中华绒螯蟹Tetraspanin在螺原体感染过程中的功能研究
发布时间：2021-12-15 23:28
中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）又称河蟹、毛蟹,是我国重要的淡水养殖品种,具有很高的经济价值。但是,由于养殖规模的不断扩大,其病害也越来越严重,其中“颤抖病”作为中华绒螯蟹最严重的病害之一,已经对其养殖业造成了严重的经济损失。王文等通过前期的研究证实了螺原体为中华绒螯蟹“颤抖病”的病原体,并命名为中华绒螯蟹螺原体（Spiroplasma eriocheiris）。前期研究表明,中华绒螯蟹螺原体通过鳃或表皮进入体内,侵染其靶细胞—血淋巴细胞,并通过血液循环进而侵染结缔、神经等组织引起中华绒螯蟹附肢颤抖。Tetraspanin属于四次跨膜蛋白超家族（TM4SF）,参与基本的细胞过程,包括细胞生长、粘附和分化,参与识别某些病原体的感染,在免疫反应中发挥着重要的作用。本课题组前期利用iTraq技术筛选了中华绒螯蟹螺原体侵染前后中华绒螯蟹血淋巴细胞中差异表达的蛋白,其中Tetraspanin在中华绒螯蟹螺原体感染后表达量显著降低。本硕士论文在此研究基础上通过RACE技术扩增得到了中华绒螯蟹Tetraspanin（EsTetraspanin）基因的全长,进而分析了其序列特征、表达...
【文章来源】：南京师范大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Tetraspanins富集的微区
图 2.1 EsTetraspanin 的核酸序列和对应的氨基酸序列。起始（atg）和终止（tag）密码子用红色标记。 跨膜区域用粗体和斜体表示。 SEL 结构加下划线，LEL 结构加阴影。 CCG基序用方框标出，9 个潜在的棕榈酰化位点用蓝色标出。Fig. 2.1 Nucleotide and deduced amino acid sequences (below) of EsTetraspanin cDNA from E.sinensis. Start (atg) and stop (tag) codon are marked in red. Transmembrane region is bold andindicated in italics. The SEL domain is underlined and the LEL domain is shaded. The CCG motifis boxed and 9 potential palmitoylation sites are in blue.
图 2.2 EsTetraspanin 的氨基酸序列模型。每个圆圈中的字母代表一个氨基酸，包括 SEL，LEL，跨膜区和 N-，C-末端片段。保守基序（CCG）和潜在的棕榈酰化位点突出显示。Fig. 2.2 Model of sequence of EsTetraspanin in single-letter amino acid code of its loop domains,including SEL, LEL, transmembrane region and the N-, C- terminal fragments. Conserved motif(CCG) and potential palmitoylation sites are highlighted.2.3.3 多序列比对和系统进化树分析BLAST 分析显示 EsTetraspanin 与其他甲壳类动物之间存在显著的序列相似性（图 2.3）。为了分析 EsTetraspanin 与其他 Tetraspanins 之间的进化关系，我们构建了一个系统发育树。如图 2.4 所示，结果显示 EsTetraspanin 在进化上主要分为两支。EsTetraspanin 主要与甲壳动物，包括拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）、罗氏沼虾（Macrobrachiumrosenbergii）、南美白对虾（Penaeusvannamei）和中国对虾（Penaeuschinensis）等的 Tetraspanins 分为一支，而其他物种的 Tetraspanins则分为另一支。
【参考文献】：
期刊论文
[1]水生无脊椎动物血淋巴细胞分类及免疫研究进展[J]. 吴芳丽,王月,尚跃勇,严桂珍,孔辉,胡梦红,吕为群,王有基. 大连海洋大学学报. 2016(06)
[2]虾蟹新型病原螺原体的发现和研究[J]. 王文. 南京师大学报(自然科学版). 2016(01)
[3]中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）Tetraspanin-3与WSSV的体外相互作用[J]. 关广阔,刘庆慧,黄倢. 渔业科学进展. 2015(06)
[4]长江水系中华绒螯蟹种质资源研究进展[J]. 李晓晖,许志强,葛家春,朱清顺,潘建林. 水产养殖. 2009(10)
[5]中华绒螯蟹颤抖病研究进展[J]. 方敏,宋林生,崔朝霞. 海洋科学. 2005(01)
[6]免疫增强剂对中华绒螯蟹免疫功能的影响[J]. 沈锦玉,刘问,曹铮,尹文林,沈智华,钱冬,吴颖蕾. 浙江农业学报. 2004(01)
[7]RNA干扰作用（RNAi）研究进展[J]. 陈忠斌,于乐成,王升启. 中国生物化学与分子生物学报. 2002(05)
[8]甲壳动物细胞及体液免疫机理的研究进展[J]. 徐海圣,徐步进. 大连水产学院学报. 2001(01)
[9]中华绒螯蟹病毒病病原的初步研究[J]. 沈锦玉,钱冬,刘问,尹文林,沈智华,曹铮,吴颖蕾,张念慈. 华中农业大学学报. 2000(05)
[10]河蟹颤抖病的研究现状 (上 )[J]. 黄琪琰. 科学养鱼. 2000(10)
博士论文
[1]中华绒螯蟹螺原体侵染罗氏沼虾血细胞过程中互作蛋白的筛选及功能研究[D]. 修云吉.南京师范大学 2015
硕士论文
[1]蜜蜂螺原体几丁质酶、几丁质脱乙酰酶基因的研究及螺原体对意蜂抗氧化相关酶的影响[D]. 危蓉萍.南京农业大学 2016
[2]七鳃鳗CD82的原核表达、抗体制备及相关免疫组织化学研究[D]. 张晓萍.辽宁师范大学 2016
[3]中华绒螯蟹螺原体侵染两种靶细胞模型的建立及互作相关蛋白的初步筛选[D]. 姚伟.南京师范大学 2013
本文编号：3537341
【文章来源】：南京师范大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Tetraspanins富集的微区
图 2.1 EsTetraspanin 的核酸序列和对应的氨基酸序列。起始（atg）和终止（tag）密码子用红色标记。 跨膜区域用粗体和斜体表示。 SEL 结构加下划线，LEL 结构加阴影。 CCG基序用方框标出，9 个潜在的棕榈酰化位点用蓝色标出。Fig. 2.1 Nucleotide and deduced amino acid sequences (below) of EsTetraspanin cDNA from E.sinensis. Start (atg) and stop (tag) codon are marked in red. Transmembrane region is bold andindicated in italics. The SEL domain is underlined and the LEL domain is shaded. The CCG motifis boxed and 9 potential palmitoylation sites are in blue.
图 2.2 EsTetraspanin 的氨基酸序列模型。每个圆圈中的字母代表一个氨基酸，包括 SEL，LEL，跨膜区和 N-，C-末端片段。保守基序（CCG）和潜在的棕榈酰化位点突出显示。Fig. 2.2 Model of sequence of EsTetraspanin in single-letter amino acid code of its loop domains,including SEL, LEL, transmembrane region and the N-, C- terminal fragments. Conserved motif(CCG) and potential palmitoylation sites are highlighted.2.3.3 多序列比对和系统进化树分析BLAST 分析显示 EsTetraspanin 与其他甲壳类动物之间存在显著的序列相似性（图 2.3）。为了分析 EsTetraspanin 与其他 Tetraspanins 之间的进化关系，我们构建了一个系统发育树。如图 2.4 所示，结果显示 EsTetraspanin 在进化上主要分为两支。EsTetraspanin 主要与甲壳动物，包括拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）、罗氏沼虾（Macrobrachiumrosenbergii）、南美白对虾（Penaeusvannamei）和中国对虾（Penaeuschinensis）等的 Tetraspanins 分为一支，而其他物种的 Tetraspanins则分为另一支。
【参考文献】：
期刊论文
[1]水生无脊椎动物血淋巴细胞分类及免疫研究进展[J]. 吴芳丽,王月,尚跃勇,严桂珍,孔辉,胡梦红,吕为群,王有基. 大连海洋大学学报. 2016(06)
[2]虾蟹新型病原螺原体的发现和研究[J]. 王文. 南京师大学报(自然科学版). 2016(01)
[3]中国明对虾（Fenneropenaeus chinensis）Tetraspanin-3与WSSV的体外相互作用[J]. 关广阔,刘庆慧,黄倢. 渔业科学进展. 2015(06)
[4]长江水系中华绒螯蟹种质资源研究进展[J]. 李晓晖,许志强,葛家春,朱清顺,潘建林. 水产养殖. 2009(10)
[5]中华绒螯蟹颤抖病研究进展[J]. 方敏,宋林生,崔朝霞. 海洋科学. 2005(01)
[6]免疫增强剂对中华绒螯蟹免疫功能的影响[J]. 沈锦玉,刘问,曹铮,尹文林,沈智华,钱冬,吴颖蕾. 浙江农业学报. 2004(01)
[7]RNA干扰作用（RNAi）研究进展[J]. 陈忠斌,于乐成,王升启. 中国生物化学与分子生物学报. 2002(05)
[8]甲壳动物细胞及体液免疫机理的研究进展[J]. 徐海圣,徐步进. 大连水产学院学报. 2001(01)
[9]中华绒螯蟹病毒病病原的初步研究[J]. 沈锦玉,钱冬,刘问,尹文林,沈智华,曹铮,吴颖蕾,张念慈. 华中农业大学学报. 2000(05)
[10]河蟹颤抖病的研究现状 (上 )[J]. 黄琪琰. 科学养鱼. 2000(10)
博士论文
[1]中华绒螯蟹螺原体侵染罗氏沼虾血细胞过程中互作蛋白的筛选及功能研究[D]. 修云吉.南京师范大学 2015
硕士论文
[1]蜜蜂螺原体几丁质酶、几丁质脱乙酰酶基因的研究及螺原体对意蜂抗氧化相关酶的影响[D]. 危蓉萍.南京农业大学 2016
[2]七鳃鳗CD82的原核表达、抗体制备及相关免疫组织化学研究[D]. 张晓萍.辽宁师范大学 2016
[3]中华绒螯蟹螺原体侵染两种靶细胞模型的建立及互作相关蛋白的初步筛选[D]. 姚伟.南京师范大学 2013
本文编号：3537341
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