棕点石斑鱼中草药免疫增强剂的筛选及其非特异性免疫增强效果研究

发布时间：2021-12-11 07:42

　　近年来,海南、福建、广东等地养殖棕点石斑鱼（Epinephelus fuscoguttatus）发生了较严重的暴发性疾病,制约了其可持续健康发展。筛选和使用合适的免疫增强剂以提高水产动物的整体抗病力已成为当前水产病害预防的有效手段之一。目前,在水产养殖中常用的免疫增强剂类型包括糖类、维生素、微量元素、核苷酸、微生态制剂、中草药等,其中,中草药具有天然性、多功能性、低残留、资源丰富等优点,已成为鱼类等水产养殖动物免疫增强剂的重要来源之一。本文先采用离体外周血白细胞与中草药提取液共孵育的方法快速筛选棕点石斑鱼中草药免疫增强剂,再通过体内投喂实验,检测所筛选中草药对棕点石斑鱼非特异免疫功能的影响,获得安全高效的棕点石斑鱼中草药免疫增强剂。根据已有的文献资料,选择39种已报道对水产养殖动物具有较好免疫增强效果的中草药用于棕点石斑鱼免疫增强剂筛选。采用常温浸泡提取法分别制备39种中草药提取液,与棕点石斑鱼白细胞于体外共同孵育后,采用氮蓝四唑（NBT）还原法检测了生药量浓度为100mg/mL的39种单方中草药水提液和添加了5.0mg/mL酵母聚糖的中草药水提液对棕点石斑鱼外周血白细胞氧呼吸爆发活性... 

【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
第一章 综述
    1 棕点石斑鱼研究进展
        1.1 棕点石斑鱼概述
        1.2 棕点石斑鱼养殖现状
    2 养殖鱼类疾病及其防治研究进展
        2.1 养殖鱼类疾病的发生及流行概况
        2.2 石斑鱼疾病的发生及流行概况
        2.3 鱼类疾病的防治
    3 鱼类免疫研究进展
        3.1 鱼类免疫器官及组织
        3.2 鱼类免疫细胞
        3.3 非特异性免疫因子
        3.4 鱼类主要免疫相关因子
    4 鱼用免疫增强剂研究进展
        4.1 鱼用多聚糖类免疫增强剂
        4.2 鱼用中草药免疫增强剂
    5 本研究的目的及意义
    6 本研究的技术路线
第二章 棕点石斑鱼免疫增强剂的体外快速筛选
    1 实验材料与仪器
        1.1 实验仪器设备
        1.2 主要试验试剂及配制方法
    2 试验方法
        2.1 实验中草药
        2.2 实验用鱼
        2.3 中草药提取液样品制备
        2.4 棕点石斑鱼血液样品制备
        2.5 外周血白细胞分离混合液选择及外周血白细胞样品制备
        2.6 中草药对外周血白细胞呼吸爆发活性的影响
        2.7 中草药对外周血白细胞吞噬活性的影响
        2.8 数据统计与分析
    3 结果
        3.1 棕点石斑鱼外周血白细胞分离液的筛选
        3.2 提高棕点石斑鱼白细胞氧呼吸爆发活性中草药筛选
        3.3 提高棕点石斑鱼白细胞吞噬活性中草药筛选
    4 讨论
        4.1 细胞分离液对外周血白细胞分离效果的影响
        4.2 中草药免疫增强剂筛选
第三章 中草药对棕点石斑鱼生长及非特异性免疫功能的影响
    1 实验材料与药品
        1.1 实验器材
        1.2 实验试剂及配制方法
    2 实验方法
        2.1 棕点石斑鱼的准备
        2.2 中草药提取液样品准备
        2.3 饲料制备
        2.4 取样
        2.5 体重测定
        2.6 抗凝血样品的采集及细胞免疫学指标的测定
        2.7 血清样品的采集及血清免疫学指标的测定
        2.8 脾脏体指数测定
        2.9 数据统计与分析
    3 结果与分析
        3.1 投喂三种中草药对棕点石斑鱼体重增长率的影响
        3.2 投喂三种中草药对脾脏体指数的影响
        3.3 三种中草药对棕点石斑鱼血液红细胞数量的影响
        3.4 三种中草药对棕点石斑鱼血液白细胞数量的影响
        3.5 三种中草药对棕点石斑鱼外周血白细胞氧呼吸爆发活性的影响
        3.6 三种中草药对棕点石斑鱼外周血白细胞吞噬活性的影响
        3.7 三种中草药对棕点石斑鱼碱性磷酸酶活性(AKP)的影响
        3.8 三种中草药对棕点石斑鱼血清超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的影响
        3.9 三种中草药对棕点石斑鱼血清溶菌酶活性(LSZ)的影响
        3.10 三种中草药对棕点石斑鱼血清总蛋白含量的影响
    4 讨论
        4.1 中草药促生长作用
        4.2 中草药对脾脏体指数的影响
        4.3 中草药对血细胞数量的影响
        4.4 中草药对白细胞氧呼吸爆发活性和吞噬活性的影响
        4.5 中草药对血清非特异性免疫学功能的影响
第四章 结论
参考文献
作者攻读学位期间论文发表情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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[2]人参皂苷抗马立克氏病肿瘤形成作用及其机制研究[D]. 付本懂.吉林大学 2006
[3]牙鲆免疫系统形态结构、发育和感染病理反应的研究[D]. 刘云.中国海洋大学 2003

硕士论文
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[2]草鱼体内三种氟喹诺酮类药物的残留检测研究[D]. 刘莉莉.西南大学 2008
[3]复方中草药对香鱼部分免疫生化指标的影响[D]. 马维波.吉林农业大学 2007
[4]鱼类ILF2和IL-21基因克隆与表达研究[D]. 王惠菊.浙江大学 2006



本文编号：3534278