一种新型对虾素亚家族在日本对虾先天免疫中的功能研究

发布时间：2021-09-24 09:01

　　细菌及病毒等病原体的入侵为动物维持正常生理功能带来重大威胁。无脊椎动物不像脊椎动物那样进化出了一套复杂而完备的自我防御系统,而是主要通过先天免疫来抵御病原体侵害。抗菌肽（antimicrobial peptide, AMP）是先天免疫过程中杀灭及清除病原体的重要作用因子。对虾素（Penaeidin）作为特异性存在于对虾体内一类抗菌肽,不仅能够直接杀灭细菌或抑制其生长繁殖,还可以作为一种调理因子在先天免疫中间接发挥作用。对虾素是对虾体内抗菌肽家族的重要成员。迄今为止,已有五种类型的对虾素被鉴定,它们均由一个N端的脯氨酸富集区和一个C端的半胱氨酸富集区组成,其半胱氨酸富集区含有的六个半胱氨酸形成三个二硫键。在本研究中,在日本囊对虾体内发现了一种新型对虾素,其全长序列除了含有一个脯氨酸富集区和一个半胱氨酸富集区（称为对虾素结构域）外,其N-端还具有一个独特的丝氨酸富集区。由此,我们将全部对虾素分为两个亚家族,所有已报道的对虾素被命名为Ⅰ型亚家族（Pen-Ⅰ）,只具有1个对虾素结构域,包括5种对虾素类型；而我们发现的这种新型对虾素则被命名为对虾素亚家族Ⅱ（Pen-Ⅱ）,含有丝氨酸富集区结构域和... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
第一章 无脊椎动物先天免疫综述
    一、无脊椎动物先天免疫概述
        1. 细胞免疫
            1.1 吞噬作用
            1.2 包囊作用
            1.3 结节化作用
        2. 体液免疫
            2.1 抗菌肽
            2.2 凝集素
            2.3 溶血素
            2.4 超氧化物歧化酶
            2.5 溶菌酶
            2.6 血蓝蛋白
            2.7 酚氧化酶以及酚氧化酶原激活系统
        3. 模式识别受体
    二、对虾素研究进展
        1. 对虾素的结构
        2. 对虾素的多样性
        3. 对虾素的功能
            3.1 抗真菌活性
            3.2 抗细菌活性
            3.3 细胞因子
第二章 一种新型对虾素亚家族在日本对虾先天免疫中的功能研究
    一、前言
    二、材料与方法
        1. 材料、试剂与仪器
            1.1 生物材料及载体
            1.2 试剂及仪器
        2. 方法
            2.1 日本囊对虾的免疫刺激、组织RNA及蛋白提取
            2.2 cDNA合成
            2.3 反转录PCR(RT-PCR)及实时定量PCR(qRT-PCR)
            2.4 MjPen-Ⅱ的重组表达、蛋白纯化及抗体制备
            2.5 核酸及氨基酸序列的生物信息学分析
            2.6 SDS-PAGE
            2.7 Western Blot
            2.8 液体抑菌实验
            2.9 细菌结合实验
            2.10 多糖结合实验
            2.11 细菌凝集实验
            2.12 RNA干扰实验
            2.13 体内细菌清除实验
            2.14 吞噬实验
    三、结果
        1. MjPen-Ⅱ全长cDNA克隆及序列比对
        2. MjPen-Ⅱ的组织分布以及病原刺激后的表达模式
        3. MjPen-Ⅱ的重组表达及抗体制备
        4. MjPen-Ⅱ的抑菌活性检测
        5. MjPen-Ⅱ的细菌凝集活性检测
        6. MjPen-Ⅱ的细菌结合活性及多糖结合活性
        7. MjPen-Ⅱ的细菌清除实验
        8. MjPen-Ⅱ对吞噬作用的影响
        9. MjPen-Ⅱ对吞噬相关基因表达水平的影响
    四、讨论
创新点总结
参考文献
致谢
在读期间发表文章
学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]Hemolymph proteins in marine crustaceans[J]. W Sylvester Fredrick,S Ravichandran.  Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2012(06)



本文编号：3407477