几种病原菌感染短蛸的病理学研究及TLR13基因的克隆与表达
发布时间：2021-10-25 04:35
短蛸（Octopus ocellatus）是我国北方沿海地区经济物种。近年来由于环境的不断恶化和短蛸的过度捕捞,导致短蛸的供应不足,开展短蛸的人工养殖迫在眉睫。短蛸养殖过程中由病原菌感染导致的细菌性疾病,给短蛸养殖业带来了不小的难题与挑战。本研究主要进行了短蛸感染鳗弧菌和副溶血弧菌后组织的病理学观察;通过16S扩增子技术检测了病原菌感染后短蛸肝脏的菌群结构分布及多样性变化;最后分析了TLR13基因在短蛸不同组织及鳗弧菌感染后不同时间点的表达规律,以期为短蛸的疾病防控和免疫识别分子应答机制研究提供理论基础。具体研究内容如下:（1）从组织病理学角度出发,对人工感染鳗弧菌和副溶血弧菌的短蛸进行了病理学观察和研究,组织切片结果发现短蛸的肝脏、鳃心、鳃以及白体皆有明显的病理学改变,肝细胞呈现许多空泡化,细胞膜分裂,肝锁支架的结构也变得不完整;鳃细胞除了明显的形态变化外,鳃小叶和上皮细胞微绒毛都有所破坏,这些都会影响鳃的呼吸、排泄等功能;白体内含有大量的造血干细胞、祖细胞及血细胞前体细胞和血细胞,白体也是身体很好的血液供应组织,经鳗弧菌和副溶血弧菌感染后的白体细胞除了出现明显的细胞空泡化外,还有一...
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
短蛸肝脏和鳃组织的石蜡切片和HE染色
上海海洋大学硕士学位论文14图2-2短蛸鳃心和白体组织的石蜡切片和HE染色。C、D分别代表鳃心和白体组织，0—2分别代表对照组、鳗弧菌感染组、副溶血弧菌感染组。Scalebar=50μmFig.2-2paraffinsectionsandHEstainingofO.octopus’sgillheartandwhitebodytissues.CandDrepresentgillheartandwhitebodyrepectively,0-2repectivelyrepresentthecontrolgroup,V.anguillaeinfectiongroupandV.parehaemolyticusinfectiongroup.bar=20um2.3.3感染后短蛸组织的超显微结构观察与正常组织相比，鳗弧菌和副溶血弧菌感染短蛸后，超显微观察结果显示，各组织细胞中均未见到细菌颗粒，但细胞病理变化明显。其中，肝脏组织出现部分细胞膜溶解，细胞界限模糊，脂肪颗粒及细胞质外溢，不少细胞出现空泡化，甚至细胞核和部分细胞器破裂溶解（图2-3E）；对照组中，鳃组织上皮细胞排列规则，外表面微绒毛突起清晰，细胞质中分泌小泡多而明显，细胞分泌旺盛，但感染组鳃小叶表面变粗糙，其中的上皮细胞微绒毛减少、脱落且不规则，分泌小泡减少，部分上皮细胞空泡化，各种细胞器已模糊不可辨（图2-3F）；鳃心组织基本结构还算完整，致密体结构均清晰，但有部分细胞仍存在细胞溶解和空泡化、核膜破裂、细胞器消失的现象（图2-4G）；对照组中，白体中造血细胞排列紧密，核质比较大，细胞核染色较深，但感染组中部分细胞出现溶解和空泡化，细胞界限不甚清楚，有的细胞核膜破裂、细胞器解体（图2-4H）。
上海海洋大学硕士学位论文15图2-3短蛸肝脏和鳃组织感染后的透射电镜分析。E、F分别代表肝脏和鳃组织，0—2分别代表对照组、鳗弧菌感染组、副溶血弧菌感染组，N代表细胞核（nucleus），CP代表细胞质（cytoplasm），黑箭头指向鳃部分泌细胞，白箭头指向鳃上皮微绒毛结构。Fig.3transmissionelectronmicroscopeanalysisofO.octopu’sliverandgilltissuesofinfection.EandFrepresentliverandgilltissusrespectively,0-2repectivelyrepresentthecontrolgroup,V.anguillaeinfectiongroupandV.parehaemolyticusinfectiongroup,Nstandsfornucleus,CPstandsforcytoplasm,theblackarrowpointstothesecretorycellsinthegills,thewhitearrowpointstotheepithelialmicrovilliinthegills.
本文编号：3456661
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
短蛸肝脏和鳃组织的石蜡切片和HE染色
上海海洋大学硕士学位论文14图2-2短蛸鳃心和白体组织的石蜡切片和HE染色。C、D分别代表鳃心和白体组织，0—2分别代表对照组、鳗弧菌感染组、副溶血弧菌感染组。Scalebar=50μmFig.2-2paraffinsectionsandHEstainingofO.octopus’sgillheartandwhitebodytissues.CandDrepresentgillheartandwhitebodyrepectively,0-2repectivelyrepresentthecontrolgroup,V.anguillaeinfectiongroupandV.parehaemolyticusinfectiongroup.bar=20um2.3.3感染后短蛸组织的超显微结构观察与正常组织相比，鳗弧菌和副溶血弧菌感染短蛸后，超显微观察结果显示，各组织细胞中均未见到细菌颗粒，但细胞病理变化明显。其中，肝脏组织出现部分细胞膜溶解，细胞界限模糊，脂肪颗粒及细胞质外溢，不少细胞出现空泡化，甚至细胞核和部分细胞器破裂溶解（图2-3E）；对照组中，鳃组织上皮细胞排列规则，外表面微绒毛突起清晰，细胞质中分泌小泡多而明显，细胞分泌旺盛，但感染组鳃小叶表面变粗糙，其中的上皮细胞微绒毛减少、脱落且不规则，分泌小泡减少，部分上皮细胞空泡化，各种细胞器已模糊不可辨（图2-3F）；鳃心组织基本结构还算完整，致密体结构均清晰，但有部分细胞仍存在细胞溶解和空泡化、核膜破裂、细胞器消失的现象（图2-4G）；对照组中，白体中造血细胞排列紧密，核质比较大，细胞核染色较深，但感染组中部分细胞出现溶解和空泡化，细胞界限不甚清楚，有的细胞核膜破裂、细胞器解体（图2-4H）。
上海海洋大学硕士学位论文15图2-3短蛸肝脏和鳃组织感染后的透射电镜分析。E、F分别代表肝脏和鳃组织，0—2分别代表对照组、鳗弧菌感染组、副溶血弧菌感染组，N代表细胞核（nucleus），CP代表细胞质（cytoplasm），黑箭头指向鳃部分泌细胞，白箭头指向鳃上皮微绒毛结构。Fig.3transmissionelectronmicroscopeanalysisofO.octopu’sliverandgilltissuesofinfection.EandFrepresentliverandgilltissusrespectively,0-2repectivelyrepresentthecontrolgroup,V.anguillaeinfectiongroupandV.parehaemolyticusinfectiongroup,Nstandsfornucleus,CPstandsforcytoplasm,theblackarrowpointstothesecretorycellsinthegills,thewhitearrowpointstotheepithelialmicrovilliinthegills.
本文编号：3456661
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