基于toxR基因的轮虫弧菌荧光定量微流控快速检测技术的建立
发布时间:2021-07-07 21:44
以轮虫弧菌的单拷贝基因toxR基因的高保守区域为目的片段,设计特异性引物,构建重组质粒标准品,建立针对该菌的荧光定量PCR检测方法。以此为基础,实验选用UF-150 Genechecker微流控荧光定量PCR仪,通过优化反应体系和反应条件,建立了轮虫弧菌的微流控荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法能特异性扩增toxR基因目的片段,对轮虫弧菌纯培养物检测下限为1.34×100拷贝/μL。在人工感染样品中的应用结果显示,对鱼体组织中轮虫弧菌的检测下限为1.34×103 CFU/g,检测结果可以目视判读,检测时间缩短至42 min以内。研究表明,该检测方法具有特异性强、敏感度高、场地要求低等突出优势,适于开发水产病原实用性的现场快速检测技术。
【文章来源】:水产学报. 2020,44(12)北大核心CSCD
【文章页数】:10 页
【参考文献】:
期刊论文
[1]致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)自然感染三疣梭子蟹[J]. 郝景伟,高保全,王崇,孟宪亮,万晓媛,李小平,刘萍,张庆利. 水产学报. 2019(07)
[2]一株感染深水网箱养殖许氏平鲉的病原菌分离与鉴定[J]. 王凯,王印庚,姜勇,张正,于永翔,廖梅杰. 渔业科学进展. 2019(01)
[3]用于农残快速检测的离心式微流控芯片研制[J]. 叶嘉明,邵佳美,杨平,范真真,冯何凯,陈波,杜汉根. 食品科学. 2017(12)
[4]4株长牡蛎(Crassostrea gigas)致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)鉴定及其毒力基因检测[J]. 高晓建,姚东瑞,孙晶晶,白雪松,繆一恒,张荧荧,毕可然,秦蕾,张晓君. 海洋湖沼通报. 2015(03)
[5]用于农药残留现场快速检测的微流控芯片研制[J]. 苑宝龙,王晓东,杨平,范真真,黄昱俊,陈炯,叶嘉明. 食品科学. 2016(02)
[6]食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因双色荧光PCR检测方法的建立[J]. 曹冬梅,袁慕云,许龙岩,曹际娟. 食品安全质量检测学报. 2013(05)
[7]半滑舌鳎病原菌轮虫弧菌(Vibrio rotiferianus)的分离与鉴定[J]. 陈政强,姚志贤,林茂,常建波. 生物技术通报. 2012(06)
[8]基于toxR基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原副溶血弧菌方法的建立[J]. 张晓君,梁利国,阎斌伦,毕可然,秦国民. 中国兽医学报. 2012(04)
[9]基于lolB和toxR基因的水产品中霍乱弧菌双重PCR检测方法[J]. 秦国民,张晓君,毕可然,阎斌伦,秦蕾. 食品科学. 2011(22)
[10]基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR检测方法的建立[J]. 姚东瑞,朱明,陈丽,毕可然,史爱琴,张晓君. 水产科学. 2011(09)
本文编号:3270424
【文章来源】:水产学报. 2020,44(12)北大核心CSCD
【文章页数】:10 页
【参考文献】:
期刊论文
[1]致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)自然感染三疣梭子蟹[J]. 郝景伟,高保全,王崇,孟宪亮,万晓媛,李小平,刘萍,张庆利. 水产学报. 2019(07)
[2]一株感染深水网箱养殖许氏平鲉的病原菌分离与鉴定[J]. 王凯,王印庚,姜勇,张正,于永翔,廖梅杰. 渔业科学进展. 2019(01)
[3]用于农残快速检测的离心式微流控芯片研制[J]. 叶嘉明,邵佳美,杨平,范真真,冯何凯,陈波,杜汉根. 食品科学. 2017(12)
[4]4株长牡蛎(Crassostrea gigas)致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)鉴定及其毒力基因检测[J]. 高晓建,姚东瑞,孙晶晶,白雪松,繆一恒,张荧荧,毕可然,秦蕾,张晓君. 海洋湖沼通报. 2015(03)
[5]用于农药残留现场快速检测的微流控芯片研制[J]. 苑宝龙,王晓东,杨平,范真真,黄昱俊,陈炯,叶嘉明. 食品科学. 2016(02)
[6]食品中副溶血性弧菌toxR和tdh基因双色荧光PCR检测方法的建立[J]. 曹冬梅,袁慕云,许龙岩,曹际娟. 食品安全质量检测学报. 2013(05)
[7]半滑舌鳎病原菌轮虫弧菌(Vibrio rotiferianus)的分离与鉴定[J]. 陈政强,姚志贤,林茂,常建波. 生物技术通报. 2012(06)
[8]基于toxR基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原副溶血弧菌方法的建立[J]. 张晓君,梁利国,阎斌伦,毕可然,秦国民. 中国兽医学报. 2012(04)
[9]基于lolB和toxR基因的水产品中霍乱弧菌双重PCR检测方法[J]. 秦国民,张晓君,毕可然,阎斌伦,秦蕾. 食品科学. 2011(22)
[10]基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR检测方法的建立[J]. 姚东瑞,朱明,陈丽,毕可然,史爱琴,张晓君. 水产科学. 2011(09)
本文编号:3270424
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