓释作用的影响
4.3 讨论
4.3.1 姜黄素在大弹涂鱼肝组织耐低氧胁迫中的缓释作用
4.3.2 姜黄素在大弹涂鱼鳃组织耐低氧胁迫中的缓释作用
结论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]高溶氧对西伯利亚鲟幼鱼非特异性免疫指标的影响[J]. 王晓雯,朱华,马国庆,HU Hong-xia. 四川农业大学学报. 2017(01)
[2]低温胁迫对鱼类PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的影响[J]. 王金凤,胡鹏,牛虹博,陈良标. 生物学杂志. 2016(06)
[3]姜黄素对草鱼急性肝损伤的保护作用研究[J]. 喻运珍,余少梅,熊文静,张生元,徐志强,郑翠华,周汝珍. 湖北农业科学. 2016(06)
[4]红景天对斑马鱼游泳和耐低氧能力的影响的初步研究[J]. 范能全,彭兰,杨武,张璞,江静子. 药物分析杂志. 2015(08)
[5]葛根素对PI3K/AKT通路介导PASMCS凋亡的影响[J]. 张晓丹,杨艳南,王淑静,朱大岭,王力维,盛洁静,宋莎莎. 中国中药杂志. 2015(15)
[6]The hypoxia signaling pathway and hypoxic adaptation in fishes[J]. XIAO Wuhan. Science China（Life Sciences）. 2015(02)
[7]盐度和溶解氧对刺参非特异性免疫酶活性的影响[J]. 郑慧,李彬,荣小军,廖梅杰,陈贵平,张正,王岚,王印庚,邹安革. 渔业科学进展. 2014(01)
[8]温度和低氧对白鲢乳酸与糖水平的影响[J]. 何伟,曹振东,付世建. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2013(05)
[9]葛根素对大鼠脑缺血再灌注侧皮质区细胞凋亡及p-Akt （Ser473）表达的影响[J]. 韩江全,于奎营,何敏,李向荣,胡泳涛,林冬融,卢俊江. 中国中西医结合杂志. 2012(08)
[10]大弹涂鱼（Boleophthalmus pectinirostris）窒息点及昼夜代谢规律[J]. 曹伏君,郭良珍. 海洋与湖沼. 2011(06)
博士论文
[1]Curcumin治疗胶质母细胞瘤分子机制研究[D]. 吴炳山.南方医科大学 2013
硕士论文
[1]牛磺酸对缺氧/复氧损伤斑马鱼幼鱼脑组织GRP78、GADD34表达的影响[D]. 黄玉莎.南方医科大学 2016
[2]葛根素对PI3K/AKT通路介导PASMCS凋亡的影响[D]. 杨艳南.哈尔滨商业大学 2015
[3]急、慢性缺氧对斑马鱼幼鱼神经系统损伤机制的初步研究[D]. 赵丹.南方医科大学 2014
[4]姜黄素诱导MDA-MB-468乳腺癌细胞凋亡中Akt-FoxO1通路的初步研究[D]. 张莉.华东师范大学 2012
[5]限制溶解氧供应对褐牙鲆幼鱼生长的影响及其机制的实验研究[D]. 李洁.中国海洋大学 2011
[6]齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中PI3K-AKT-GSK-3β信号传导通路的影响[D]. 华福洲.南京医科大学 2010
本文编号：3251949
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