一种新型钙调素结合蛋白—金属蛋白酶在龙须菜高温胁迫中的表达模式研究

发布时间：2021-11-23 12:36

　　龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）是一种重要的产琼胶经济海藻，原产于山东和辽宁，在我国已成为继海带和紫菜后的第三大栽培海藻。随着龙须菜栽培业的不断发展，对龙须菜种质提出了更高的要求，研究者们先后选育出耐热品种981和07-2，使得龙须菜品质得到了不断改良，其耐高温性能也不断提高，带来了巨大的经济效益和社会生态效益。然而，在龙须菜大规模栽培中，这两个耐高温品系也出现了种质退化现象，为此，迫切需要研究龙须菜在高温胁迫下的响应机制，为选育性状优良、耐高温性强的龙须菜新品系奠定基础。实验室前期通过酵母双杂交系统筛选高温胁迫条件下钙调素（CaM）结合蛋白，得到了金属蛋白酶（metalloproteinase of Gracilaria lemaneiformis, GlMP）的表达序列标签，表明金属蛋白酶可能是龙须菜CaM信号传导途径中的一员，在龙须菜响应高温胁迫中发挥作用。本论文在此基础上，首次克隆龙须菜的GlMP基因，并研究其在高温胁迫下的表达模式，为探讨龙须菜对高温胁迫下的信号传导途径打下基础，并为龙须菜耐高温品系的选育提供可用的基因信息。本研究以野生型、981和0... 

【文章来源】：中国海洋大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 龙须菜简介
    2 钙-钙调素信号系统
        2.1 信号传导中的钙
        2.2 钙调素
        2.3 钙调素结合蛋白
    3 金属蛋白酶的研究进展
    4 酵母双杂交技术
    5 本论文研究目的及意义
第二章 龙须菜金属蛋白酶基因的克隆及其在热激下的表达模式分析和与CaM 间的相互作用验证
    1 材料和方法
        1.1 实验材料、试剂和仪器
        1.2 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 龙须菜 RNA 的提取
        2.2 龙须菜 DNA 的提取
        2.3 龙须菜 GlMP 基因克隆及分析
        2.4 Southern blotting 分析
        2.5 龙须菜 GlMP 与 CaM 相互作用的杂交验证
        2.6 高温胁迫下野生型、981 和 07-2 三种龙须菜 GlMP 与 CaM 的转录分析
    3 讨论
第三章 龙须菜高温胁迫下 CaM 结合蛋白的筛查及相关生物信息学分析
    第一节 龙须菜高温胁迫下 CaM 结合蛋白的筛查和分析
        1 材料与方法
            1.1 实验材料、试剂和仪器
            1.2 实验方法
        2 结果与讨论
            2.1 诱饵质粒 pGBKT7 – CaM 和 pGADT7-cDNA 文库质粒酵母转化
            2.2 酵母双杂交
            2.3 阳性克隆的筛选及相关生物信息学分析
    第二节 龙须菜 GlMP 与 CaM 结合结构预测及验证
        1 材料和方法
            1.1 实验材料、试剂和仪器
            1.2 实验方法
        2 结果与分析
            2.1 GlMP 开放阅读框的克隆
            2.2 GlMP_F,GlMP_M ,GlMP_L和 GlMP_W与 CaM 结合验证
        3 讨论
总结
参考文献
致谢
个人简历
发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]江蓠属海藻龙须菜的基础研究与大规模栽培[J]. 张学成,费修绠,王广策,林祥志,陈伟洲,隋正红,徐涤,臧晓南.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2009(05)
[2]龙须菜新品系07-2的筛选及性状分析[J]. 孟琳,徐涤,陈伟洲,张学成.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2009(S1)
[3]东海原甲藻钙调蛋白的分离纯化及鉴定[J]. 郭彩华,刘静雯,卢珍华,詹玲玲.  集美大学学报(自然科学版). 2009(01)
[4]藻类高温胁迫分子响应的研究进展[J]. 臧晓南,张学成,张璐,刘滨,任雪莹,徐涤.  武汉大学学报(理学版). 2008(06)
[5]植物肌醇-1-磷酸合成酶的生物信息学分析[J]. 卓加金,汪晓峰.  生物技术通报. 2008(S1)
[6]钙不依赖性钙调素结合蛋白的研究进展[J]. 韦慧彦,郭振清,崔素娟.  生物化学与生物物理进展. 2007(02)
[7]龙须菜海水栽培技术[J]. 陈伟洲.  科学养鱼. 2006(12)
[8]植物中Ca2+调节的蛋白激酶的研究进展[J]. 萧蓓蕾,冯建英,贾海慧,李冬梅.  宜春学院学报. 2006(04)
[9]龙须菜的有机酸组成及其细胞毒活性[J]. 梅文莉,戴好富,徐军田.  中国海洋药物. 2006(02)
[10]植物金属蛋白酶的研究进展[J]. 易博,黄蓓蓓,陆倍倍,余晓静,陈万生.  药学实践杂志. 2006(01)

博士论文
[1]植物钙调素结合蛋白激酶的基因分离、鉴定及生物学功能分析[D]. 马力.武汉大学 2004

硕士论文
[1]龙须菜高温胁迫响应的钙调素信号传导途径的研究[D]. 张璇.中国海洋大学 2012



本文编号：3513898