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东北七鳃鳗Li protein的分子克

发布时间:2021-07-03 20:34
  以七鳃鳗为代表的无颌类脊椎动物,是现存具有适应性免疫系统最古老的物种。其独特的特异性抗原受体和白细胞表面抗原等重要的免疫分子,与有颌类脊椎动物的适应性免疫系统形成了鲜明地对比。然而,七鳃鳗是以哪种免疫分子执行外源入侵细胞的杀伤与清除还没有相关文献报道。本实验室前期在七鳃鳗免疫小体的研究中,发现了一种细胞毒作用的蛋白,并命名为李蛋白(Li protein)。根据Li protein的质谱结果,本研究通过分子生物学相关技术获得了Li protein的cDNA全长,共1120bp。生物信息学分析表明李蛋白共有两个功能域,位于N端的Jacalinlike domain和位于C端的Aerolysin domain,空间结构主要以β折叠片层组成。无论从一级结构还是空间结构,Li protein与哺乳动物的细胞毒作用免疫分子差异显著。生物信息学分析还发现在海七鳃鳗基因组中Li protein具有高度的多态性,不同序列之间最大差别是等电点不同,这可能与它杀伤不同的靶细胞类型相关。本研究还利用原核表达系统制备了有活性的重组李蛋白(rLi protein),并以rLiprotein为... 

【文章来源】:辽宁师范大学辽宁省

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

东北七鳃鳗Li protein的分子克


特异性抗原受体的起源与进化

七鳃鳗,小体


对该组织的细胞进行体外培养时发现,该细胞能够向培 MCF-7 细胞具有强烈杀伤能力的未知组分。随后的研究鉴定该组分作用的蛋白分子,并由本实验室命名为李蛋白(Li protein)。这是国研究中首次发现具有细胞毒作用的免疫分子,具有很高的研究价值。基因克隆、原核表达及组织定位几个方面进行研究,为探索李蛋白在的生理功能奠定基础,同时也为适应性免疫系统的进化提供一个全

电泳图,电泳图,蛋白质谱,测序


Total RNA 电泳图 (M: DL-2000 Marker; 1, 2: Totaltal RNA electrophoretogram(M: DL-2000 Marker; 1, 2:因的 EST 验证 PCR 结果 cDNA 文库中,与李蛋白质谱结果相匹配的 E列和 PolyA 尾结构,因此认为该序列具有完整 5'-RACE 便可得到该基因 cDNA 的全长。但是 中是否存在 Li protein 的 mRNA 进行验证,因时设立 M-MLV(-)对照),利用 EST 的核苷物 Li-Check R 进行验证 PCR。随后将 PCR 产物右的目的条带(图 2.2),与理论大小相符合。大连)有限公司测序,测序结果与 EST 中引物之tal RNA 可以用于下一步的 5'-RACE 实验。


本文编号:3263305

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