饲料中添加糖酶对不同食性鱼类生长、糖代谢及GLUT2基因表达的影响
发布时间：2021-11-26 01:04
本实验以肉食性鱼类卵形鲳鲹、珍珠龙胆石斑鱼以及草食性鱼类草鱼为研究对象,采用RACE-PCR技术克隆了卵形鲳鲹GLUT2基因,并分析了三种鱼类GLUT2序列差异及其系统进化关系。同时通过养殖实验进行比较,1)在高糖水平下添加糖酶对卵形鲳鲹生长、糖代谢、消化酶和GLUT2基因表达的影响;2)不同糖脂比条件下添加糖酶对珍珠龙胆石斑鱼生长、糖代谢、消化酶和GLUT2基因表达的影响;3)不同糖水平条件下添加糖酶对草鱼生长、糖代谢、消化酶和GLUT2基因表达的影响。从而探究不同食性鱼类GLUT2的表达差异,解析其在饲料中添加糖酶作用下对不同食性鱼类相关糖代谢的调控机制。研究结果如下:1.卵形鲳鲹GLUT2基因分子克隆及序列分析通过RACE技术克隆并鉴定了卵形鲳鲹葡萄糖转运蛋白2基因（Trachnotus ovatus,To GLUT2）,并在卵形鲳鲹的各组织中进行了表达分析。To GLUT2全长c DNA由2280 bp和32 bp的5’-UTR,1638 bp的开放阅读框（ORF）和610 bp的3’-UTR组成,编码546个氨基酸（Gen Bank登录号:MK649830）。To GLUT2...
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小肠上皮细胞葡萄糖转运图
广东海洋大学硕士学位论文9盒，每个样品重复三次。在每个PCR反应结束时进行熔解曲线分析。然后将数据转换为Ct值。使用2-△△CT方法经行计算。表2-1GLUT2基因克隆和荧光定量引物Tab.2-1TheprimersequencesdesignedforobtainingtheGLUT2fragmentandformRNAexpressionquantificationUsePrimersnameSequence(5′-3′)UsedforcloneofcorefragmentTo-GLUT2FGGHTACAGTCTTGGAGTCATTo-GLUT2RGAYGAARTTGCWGGTCCAGTTSynthesisofGLUT2for5′RACE5′To-GLUT2-RACE1AATGACAATAGCCAGC5′To-GLUT2-RACE2GTAAAGTTCCCAGAGCCC5′To-GLUT2-RACE3ATAAGCCTTGGGTGCGATSynthesisofGLUT2for3′RACE3′To-GLUT2-RACE1GCCTCCGATTCCAGAACGACTACT3′To-GLUT2-RACE2TCTTTGAAATCGGTCCTGGTCCTAUsedforqPCRoftissuedistributionandexpressionqTo-GLUT2FCTCCGATTCCAGAACGACTACTCqTo-GLUT2RTGGAATAGGACCAGGACCGATUsedasinternalstandardβ-ActinFTACGAGCTGCCTGACGGACAβ-ActinRGGCTGTGATCTCCTTCTGC2.1.4数据分析实验数据用SPSSVersion19.0软件所有的数据首先进行方差同质性检验，然后进行单因素方差分析（one-wayANOVA），比较不同组织间的TO-GLTU2表达差异。如有显著性差异(P<0.05)，则做Tukey多重比较，实验数据用“平均数±标准差”表示。GLTU2mRNA水平以β-actin为内参，应用2-△△CT法确定mRNA的相对表达量。2.2实验结果2.2.1核心片段通过简并引物克隆得到卵形鲳鲹GLUT2的中间片段。卵形鲳鲹图2-1卵形鲳鲹GLUT2中间片段电泳图Fig.2-1TheresultofelectrophoresispatternofGLUT2coresequenceinTrachinotusovatus
广东海洋大学硕士学位论文 2.2.3 GLUT2 蛋白跨膜结构和三级结构预测 软件（TMHMM2.0）分析卵形鲳鲹 GLUT2 具有 12 个高度保守的跨膜结构域。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼类消化道菌群与碳水化合物代谢[J]. 鲁程瑶,丁倩雯,冉超,杨雅麟,王安然,张洪玲,张进雄,李解,ERIK Olsen Rolf,EINAR Ring?,张震,周志刚. 水产学报. 2019(10)
[2]珍珠龙胆石斑鱼工厂化健康育苗技术的研究[J]. 余庆,刘明珠,肖贺贺,吴思婷,董德信,覃仙玲,朱冬琳,陈宪云,陆兰天,聂振平,罗永巨,李鹏飞. 广西科学院学报. 2019(03)
[3]鲤鱼对饲料碳水化合物利用的研究进展[J]. 范泽,程镇燕,张宝龙,翟胜利,孙金辉,白东清,乔秀亭. 中国饲料. 2017(17)
[4]饲料中糖水平对不同食性海水鱼类PEPCK基因表达和酶活性的影响[J]. 李淑云,刘泓宇,谭北平,董晓慧,杨奇慧,迟淑艳,章双. 水生生物学报. 2015(01)
[5]盐度对卵形鲳鲹幼鱼渗透压调节和饥饿失重的影响[J]. 区又君,范春燕,李加儿,于娜. 生态学报. 2014(24)
[6]不同糖源及糖水平对大菱鲆糖代谢酶活性的影响[J]. 聂琴,苗惠君,苗淑彦,陈尘悦,李静,张文兵,麦康森. 水生生物学报. 2013(03)
[7]饲料糖水平对吉富罗非鱼幼鱼生长和肝代谢功能的影响[J]. 蒋利和,吴宏玉,黄凯,麻艳群,杨淇龄,余德光,钟灵香. 水产学报. 2013(02)
[8]含α-半乳糖苷酶的饲料复合酶对生长猪生长性能和血液生化指标的影响[J]. 乔伟,戴求仲,贺建华. 饲料工业. 2010(16)
[9]鱼类消化系统的结构、功能及消化酶的分布与特性[J]. 徐革锋,陈侠君,杜佳,牟振波. 水产学杂志. 2009(04)
[10]豆粕和棉粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响[J]. BUN Sidoeun,呙于明,张炳坤,袁建敏,胡骁飞,张立彬. 中国畜牧杂志. 2009(15)
博士论文
[1]青鱼（Mylopharyngodon pieces Richardson）和鲫（Carassius auratus）对饲料糖的利用及其代谢机制的研究[D]. 蔡春芳.华东师范大学 2004
硕士论文
[1]饲料蛋白质、糖脂比及铁铜源对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼营养生理功能的影响[D]. 郭鑫伟.广东海洋大学 2019
[2]饲料不同糖源和糖水平对卵形鲳鲹生长和糖代谢的影响[D]. 董兰芳.广西大学 2016
[3]不同食性鱼类4型葡萄糖转运蛋白（GLUT4）基因克隆及表达比较研究[D]. 陈强.广东海洋大学 2016
[4]饲料糖类物质对大菱鲆糖代谢酶活性和基因表达量的影响[D]. 聂琴.中国海洋大学 2013
[5]注射葡萄糖对罗非鱼糖代谢、胰岛素受体和GLUT4基因表达的影响[D]. 刘含亮.山东农业大学 2012
[6]高碳水化合物水平日粮对异育银鲫生产性能、免疫及应激蛋白HSP70的影响[D]. 缪凌鸿.南京农业大学 2009
本文编号：3519125
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小肠上皮细胞葡萄糖转运图
广东海洋大学硕士学位论文9盒，每个样品重复三次。在每个PCR反应结束时进行熔解曲线分析。然后将数据转换为Ct值。使用2-△△CT方法经行计算。表2-1GLUT2基因克隆和荧光定量引物Tab.2-1TheprimersequencesdesignedforobtainingtheGLUT2fragmentandformRNAexpressionquantificationUsePrimersnameSequence(5′-3′)UsedforcloneofcorefragmentTo-GLUT2FGGHTACAGTCTTGGAGTCATTo-GLUT2RGAYGAARTTGCWGGTCCAGTTSynthesisofGLUT2for5′RACE5′To-GLUT2-RACE1AATGACAATAGCCAGC5′To-GLUT2-RACE2GTAAAGTTCCCAGAGCCC5′To-GLUT2-RACE3ATAAGCCTTGGGTGCGATSynthesisofGLUT2for3′RACE3′To-GLUT2-RACE1GCCTCCGATTCCAGAACGACTACT3′To-GLUT2-RACE2TCTTTGAAATCGGTCCTGGTCCTAUsedforqPCRoftissuedistributionandexpressionqTo-GLUT2FCTCCGATTCCAGAACGACTACTCqTo-GLUT2RTGGAATAGGACCAGGACCGATUsedasinternalstandardβ-ActinFTACGAGCTGCCTGACGGACAβ-ActinRGGCTGTGATCTCCTTCTGC2.1.4数据分析实验数据用SPSSVersion19.0软件所有的数据首先进行方差同质性检验，然后进行单因素方差分析（one-wayANOVA），比较不同组织间的TO-GLTU2表达差异。如有显著性差异(P<0.05)，则做Tukey多重比较，实验数据用“平均数±标准差”表示。GLTU2mRNA水平以β-actin为内参，应用2-△△CT法确定mRNA的相对表达量。2.2实验结果2.2.1核心片段通过简并引物克隆得到卵形鲳鲹GLUT2的中间片段。卵形鲳鲹图2-1卵形鲳鲹GLUT2中间片段电泳图Fig.2-1TheresultofelectrophoresispatternofGLUT2coresequenceinTrachinotusovatus
广东海洋大学硕士学位论文 2.2.3 GLUT2 蛋白跨膜结构和三级结构预测 软件（TMHMM2.0）分析卵形鲳鲹 GLUT2 具有 12 个高度保守的跨膜结构域。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼类消化道菌群与碳水化合物代谢[J]. 鲁程瑶,丁倩雯,冉超,杨雅麟,王安然,张洪玲,张进雄,李解,ERIK Olsen Rolf,EINAR Ring?,张震,周志刚. 水产学报. 2019(10)
[2]珍珠龙胆石斑鱼工厂化健康育苗技术的研究[J]. 余庆,刘明珠,肖贺贺,吴思婷,董德信,覃仙玲,朱冬琳,陈宪云,陆兰天,聂振平,罗永巨,李鹏飞. 广西科学院学报. 2019(03)
[3]鲤鱼对饲料碳水化合物利用的研究进展[J]. 范泽,程镇燕,张宝龙,翟胜利,孙金辉,白东清,乔秀亭. 中国饲料. 2017(17)
[4]饲料中糖水平对不同食性海水鱼类PEPCK基因表达和酶活性的影响[J]. 李淑云,刘泓宇,谭北平,董晓慧,杨奇慧,迟淑艳,章双. 水生生物学报. 2015(01)
[5]盐度对卵形鲳鲹幼鱼渗透压调节和饥饿失重的影响[J]. 区又君,范春燕,李加儿,于娜. 生态学报. 2014(24)
[6]不同糖源及糖水平对大菱鲆糖代谢酶活性的影响[J]. 聂琴,苗惠君,苗淑彦,陈尘悦,李静,张文兵,麦康森. 水生生物学报. 2013(03)
[7]饲料糖水平对吉富罗非鱼幼鱼生长和肝代谢功能的影响[J]. 蒋利和,吴宏玉,黄凯,麻艳群,杨淇龄,余德光,钟灵香. 水产学报. 2013(02)
[8]含α-半乳糖苷酶的饲料复合酶对生长猪生长性能和血液生化指标的影响[J]. 乔伟,戴求仲,贺建华. 饲料工业. 2010(16)
[9]鱼类消化系统的结构、功能及消化酶的分布与特性[J]. 徐革锋,陈侠君,杜佳,牟振波. 水产学杂志. 2009(04)
[10]豆粕和棉粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响[J]. BUN Sidoeun,呙于明,张炳坤,袁建敏,胡骁飞,张立彬. 中国畜牧杂志. 2009(15)
博士论文
[1]青鱼（Mylopharyngodon pieces Richardson）和鲫（Carassius auratus）对饲料糖的利用及其代谢机制的研究[D]. 蔡春芳.华东师范大学 2004
硕士论文
[1]饲料蛋白质、糖脂比及铁铜源对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼营养生理功能的影响[D]. 郭鑫伟.广东海洋大学 2019
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[4]饲料糖类物质对大菱鲆糖代谢酶活性和基因表达量的影响[D]. 聂琴.中国海洋大学 2013
[5]注射葡萄糖对罗非鱼糖代谢、胰岛素受体和GLUT4基因表达的影响[D]. 刘含亮.山东农业大学 2012
[6]高碳水化合物水平日粮对异育银鲫生产性能、免疫及应激蛋白HSP70的影响[D]. 缪凌鸿.南京农业大学 2009
本文编号：3519125
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