高脂条件下吉富罗非鱼脂肪肝病的模型建立及垂盆草药效作用的研究
发布时间：2021-11-17 14:14
鱼类脂肪肝病使罗非鱼容易遭受外源致病因子导致感染而大规模死亡,给养殖者造成极大的经济损失,阻碍了罗非鱼养殖业的发展。本实验通过投喂高脂饲料建立罗非鱼非酒精脂肪肝模型为基础,进行了垂盆草对该类模型罗非鱼保肝药效作用的研究及对肝细胞和肾细胞细胞凋亡抑制作用的探讨,为垂盆草在预防高脂投喂导致的脂肪肝病提供了实验依据。根据前期研究,将实验用的罗非鱼平均分为3个组,每组设3个平行组。分别为正常组、高脂组、垂盆草组。每日的9:00am和5:00pm,进行连续6周的投喂。3个组的罗非鱼在投喂6周后随机抽取每组15尾,采集血清、观察脏器官的变化并采集肝胰脏组织样本,检测6周后实验罗非鱼脏器官损伤程度的主要生理生化指标,利用H.E染色技术观察肝脏细胞的变化情况,判断垂盆草针对以高脂饲料为基础投喂罗非鱼所致脂肪肝病的预防效果。采用TUNEL检测方法对石蜡包埋过的三组罗非鱼肝脏和肾脏切片通过荧光显微镜观察细胞变化情况,通过计算得出凋亡率并作比较。所得结果如下:经过6周的喂养,高脂组罗非鱼与基础组相比,从血液指标的测定上来看:高脂组提高了罗非鱼血清中的AST、ALT、TG、CHOL、LDH、TBA 以及 MD...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１细胞凋亡形态变化??
?ｒ??■—緣＝戀??图１－１细胞凋亡形态变化??Ｆｉｇ．?１－１?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｏｆ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ??１．５．３细胞调亡的检测方法??（１）?ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ结合膜表磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）及ＡＶ／ＰＩ的实验??检测原理：正常ＰＳ是位于细胞膜的内测区域，出现凋亡状态情况时，ＰＳ外??翻，位于膜外侧。使得ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ?（与死细胞结合）结合ＰＳ检测细胞凋亡。??Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ（膜联蛋白Ｖ）是一种相对分子质量为３５？３６?ｋｕ的Ｃａ２?＋依赖性磷脂结??合蛋白，能与ＰＳ高度结合。将ＡｎｎｅｘｉｎＶ用焚光素（ＦＩＴＣ）标记，用标记Ａｎｎｅｘｉｎ??Ｖ的作为荧光探针，利用工具荧光显微镜以及流式细胞仪可检测凋亡的细胞。最??新研究推出了同位素标记的Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ［５３］，大幅度的提高了检测的灵敏度。由于??坏死细胞的表面也可能出现ＰＳ，相继又开发出Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ联合ＰＩ检测法，可将??细胞分为正常、凋亡和坏死三种［５４］。正常的细胞不被Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ及ＰＩ染色，而??调亡细胞Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ染色呈强阳性、ＰＩ染色呈阴性或弱阳性
?Ｊ?耙核酸?９?Ｑ?ｐ??酶标特异性抗体??图１－２间接法原位杂交示意图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｉｎｄｉｒｅｃｔ?ｉｎ?ｓｉｔｕ?ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ??１．５．４细胞凋亡的发生机制??（１）
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国罗非鱼产业现状、存在问题和发展对策[J]. 王世表,宋怿,黄磊. 中国渔业质量与标准. 2016(05)
[2]槲皮素拮抗顺铂引起肾小管上皮细胞凋亡的作用[J]. 郑华,孙艺,纪镇华. 中国冶金工业医学杂志. 2016(02)
[3]饲料脂肪水平对芙蓉鲤鲫形体指标、组织脂肪含量与脂肪酸组成的影响[J]. 何志刚,刘文革,伍远安,王金龙,李传武,李绍明. 饲料研究. 2016(06)
[4]糖对草鱼肝脂代谢关键基因转录水平的调控研究[J]. 孙君君,卢荣华,常志光,秦超彬,杨峰,聂国兴. 水产科学. 2015(11)
[5]木犀草素改善高脂诱导的ApoE-/-小鼠非酒精性脂肪肝及动脉粥样硬化作用研究[J]. 罗云,卢珊,周平,孙桂波,孙晓波. 世界中医药. 2015(08)
[6]垂盆草（Sedum sarmentosum）水提物对草鱼（Ctenopharyngodon idellus）脂肪性肝损伤治疗效果研究[J]. 吴春艳,汪开毓,任思宇,王均,苗常鸿. 海洋与湖沼. 2015(04)
[7]中国罗非鱼生产与贸易现状分析及建议[J]. 张红燕,袁永明,贺艳辉,王红卫,代云云. 中国渔业经济. 2015(03)
[8]垂盆草水煎液对不同小鼠急性肝损伤模型的疗效作用[J]. 刘三海,李蕊,乔艳雪,陈芯,张楠楠,张剑平. 中国肝脏病杂志(电子版). 2015(01)
[9]垂盆草醇提物抑制HepG2细胞STAT-3信号通路诱导细胞凋亡的研究[J]. 曾军英,李胜华,伍贤进,刘丹,万雄. 中国中药杂志. 2014(17)
[10]养殖鱼类脂肪肝研究现状分析[J]. 黄春红,肖调义,胡毅,赵玉蓉,刘巧林. 动物营养学报. 2014 (07)
博士论文
[1]单点突变蛋白特异的RNA适配体筛选及功能研究[D]. 陈亮.中国科学技术大学 2015
[2]Gankyrin在四氯化碳诱导的肝损伤及其恶性转化中的作用和机制研究[D]. 付静.第二军医大学 2015
[3]纳米金刚石载药及其对HL-60细胞凋亡作用的研究[D]. 樊凤阳.吉林大学 2014
[4]高脂日粮诱导团头鲂脂肪肝发生机制及黄连素调控的研究[D]. 鲁康乐.南京农业大学 2014
[5]传统中药肝保护作用及其分子机制研究[D]. 廉丽花.延边大学 2011
[6]玻璃海鞘（Ciona intestinalis）实验养殖、血细胞的分类及其免疫应答研究[D]. 刘利平.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2005
硕士论文
[1]木犀草素防治无机汞诱导的肾损伤效果观察[D]. 谭斅.东北农业大学 2016
[2]投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼幼鱼生长性能和生理机能的影响[D]. 覃希.广西大学 2014
[3]垂盆草对四氯化碳致小鼠急性肝损伤保护作用的研究[D]. 朱安妮.北京中医药大学 2014
[4]早期脑出血后细胞凋亡与p75NTR、TrkA的相关性研究[D]. 钟湘平.南华大学 2014
[5]NF-κB/P65、cleaved-PARP在脑出血后神经细胞凋亡中的相关性研究[D]. 高贻宽.南华大学 2014
[6]垂盆草提取物对草鱼脂肪肝模型药效作用研究[D]. 吴春艳.四川农业大学 2013
[7]木蹄复方水提物对四氯化碳肝损伤的保护作用及其机制[D]. 陈伟.第二军医大学 2013
[8]扯根菜提取物对草鱼脂肪肝的药理作用研究[D]. 苗常鸿.四川农业大学 2012
[9]绞股蓝多糖对小鼠胸腺和脾脏影响的研究[D]. 周石琼.广西大学 2012
[10]丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护机制[D]. 李延可.兰州大学 2012
本文编号：3501084
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１细胞凋亡形态变化??
?ｒ??■—緣＝戀??图１－１细胞凋亡形态变化??Ｆｉｇ．?１－１?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｏｆ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ??１．５．３细胞调亡的检测方法??（１）?ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ结合膜表磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）及ＡＶ／ＰＩ的实验??检测原理：正常ＰＳ是位于细胞膜的内测区域，出现凋亡状态情况时，ＰＳ外??翻，位于膜外侧。使得ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ?（与死细胞结合）结合ＰＳ检测细胞凋亡。??Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ（膜联蛋白Ｖ）是一种相对分子质量为３５？３６?ｋｕ的Ｃａ２?＋依赖性磷脂结??合蛋白，能与ＰＳ高度结合。将ＡｎｎｅｘｉｎＶ用焚光素（ＦＩＴＣ）标记，用标记Ａｎｎｅｘｉｎ??Ｖ的作为荧光探针，利用工具荧光显微镜以及流式细胞仪可检测凋亡的细胞。最??新研究推出了同位素标记的Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ［５３］，大幅度的提高了检测的灵敏度。由于??坏死细胞的表面也可能出现ＰＳ，相继又开发出Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ联合ＰＩ检测法，可将??细胞分为正常、凋亡和坏死三种［５４］。正常的细胞不被Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ及ＰＩ染色，而??调亡细胞Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ染色呈强阳性、ＰＩ染色呈阴性或弱阳性
?Ｊ?耙核酸?９?Ｑ?ｐ??酶标特异性抗体??图１－２间接法原位杂交示意图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｉｎｄｉｒｅｃｔ?ｉｎ?ｓｉｔｕ?ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ??１．５．４细胞凋亡的发生机制??（１）
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国罗非鱼产业现状、存在问题和发展对策[J]. 王世表,宋怿,黄磊. 中国渔业质量与标准. 2016(05)
[2]槲皮素拮抗顺铂引起肾小管上皮细胞凋亡的作用[J]. 郑华,孙艺,纪镇华. 中国冶金工业医学杂志. 2016(02)
[3]饲料脂肪水平对芙蓉鲤鲫形体指标、组织脂肪含量与脂肪酸组成的影响[J]. 何志刚,刘文革,伍远安,王金龙,李传武,李绍明. 饲料研究. 2016(06)
[4]糖对草鱼肝脂代谢关键基因转录水平的调控研究[J]. 孙君君,卢荣华,常志光,秦超彬,杨峰,聂国兴. 水产科学. 2015(11)
[5]木犀草素改善高脂诱导的ApoE-/-小鼠非酒精性脂肪肝及动脉粥样硬化作用研究[J]. 罗云,卢珊,周平,孙桂波,孙晓波. 世界中医药. 2015(08)
[6]垂盆草（Sedum sarmentosum）水提物对草鱼（Ctenopharyngodon idellus）脂肪性肝损伤治疗效果研究[J]. 吴春艳,汪开毓,任思宇,王均,苗常鸿. 海洋与湖沼. 2015(04)
[7]中国罗非鱼生产与贸易现状分析及建议[J]. 张红燕,袁永明,贺艳辉,王红卫,代云云. 中国渔业经济. 2015(03)
[8]垂盆草水煎液对不同小鼠急性肝损伤模型的疗效作用[J]. 刘三海,李蕊,乔艳雪,陈芯,张楠楠,张剑平. 中国肝脏病杂志(电子版). 2015(01)
[9]垂盆草醇提物抑制HepG2细胞STAT-3信号通路诱导细胞凋亡的研究[J]. 曾军英,李胜华,伍贤进,刘丹,万雄. 中国中药杂志. 2014(17)
[10]养殖鱼类脂肪肝研究现状分析[J]. 黄春红,肖调义,胡毅,赵玉蓉,刘巧林. 动物营养学报. 2014 (07)
博士论文
[1]单点突变蛋白特异的RNA适配体筛选及功能研究[D]. 陈亮.中国科学技术大学 2015
[2]Gankyrin在四氯化碳诱导的肝损伤及其恶性转化中的作用和机制研究[D]. 付静.第二军医大学 2015
[3]纳米金刚石载药及其对HL-60细胞凋亡作用的研究[D]. 樊凤阳.吉林大学 2014
[4]高脂日粮诱导团头鲂脂肪肝发生机制及黄连素调控的研究[D]. 鲁康乐.南京农业大学 2014
[5]传统中药肝保护作用及其分子机制研究[D]. 廉丽花.延边大学 2011
[6]玻璃海鞘（Ciona intestinalis）实验养殖、血细胞的分类及其免疫应答研究[D]. 刘利平.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2005
硕士论文
[1]木犀草素防治无机汞诱导的肾损伤效果观察[D]. 谭斅.东北农业大学 2016
[2]投喂频率和投喂水平对吉富罗非鱼幼鱼生长性能和生理机能的影响[D]. 覃希.广西大学 2014
[3]垂盆草对四氯化碳致小鼠急性肝损伤保护作用的研究[D]. 朱安妮.北京中医药大学 2014
[4]早期脑出血后细胞凋亡与p75NTR、TrkA的相关性研究[D]. 钟湘平.南华大学 2014
[5]NF-κB/P65、cleaved-PARP在脑出血后神经细胞凋亡中的相关性研究[D]. 高贻宽.南华大学 2014
[6]垂盆草提取物对草鱼脂肪肝模型药效作用研究[D]. 吴春艳.四川农业大学 2013
[7]木蹄复方水提物对四氯化碳肝损伤的保护作用及其机制[D]. 陈伟.第二军医大学 2013
[8]扯根菜提取物对草鱼脂肪肝的药理作用研究[D]. 苗常鸿.四川农业大学 2012
[9]绞股蓝多糖对小鼠胸腺和脾脏影响的研究[D]. 周石琼.广西大学 2012
[10]丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护机制[D]. 李延可.兰州大学 2012
本文编号：3501084
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3501084.html
