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广西罗非鱼无乳链球菌病病原分离、鉴定及毒力基因检测分析

发布时间:2021-09-23 18:38
  无乳链球菌已成为近年来罗非鱼细菌性疾病中重要的致病菌,给罗非鱼产业造成了极大的经济损失。目前引起罗非鱼链球菌病的致病菌主要有海豚链球菌和无乳链球菌。本研究对广西8个市12个县/区采集的672个罗非鱼病样进行细菌分离,并通过API20Strep试剂条及16SrRNA分子鉴定,从其中30个病样中共分离到无乳链球菌30株,其中南宁市7株、钦州市3株、北海市7株、柳州市5株、梧州市1株、玉林市7株。无乳链球菌的总检出率为4.46%。在检出的30株无乳链球菌中,有9株溶血试验呈阴性,其余21株的溶血试验呈阳性。利用BLAST分析了30株试验菌株的16SrRNA基因序列和与GenBank中已登录链球菌相应序列的同源性,结果显示,30株试验菌株与无乳链球菌(S.agalactiae)海南分离株JF423947、广东分离株JQ039375、KF111315及广西分离株JQ990156的相应序列高度同源(98.5%~100%),与海豚链球菌(S.iniae)中的EU622514株、FJ870987株,停乳链球菌(S.dysgalactiae)中的AB159678株、X59030株,化脓性链球菌(S.py... 

【文章来源】:广西大学广西壮族自治区 211工程院校

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

广西罗非鱼无乳链球菌病病原分离、鉴定及毒力基因检测分析


0株分离菌株的16SrRNA基网的PCR扩增结果

电泳图,毒力基因,PCR扩增,PCR检测


PCR检测到阳性率均为100%,毒力基因型为cfb+cpsE^sip+。3个毒力基因的电泳图见图3-1至图3-3。Cjf cr?- ci cs* c* c* (二 (?> o? c*X X X X K X X X X X X X X X X X X.. ,X .X X X X X X. X X X X X XNf IS: .N: ?< o o O IS ? £5 1? ? r:5 ? V V Y ? V Y Y V I_ 1.. I- L WIZ Zg: ^ n M H ?? i 1 f"i ri I? 1_ t .。 L I_ Z: ST ^ 之3 4 7 1 :2 3 1. 3. .? -T %. 2 3 3 7 ? 3 :头1图3-1分离菌株cfb基因的PCR扩增结果Fig. 3-1 PCR amplification Results of cfb gene of the strains33

酶切鉴定


图 3-7 pMD18T-cbf> pMD18T-cpsE 和 pMD18T-sip 酶切鉴定结果Fig. 3-7 Restriction endonuclease analysis of recombinant plasmid pMD18T-cbf、recombinantplasmid pMD18T-cpsE and recombinant plasmid pMD18T-sipMl: Supercoiled DNA ladder marker; 1 : recombinant plasmid pMD18T-cbf; 2: pMD18T-cbf digestedproducts ; M2: Marker JH; 3: recombinant plasmid pMD18T-cpsE; 4: pMD18T-cpsE digested products;5 : recombinant plasmid pMD 18T-sip ; 6 : pMD 18T-sip digested products

【参考文献】:
期刊论文
[1]黄颡鱼源嗜水气单胞菌对盐酸沙拉沙星耐药性获得与消失速率的测定[J]. 黄新财,彭民毅,黄钧,胡大胜,彭亚,黄艳华,施金谷,温华成,韦贵花.  南方农业学报. 2013(10)
[2]无乳链球菌致病因子的研究进展[J]. 夏杰,易弋,罗福广,杨军,王佳,伍时华,黄稀.  中国畜牧兽医. 2013(10)
[3]黄沙鳖白底板病病原菌的分离鉴定及6种毒力基因检测[J]. 黄钧,黄艳华,胡大胜,罗华平,施金谷,彭民毅,禤均成,覃丽芬,滕忠作,曾桂忠.  水生生物学报. 2013(05)
[4]黄颡鱼源温和气单胞菌对氟苯尼考耐药性获得与消失速率研究[J]. 黄钧,彭民毅,罗华平,胡大胜,黄艳华,温华成,施金谷,彭亚.  西南农业学报. 2013(03)
[5]罗非鱼无乳链球菌生物学特性与致病力研究[J]. 田珂,贾爱卿,陈善真,李守军,王贵平,石和荣.  中国畜牧兽医. 2013(06)
[6]广西罗非鱼链球菌病流行菌株PCR鉴定和PFGE基因型分析[J]. 李莉萍,王瑞,黄婷,黄维义,梁万文,李健,黄彦,雷爱莹,甘西,陈明.  水产学报. 2013(06)
[7]我国罗非鱼产业发展趋势分析[J]. 袁永明,袁媛,贺艳辉,代云云,龚赟翀,张红燕,王红卫.  中国渔业经济. 2013(03)
[8]广西罗非鱼产业链发展的现状、问题和对策[J]. 明俊超,袁新华,袁永明.  中国水产. 2012(11)
[9]12种药物对罗非鱼无乳链球菌的抑菌试验[J]. 胡大胜,黄钧,黄艳华,温华成,施金谷,刘坚红,彭民毅.  中国水产. 2012(08)
[10]罗非鱼源无乳链球菌培养基及培养条件的优化[J]. 陈贺,吴灶和,王蓓,黄郁葱,鲁义善,简纪常.  广东海洋大学学报. 2012(03)

博士论文
[1]罗非鱼无乳链球菌病病原学、病理学及cpsE基因的原核表达研究[D]. 黄锦炉.四川农业大学 2012

硕士论文
[1]以湛江、茂名海南为例探究我国凡纳滨对虾、罗非鱼养殖现状及面临的问题[D]. 张宗锋.上海海洋大学 2012
[2]广州地区罗非鱼无乳链球菌分离鉴定及致病生物学研究[D]. 陈荣荣.南京农业大学 2012
[3]罗非鱼海豚链球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究[D]. 徐增辉.广西大学 2008
[4]122株猪2型链球菌耐药性检测及耐药基因的鉴定[D]. 金卉.华中农业大学 2008



本文编号:3406212

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