齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）两种促性腺激素受体部分序列克隆及表达分析

发布时间：2021-09-04 16:22

　　促性腺激素（gonadotropins）是调节脊椎动物性腺发育,促进性激素生成和分泌的糖蛋白激素。促性腺激素的生理功能通过分布于性腺的特异性受体,即促卵泡素受体（FSHR）和促黄体素受体（LHR）实现。有关齐口裂腹鱼促性腺受体的研究还没有报道。因此,研究FSHR和LHR的结构和功能将有助于了解齐口裂腹鱼生殖生理状况,为人工繁育奠定基础。本研究通过克隆齐口裂腹鱼两种促性腺激素受体FSHR和LHR的部分序列,进行生物信息学分析、组织表达及繁殖和非繁殖季节的发育表达分析。结果如下：（1）获得齐口裂腹鱼FSHR、LHR cDNA部分序列,片段长度分别为791bp和360bp,分别编码263和120个氨基酸残基。BLAST分析表明齐口裂腹鱼FSHR核苷酸/氨基酸序列与斑马鱼的同源性最高（84.5%/85.1%）,LHR与草鱼同源性最高（87.1%/68.6%）。（2）利用MAGA4.0中NJ法构建系统发生树,齐口裂腹鱼FSHR与斑马鱼、黄颡鱼聚类在一起,且与斑马鱼的遗传距离最近。齐口裂腹鱼LHR与草鱼、斑马鱼聚类在一起,且与草鱼的遗传距离最近。（3）组织表达谱分析表明,FSHR与LHR在性腺中高... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
1 文献综述
    1.1 激素对繁殖周期的调控
        1.1.1 脑垂体组织
        1.1.2 垂体外周促性腺激素
    1.2 促性腺激素结构与功能
    1.3 鱼类促性腺激素受体
        1.3.1 G蛋白偶联受体超家族(GPCRs)
        1.3.2 促性腺激素受体的一般结构
        1.3.3 鱼类促性腺激素受体的进化分析
        1.3.4 促性腺激素受体的选择性
        1.3.5 促性腺激素受体表达研究
    1.4 齐口裂腹鱼的生物学特性和研究现状
    1.5 本研究的内容和意义
2 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 样本的采集
        2.1.2 主要仪器设备
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 主要试剂的配制
    2.2 实验设计
    2.3 实验方法
        2.3.1 引物的设计
        2.3.2 总RNA的提取
        2.3.3 总RNA的纯化
        2.3.4 总RNA的检测
        2.3.5 PCR产物的分离、回收、纯化及测序
        2.3.6 组织表达谱分析
        2.3.7 发育表达分析
        2.3.8 序列分析与系统发生树构建
3 结果
    3.1 促性腺激素受体克隆、生物学描述和功能表达
        3.1.1 总RNA提取结果
        3.1.2 促性腺激素受体部分序列克隆
        3.1.3 生物信息学分析
        3.1.4 系统发生树的构建
        3.1.5 促性腺激素受体组织表达谱
        3.1.6 促性腺激素受体发育表达
    3.2 促性腺激素组织表达谱及发育表达
        3.2.1 促性腺激素FSHβ
        3.2.2 促性腺激素LHβ
4 讨论
    4.1 齐口裂腹鱼促性腺素受体序列生物学特性
    4.2 齐口裂腹鱼促性腺素受体系统发生分析
    4.3 GtHRs组织表达分析
    4.4 FSHβ及LHβ组织表达分析
5 结论
参考文献
致谢
硕士研究生学习期间发表文章



本文编号：3383599