Amhy/Amh及其受体AmhrⅡ对尼罗罗非鱼雄性性别的决定作用
发布时间：2021-10-30 18:06
性别决定基因是决定性别的开关,它控制着双向潜能性腺分化为卵巢或是精巢。Amh（Anti-Miillerian hormone）及其受体AmhrⅡ（Anti-Mullerian hormone receptor type II）属于TGF-β超家族成员,对四足动物的研究表明它们的功能是诱导雄性的缪勒氏管退化,但鱼类并没有缪勒氏管,却存在Amh和AmhrⅡ,那么其作用有待阐明。近年来,一些研究表明TGF-β信号通路成员在鱼类性别决定中起重要作用,如银汉鱼（Allanetta bleekeri）的Amhy、红鳍东方鲀（Takifugu rubripes）的AmhrⅡ以及吕宋青鳉（Oryzias luzonensis）的GsdfY。尼罗罗非鱼是重要的世界性养殖鱼类,具有XX/XY性别决定类型,雄鱼比雌鱼生长快约50%,易于获得单性鱼苗以及全基因组测序已公开等优点,所以,尼罗罗非鱼是研究性别决定和分化分子机制的好材料,可以兼顾基础和应用两个方面研究。本实验室前期工作中克隆了尼罗罗非鱼的性别决定候选基因Amhy/Amh,但其决定性别的功能还有待验证。本研究拟通过CRISPR/Cas9介导的基因敲除...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尼罗罗非鱼Am
通过免疫组化方法对１０、３０、９０?ｄａｈ?Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失后性别分化相关基因表??达的分析显示：Ｃｙｐｌ９ａｌａ?（雌激素合成关键酶一芳香化酶）在Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失卵??巢间质细胞中有少量表达（图２Ｅ、Ｆ、Ｊ、Ｎ），而在对照组中Ｃｙｐｌ９ａｌａ只在卵巢??间质细胞表达（图２?Ｈ）而在精巢不表达（图２?Ｇ、Ｌ、Ｐ）。Ｄｍｒｔｌ在对照组精巢??支持细胞（图２Ｃ、Ｋ、０）中表达，而在卵巢中不表达（图２Ｄ）。??９０?ｄａｈ?３０?ｄａｈ?１０?ｄａｈ??样｜＾＾｜變Ｉ??＿■酵麥??０?赚ｆＣＫｆｅｉ?Ｄｍｒｔｌ?—??＇ｍｍｍｗ??图２组织学及免疫组化显示１０、３０、‘?９０天敲除导致ＸＹ性逆转。Ｃｙｐｌ９ａｌａ在卵??巢间质细胞中表达，在ＸＹ雄性性腺中不表达（Ｇ、Ｌ、Ｐ），但是在ＸＹ性逆转为卵巢间质细胞中有表达（Ｅ、??Ｆ、Ｊ、Ｎ）而Ｄｍｒｔｌ不表达（Ａ、Ｂ、Ｉ、Ｍ）和对照精巢不同（Ｃ、Ｋ、０）。比例尺：Ａ，Ｃ，?Ｅ，?５０?ｎｍ；?Ｂ，??２９??
雌激素（Ｅ２）水平，以便分析Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失对雌激素合成的影响。结果显示：??Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失的ＸＹ个体Ｅ２的水平比正常ＸＹ个体高，但没有达到正常ＸＸ个??体水平（图３）。??２４－１?Ｃ??１??ｏｘ?１?沙?？｜｜?ｎ＾ｉ??ｆ，２．?＿?Ｔ??１６．１??＾?圓?ｇ??０＿?■?——ｔ??ＸＸ，Ｃｔｒｌ?ＸＹ，?ＫＯ?ＸＹ，Ｃ＊ｒｌ??（ｎ＝５）?（ｎ＝８）?（ｎ＝５）??图３与对照组相比，在ＸＹ个体敲除导致Ｅ２水平上升。数据表示测量的平均值土标准??差，误差线上不同字母表示单因素方差统计分析后有显著差异（Ｐ＜０．０５）；?ｎ代表检测鱼的尾数。??Ｆｉｇ．３?Ｋｎｏｃｋｏｕｔ?ｏｆ?Ａｍｈｙ／Ａｍｈ?ｉｎ?ｔｈｅ?ＸＹ?ｆｉｓｈ?ｒｅｓｕｌｔｅｄ?ｉｎ?ｉｎｃｒｅａｓｅｄ?ｓｅｒｕｍ?Ｅ２?ｌｅｖｅｌ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ??ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｆｉｓｈ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｔｈｅ?ｍｅａｉｔｆｃＳＤ．?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ?ａｔ?Ｐ＜０．０５?ａｓ??ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ｆｏｌｌｏｗｅｄ?ｂｙ?ａ?ｐｏｓｔ?ｈｏｃ?ｔｅｓｔ?Ｓａｍｐｌｅ?ｎｕｍｂｅｒｓ?ａｒｅ?ｓｈｏｗｎ．??３．５敲除阳性鱼ＡｍＡｙＡｍＡ蹄选及建系??生殖细胞传递突变是建立纯合敲除个体的关键，ＡｍｈｙｌＡｔｎｈ突变ＧＯ代ＸＹ个??体精液和ＸＸ个体卵子受精成功获得Ｆ１代个体
【参考文献】：
期刊论文
[1]半滑舌鳎抗缪勒氏管激素（AMH）基因的克隆及组织表达分析[J]. 刘姗姗,孙冰,梁卓,张静,陈松林. 中国水产科学. 2013(01)
[2]栉孔扇贝Fosmid文库的构建及基因组结构特征分析[J]. 程洁,张玲玲,黄晓婷,张灿,王师,胡景杰,包振民. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2008(01)
[3]Transformer基因与果蝇和线虫的性别决定[J]. 刘辉,陈思礼,王国秀. 遗传. 2005(01)
[4]人工诱导点带石斑鱼性逆转的组织学证据及其机制探讨[J]. 邹记兴,陶友宝,向文洲,林坚士,胡超群. 高技术通讯. 2003(06)
[5]鱼类芳香化酶活性研究的进展[J]. 洪万树,方永强. 水产学报. 2000(03)
[6]鱼类性别决定及其机制的研究进展[J]. 王德寿,吴天利,张耀光. 西南师范大学学报(自然科学版). 2000(03)
硕士论文
[1]罗非鱼gsdf在性腺的表达及其在性别决定中的功能[D]. 杨惠惠.西南大学 2014
本文编号：3467182
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尼罗罗非鱼Am
通过免疫组化方法对１０、３０、９０?ｄａｈ?Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失后性别分化相关基因表??达的分析显示：Ｃｙｐｌ９ａｌａ?（雌激素合成关键酶一芳香化酶）在Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失卵??巢间质细胞中有少量表达（图２Ｅ、Ｆ、Ｊ、Ｎ），而在对照组中Ｃｙｐｌ９ａｌａ只在卵巢??间质细胞表达（图２?Ｈ）而在精巢不表达（图２?Ｇ、Ｌ、Ｐ）。Ｄｍｒｔｌ在对照组精巢??支持细胞（图２Ｃ、Ｋ、０）中表达，而在卵巢中不表达（图２Ｄ）。??９０?ｄａｈ?３０?ｄａｈ?１０?ｄａｈ??样｜＾＾｜變Ｉ??＿■酵麥??０?赚ｆＣＫｆｅｉ?Ｄｍｒｔｌ?—??＇ｍｍｍｗ??图２组织学及免疫组化显示１０、３０、‘?９０天敲除导致ＸＹ性逆转。Ｃｙｐｌ９ａｌａ在卵??巢间质细胞中表达，在ＸＹ雄性性腺中不表达（Ｇ、Ｌ、Ｐ），但是在ＸＹ性逆转为卵巢间质细胞中有表达（Ｅ、??Ｆ、Ｊ、Ｎ）而Ｄｍｒｔｌ不表达（Ａ、Ｂ、Ｉ、Ｍ）和对照精巢不同（Ｃ、Ｋ、０）。比例尺：Ａ，Ｃ，?Ｅ，?５０?ｎｍ；?Ｂ，??２９??
雌激素（Ｅ２）水平，以便分析Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失对雌激素合成的影响。结果显示：??Ａｍｈｙ／Ａｍｈ缺失的ＸＹ个体Ｅ２的水平比正常ＸＹ个体高，但没有达到正常ＸＸ个??体水平（图３）。??２４－１?Ｃ??１??ｏｘ?１?沙?？｜｜?ｎ＾ｉ??ｆ，２．?＿?Ｔ??１６．１??＾?圓?ｇ??０＿?■?——ｔ??ＸＸ，Ｃｔｒｌ?ＸＹ，?ＫＯ?ＸＹ，Ｃ＊ｒｌ??（ｎ＝５）?（ｎ＝８）?（ｎ＝５）??图３与对照组相比，在ＸＹ个体敲除导致Ｅ２水平上升。数据表示测量的平均值土标准??差，误差线上不同字母表示单因素方差统计分析后有显著差异（Ｐ＜０．０５）；?ｎ代表检测鱼的尾数。??Ｆｉｇ．３?Ｋｎｏｃｋｏｕｔ?ｏｆ?Ａｍｈｙ／Ａｍｈ?ｉｎ?ｔｈｅ?ＸＹ?ｆｉｓｈ?ｒｅｓｕｌｔｅｄ?ｉｎ?ｉｎｃｒｅａｓｅｄ?ｓｅｒｕｍ?Ｅ２?ｌｅｖｅｌ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ??ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｆｉｓｈ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｔｈｅ?ｍｅａｉｔｆｃＳＤ．?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ?ａｔ?Ｐ＜０．０５?ａｓ??ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ｆｏｌｌｏｗｅｄ?ｂｙ?ａ?ｐｏｓｔ?ｈｏｃ?ｔｅｓｔ?Ｓａｍｐｌｅ?ｎｕｍｂｅｒｓ?ａｒｅ?ｓｈｏｗｎ．??３．５敲除阳性鱼ＡｍＡｙＡｍＡ蹄选及建系??生殖细胞传递突变是建立纯合敲除个体的关键，ＡｍｈｙｌＡｔｎｈ突变ＧＯ代ＸＹ个??体精液和ＸＸ个体卵子受精成功获得Ｆ１代个体
【参考文献】：
期刊论文
[1]半滑舌鳎抗缪勒氏管激素（AMH）基因的克隆及组织表达分析[J]. 刘姗姗,孙冰,梁卓,张静,陈松林. 中国水产科学. 2013(01)
[2]栉孔扇贝Fosmid文库的构建及基因组结构特征分析[J]. 程洁,张玲玲,黄晓婷,张灿,王师,胡景杰,包振民. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2008(01)
[3]Transformer基因与果蝇和线虫的性别决定[J]. 刘辉,陈思礼,王国秀. 遗传. 2005(01)
[4]人工诱导点带石斑鱼性逆转的组织学证据及其机制探讨[J]. 邹记兴,陶友宝,向文洲,林坚士,胡超群. 高技术通讯. 2003(06)
[5]鱼类芳香化酶活性研究的进展[J]. 洪万树,方永强. 水产学报. 2000(03)
[6]鱼类性别决定及其机制的研究进展[J]. 王德寿,吴天利,张耀光. 西南师范大学学报(自然科学版). 2000(03)
硕士论文
[1]罗非鱼gsdf在性腺的表达及其在性别决定中的功能[D]. 杨惠惠.西南大学 2014
本文编号：3467182
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