鱼源无乳链球菌感染小鼠巨噬细胞差异转录基因的筛选及功能研究

发布时间：2021-09-29 20:50

　　无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）,亦称B群链球菌（Group B Streptococcus, GBS）,具有广泛的宿主感染范围,可引起新生儿败血症、肺炎和脑膜炎,奶牛乳腺炎及鱼类脑膜炎。近年来,无乳链球菌对鱼类危害严重,已引起广泛重视,但其致病机制尚不明确。本研究在比较鱼源、牛源、人源无乳链球菌毒力的基础上,利用选择性捕获转录序列（SCOTS）技术筛选了鱼源无乳链球菌感染小鼠巨噬细胞差异转录的基因,并对其中转录上调的aroA、clpE、msrB及pulA等基因的功能进行了鉴定,对aroA缺失株作为弱毒疫苗免疫小鼠的保护效果进行了探讨,研究结果为阐明无乳链球菌的致病机制提供了理论基础,同时也具有潜在的应用前景。1.无乳链球菌与巨噬细胞和脑微血管内皮细胞的相互作用以小鼠巨噬细胞RAW264.7和脑微血管内皮细胞bEnd.3为体外研究模型,探讨鱼源无乳链球菌GD201008-001与细胞的互作。结果显示,无乳链球菌可以被巨噬细胞吞噬,吞噬数量与细菌浓度呈正相关。通过比较鱼源、牛源、人源三株无乳链球菌的抗吞噬能力、巨噬细胞内存活能力及对RAW264.7和bEnd... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：188 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２－１?ＳＣＯＴＳ技术筛选转录序列并进行ｓｏｕｔｈｅｒｎ验证??（Ａ）从体外培养基或感染的宿主组织中（体内）获得标准化的ｃＤＮＡ；巧）相对于体外培养基在宿主??体内特异表达的基网

在相同的感染比条件下，ＧＤ２０１００８－００１对ＲＡＷ２６４．７的毒性作用显著高于Ａ９０９、??ＡＴＣＣ１３８１３，且牛源株ＡＴＣＣ１３８１在ＭＯＩ＝１００时，对ＲＡＷ２６４．７的毒性作用仍然非??常低（图３－６）。??５１??

?１００??ＭＯＩ??图３－６无乳链巧菌对ＲＡＷ２６４．７的毒性??Ｆｉｇ?３－６?ＣｙＵ）Ｕ）ｘｉｃ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?义雌口／口別Ｚ？口６?ｏｎ?ＲＡＷ２６４．７?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．?Ａ打?ａｓｔｅｒｉｓｋ?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?Ｕｉａｔ?化ｅ??ｂａｃ化ｒｉａｌ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?ｉｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?ｄｉｆｆｅ化ｎｔ?（ｐ?＜?０．０５）?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?ｖａｌｕｅ?ｏｆ?ＧＤ２０１００８－００１．??２．６．２?Ｈ株无乳链球菌对祀ｎｄ．３的毒性??如图３－７，?Ｈ株无乳链球菌对化ｎｄ．３的毒性作用趋势与对ＲＡＷ２６４．７的毒性作用??基本相同，ＭＯＩ越大则细胞毒性越大，且ＧＤ２０１００８－００１对ｂＥｎｄ．３的毒性作用显著??高于其它菌株（Ｐ＜〇．〇５），ＡＴＣＣ１３８１３的细胞毒性作用均处于较低水平。但是，在??相同的ＭＯＩ条件下，各菌株对祀ｎｄ．３的毒性耍高于对ＲＡＷ２６４．７的毒性。??１００－１??原Ｊ?回?ＣＤ２０１００８－００１??一抓－?巧Ａ９０９??运?巧?ＡＴＣＣ１３８１３??含６０－??与．?Ｉ?＊??Ｉ?４０－?ｉ?民??芝?■?鷄＊?凝：：：：??Ｕ?２０－?ｌｉ?Ｉ?弦??ｉ?Ｅ：ａ?＊?１巧??１?１０?１００??ＭＯＩ??图３－７无乳链球菌对化ｎｄ．３的毒性??Ｆｉｇ?３－

【参考文献】：
期刊论文
[1]选择性捕获禽病原性大肠杆菌体内转录序列[J]. 陈祥,高崧,王晓泉,焦新安,刘秀梵.  微生物学报. 2007(03)
[2]暖水鱼类链球菌病研究概况[J]. 张生,曾中良,王凡,谭子龙,李安兴.  水产科技. 2007(02)
[3]抑制差减杂交筛选禽致病性大肠杆菌基因组差异片段及其分析[J]. 陈祥,赵娟,高崧,焦新安,刘秀梵.  微生物学报. 2005(05)



本文编号：3414453