斜带石斑鱼神经肽MCH和NPB的克隆鉴定及摄食调控功能研究

发布时间：2021-09-23 21:44

　　在啮齿动物中,黑色素聚集激素（Melanin-concentrating hormone, MCH）和神经肽3（Neuropeptide B, NPB）与许多复杂的生理活动有关,如调节摄食行为与体重、睡眠与觉醒以及体内能量平衡等。本研究的目的在于探索斜带石斑鱼（orangen-spotted grouper, Epinephelus coioides）中神经肽MCH和NPB与摄食相关的调控功能。本文对斜带石斑鱼转录组数据比对分析后,利用分子生物学实验技术并结合比较基因组学技术,首次在斜带石斑鱼中克隆鉴定了MCH与NPB各自的两种亚型基因,分别是MCH1、MCH2、NPB1和NPB2。通过利用实时荧光定量PCR技术（real time-PCR）和原位杂交技术,分别研究了MCHs与NPBs在不同的器官组织中的表达模式和MCHs在不同的胚胎发育阶段中的表达模式及脑区定位。此外,我们在斜带石斑鱼的饥饿与复投喂实验中对MCHs和NPBs的mRNA表达水平进行了检测；并结合离体实验,即使用人工化学合成的两种成熟肽MCH1和MCH2刺激离体的下丘脑并进行孵育试验,检测调控摄食的相关因子的mRNA表达... 

【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
第一章 前言
    1.1 MCH的发现及其研究进展
    1.2 NPB的发现及其研究进展
    1.3 本研究的目的意义
    1.4 本研究的创新点
第二章 斜带石斑鱼MCH基因的鉴定及其摄食调控功能研究
    1 斜带石斑鱼的MCH1和MCH2基因鉴定
        1.1 引言
        1.2 材料与方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
    2 斜带石斑鱼MCH1和MCH2基因的组织表达模式分析
        2.1 引言
        2.2 材料和方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
    3 斜带石斑鱼MCH1和MCH2的脑区定位
        3.1 引言
        3.2 材料与方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
    4 斜带石斑鱼MCH1和MCH2在不同的胚胎发育过程的表达模式
        4.1 引言
        4.2 材料和方法
        4.3 结果
        4.4 讨论
    5 饥饿与复投喂对斜带石斑鱼MCH1和MCH2基因表达模式分析
        5.1 引言
        5.2 材料与方法
        5.3 结果
        5.4 讨论
    6 斜带石斑鱼MCH1和MCH2对下丘脑相关基因表达的影响分析
        6.1 引言
        6.2 材料与方法
        6.3 结果
        6.4 讨论
    结论
第三章 斜带石斑鱼两种神经肽NPB的发现及表达分析
    1 斜带石斑鱼NPB1和NPB2基因序列的鉴定与分析
        1.1 引言
        1.2 材料与方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
    2 NPB在斜带石斑鱼中的组织分布表达模式
        2.1 引言
        2.2 材料和方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
    3 饥饿试验中NPB在下丘脑的表达模式
        3.1 引言
        3.2 材料与方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
    结论
参考文献
附录Ⅰ 引物序列
附录Ⅱ 标准曲线
作者在读期间发表论文情况
致谢



本文编号：3406470