鳜性腺发育和性类固醇激素对雌雄鱼生长差异的影响
发布时间：2021-07-13 03:19
生产和研究试验表明,鳜（Siniperca chuatsi）雌、雄鱼在不同阶段存在生长差异。因此,单性养殖可能具有潜在的应用前景。论文以鳜作为研究对象,通过组织学切片观察了0～60日龄性腺的发育过程;利用AFLP分子标记筛选雌、雄鱼性别差异片段,寻找性别特异性标记;比较了孵化后0.5～4.0月龄雌、雄鱼的生长特征,通过酶联免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定了血清中性类固醇激素——睾酮（Testosterone,T）和雌二醇（Estradiol,E2）含量,采用实时荧光定量分析了脑、肝脏和肌肉组织GH/IGF生长轴相关基因的表达差异,以期为鳜性腺发育、性别分子鉴定、两性生长差异机理提供基础资料,主要研究结果如下:（1）早期阶段性腺发育15日龄,观察到原始性腺组织,性腺并未分化。20日龄,原始生殖细胞开始增殖。25日龄,原始生殖细胞大量增殖。30日龄,性腺呈细线状,原始生殖细胞开始分化为精原细胞,精原细胞核较大,染色较深。35日龄,精巢形成包裹数个精原细胞的囊状结构。40日龄,精原细胞成簇分布,精小叶雏形形成。45日龄,精原细胞达...
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鳜DNA双酶切琼脂糖凝胶图谱
上海海洋大学硕士学位论文16OD260/OD2802.0132.0011.9971.8791.9761.9452.1022.0132.1102.0871.9762.103Concentration(ng/μL)894.13987.451121.981067.45976.98956.321382.14987.56997.321205.871423.471329.76图2-2鳜DNA琼脂糖凝胶图谱从左往右先DL2000DNAmaker，12尾雌12尾雄，下同Fig.2-2MapofDNAinagaroseofSinipercachuatsiDL2000DNAmaker12femalesand12malesfromlefttoright，thesameappliesbelowDNA经Tru9Ⅰ和EcoRⅠ双酶切后，在1.5%的琼脂糖凝胶上电泳检测（图2-3），产物条带分散，DNA完全被酶解，可以进行连接反应。连接完成后经E0+M0作为预扩增引物的扩增效果良好（图2-4），片段在100～800bp之间。图2-3鳜DNA双酶切琼脂糖凝胶图谱Fig.2-3MapofDNAdoubleenzymesrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi图2-4鳜DNA预扩增琼脂糖凝胶图谱Fig.2-4MapofDNApreamplificationrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi
上海海洋大学硕士学位论文17用64对AFLP引物组合对雌、雄DNA混合池进行扫描，共扩增出1252条多态性条带，其中，有差异条带的引物组合21对，雌性特异条带有18条，雄性特异条带有13条，部分引物组合见图2-5。图2-5不同AFLP引物组合对鳜雌雄DNA混合池扩增Fig.2-5AFLPamplificationofthemixedDNAbulksofthefemaleandmaleofSinipercachuatsiusingdifferentprimercombinations引物组合从左到右分别是E1M1、E1M2、E1M3、E1M7、E1M8、E2M1、E2M2、E2M3、E7M8、E8M1、E8M7，两个泳带为一组，箭头指出的为差异条带。PrimercombinationswereE1M1,E1M2,E1M3,E1M7,E1M8,E2M1,E2M2,E2M3,E7M8,E8M1,E8M7fromlefttoright,respectively.Twobandswereagroupandarrowsindicateddifferentbands.对上述雌雄差异的引物组合，进行扩大样品筛眩在4个选择扩增组合E1M8、E5M8、E6M7、E7M3中，发现5个雌雄差异性位点（图2-6）。其中，E5M8-480在雄性中扩增比例为91.67%，E1M8-440和E5M8-370在雌性中比例分别为91.67%和83.33%，E6M7-280和E7M3-380为雌性所特有，但扩增比例为58.33%，引物组合及在雌雄个体比例见表2-7。图2-6引物E7M3对鳜雌雄的AFLP扩增Fig.2-6AFLPamplificationoftheprimerE7M3betweenthefemalesandmalesofSiniperca
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于微卫星标记的鳜种质遗传多样性与群体遗传结构分析[J]. 曾可为,宋文,王青云,夏儒龙,王守荣,邓国乔,成为为,曹小娟. 华中农业大学学报. 2019(06)
[2]暗纹东方鲀抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体基因的克隆、生物信息学及表达分析[J]. 高莹莹,胡鹏,刘新富,黄滨,刘滨. 海洋渔业. 2019(05)
[3]池塘养殖草鱼两性体质量生长差异研究[J]. 樊佳佳,白俊杰,韩林强,李胜杰,姜鹏,杨强. 水产科学. 2019(02)
[4]鱼类性腺发育研究进展[J]. 刘晨斌,徐革锋,黄天晴,谷伟,张玉勇,相福生,王炳谦. 水产学杂志. 2019(01)
[5]翘嘴鳜（Siniperca chuatsi）EST-SSR标记与生长性状相关性及4个选育群体遗传结构研究[J]. 袁文成,叶金明,黄鹤忠,肖攀,路瑶,李泽,朱传坤. 海洋与湖沼. 2018(01)
[6]鱼类性腺发育及产卵类型研究进展[J]. 徐钢春,鲍明明,杜富宽,徐跑. 长江大学学报(自科版). 2017(06)
[7]GH/IGF-Ⅰ轴对半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）卵巢发育的调控作用[J]. 徐永江,柳学周,石莹,王滨,史宝,张凯,蓝功岗. 渔业科学进展. 2017(01)
[8]性成熟前期尼罗罗非鱼雌雄性别生长差异与性类固醇激素水平比较[J]. 岳蒙蒙,赵金良,唐首杰,王燕,赵永华. 浙江农业学报. 2016(10)
[9]Sex differences in the expression of GH/IGF axis genes underlie sexual size dimorphism in the yellow catfish（Pelteobagrus fulvidraco）[J]. Wenge Ma,Junjie Wu,Jin Zhang,Yan He,Jianfang Gui,Jie Mei. Science China（Life Sciences）. 2016(04)
[10]性类固醇激素E2、MT对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）雌、雄生长差异的影响[J]. 马细兰,张勇,陈勇智,周立斌. 海洋与湖沼. 2015(06)
博士论文
[1]GH/IGF轴相关基因在不同倍性鲫鲤中的表达及与生长的相关性研究[D]. 钟欢.湖南师范大学 2012
硕士论文
[1]金钱鱼雌雄性腺转录组分析及性类固醇激素水平的研究[D]. 何飞祥.广东海洋大学 2019
[2]性类固醇激素对黄颡鱼雌雄生长二态性的影响[D]. 王凌宇.华中农业大学 2019
[3]金钱鱼胰岛素样生长因子（IGF）的克隆及雌二醇对其表达的影响[D]. 张克伟.广东海洋大学 2018
[4]尼奥罗非鱼性腺发育、精子生物学及cyp19a1a基因表达与甲基化水平的研究[D]. 赵永华.上海海洋大学 2017
[5]大黄鱼原始生殖细胞发生、迁移及性腺性别分化的组织学研究[D]. 游秀容.集美大学 2012
[6]孔雀鱼遗传连锁图谱的构建及性别特异标记的筛选[D]. 刘昕.中国海洋大学 2011
[7]全雌鲤鱼育种技术及性别相关分子标记研究[D]. 司伟.南京农业大学 2006
[8]广东与湖南养殖鳜群体遗传多样性研究[D]. 李国庆.华南师范大学 2005
本文编号：3281229
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鳜DNA双酶切琼脂糖凝胶图谱
上海海洋大学硕士学位论文16OD260/OD2802.0132.0011.9971.8791.9761.9452.1022.0132.1102.0871.9762.103Concentration(ng/μL)894.13987.451121.981067.45976.98956.321382.14987.56997.321205.871423.471329.76图2-2鳜DNA琼脂糖凝胶图谱从左往右先DL2000DNAmaker，12尾雌12尾雄，下同Fig.2-2MapofDNAinagaroseofSinipercachuatsiDL2000DNAmaker12femalesand12malesfromlefttoright，thesameappliesbelowDNA经Tru9Ⅰ和EcoRⅠ双酶切后，在1.5%的琼脂糖凝胶上电泳检测（图2-3），产物条带分散，DNA完全被酶解，可以进行连接反应。连接完成后经E0+M0作为预扩增引物的扩增效果良好（图2-4），片段在100～800bp之间。图2-3鳜DNA双酶切琼脂糖凝胶图谱Fig.2-3MapofDNAdoubleenzymesrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi图2-4鳜DNA预扩增琼脂糖凝胶图谱Fig.2-4MapofDNApreamplificationrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi
上海海洋大学硕士学位论文17用64对AFLP引物组合对雌、雄DNA混合池进行扫描，共扩增出1252条多态性条带，其中，有差异条带的引物组合21对，雌性特异条带有18条，雄性特异条带有13条，部分引物组合见图2-5。图2-5不同AFLP引物组合对鳜雌雄DNA混合池扩增Fig.2-5AFLPamplificationofthemixedDNAbulksofthefemaleandmaleofSinipercachuatsiusingdifferentprimercombinations引物组合从左到右分别是E1M1、E1M2、E1M3、E1M7、E1M8、E2M1、E2M2、E2M3、E7M8、E8M1、E8M7，两个泳带为一组，箭头指出的为差异条带。PrimercombinationswereE1M1,E1M2,E1M3,E1M7,E1M8,E2M1,E2M2,E2M3,E7M8,E8M1,E8M7fromlefttoright,respectively.Twobandswereagroupandarrowsindicateddifferentbands.对上述雌雄差异的引物组合，进行扩大样品筛眩在4个选择扩增组合E1M8、E5M8、E6M7、E7M3中，发现5个雌雄差异性位点（图2-6）。其中，E5M8-480在雄性中扩增比例为91.67%，E1M8-440和E5M8-370在雌性中比例分别为91.67%和83.33%，E6M7-280和E7M3-380为雌性所特有，但扩增比例为58.33%，引物组合及在雌雄个体比例见表2-7。图2-6引物E7M3对鳜雌雄的AFLP扩增Fig.2-6AFLPamplificationoftheprimerE7M3betweenthefemalesandmalesofSiniperca
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于微卫星标记的鳜种质遗传多样性与群体遗传结构分析[J]. 曾可为,宋文,王青云,夏儒龙,王守荣,邓国乔,成为为,曹小娟. 华中农业大学学报. 2019(06)
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[4]鱼类性腺发育研究进展[J]. 刘晨斌,徐革锋,黄天晴,谷伟,张玉勇,相福生,王炳谦. 水产学杂志. 2019(01)
[5]翘嘴鳜（Siniperca chuatsi）EST-SSR标记与生长性状相关性及4个选育群体遗传结构研究[J]. 袁文成,叶金明,黄鹤忠,肖攀,路瑶,李泽,朱传坤. 海洋与湖沼. 2018(01)
[6]鱼类性腺发育及产卵类型研究进展[J]. 徐钢春,鲍明明,杜富宽,徐跑. 长江大学学报(自科版). 2017(06)
[7]GH/IGF-Ⅰ轴对半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）卵巢发育的调控作用[J]. 徐永江,柳学周,石莹,王滨,史宝,张凯,蓝功岗. 渔业科学进展. 2017(01)
[8]性成熟前期尼罗罗非鱼雌雄性别生长差异与性类固醇激素水平比较[J]. 岳蒙蒙,赵金良,唐首杰,王燕,赵永华. 浙江农业学报. 2016(10)
[9]Sex differences in the expression of GH/IGF axis genes underlie sexual size dimorphism in the yellow catfish（Pelteobagrus fulvidraco）[J]. Wenge Ma,Junjie Wu,Jin Zhang,Yan He,Jianfang Gui,Jie Mei. Science China（Life Sciences）. 2016(04)
[10]性类固醇激素E2、MT对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）雌、雄生长差异的影响[J]. 马细兰,张勇,陈勇智,周立斌. 海洋与湖沼. 2015(06)
博士论文
[1]GH/IGF轴相关基因在不同倍性鲫鲤中的表达及与生长的相关性研究[D]. 钟欢.湖南师范大学 2012
硕士论文
[1]金钱鱼雌雄性腺转录组分析及性类固醇激素水平的研究[D]. 何飞祥.广东海洋大学 2019
[2]性类固醇激素对黄颡鱼雌雄生长二态性的影响[D]. 王凌宇.华中农业大学 2019
[3]金钱鱼胰岛素样生长因子（IGF）的克隆及雌二醇对其表达的影响[D]. 张克伟.广东海洋大学 2018
[4]尼奥罗非鱼性腺发育、精子生物学及cyp19a1a基因表达与甲基化水平的研究[D]. 赵永华.上海海洋大学 2017
[5]大黄鱼原始生殖细胞发生、迁移及性腺性别分化的组织学研究[D]. 游秀容.集美大学 2012
[6]孔雀鱼遗传连锁图谱的构建及性别特异标记的筛选[D]. 刘昕.中国海洋大学 2011
[7]全雌鲤鱼育种技术及性别相关分子标记研究[D]. 司伟.南京农业大学 2006
[8]广东与湖南养殖鳜群体遗传多样性研究[D]. 李国庆.华南师范大学 2005
本文编号：3281229
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