蛋白磷酸酶-1cγ在鱼类胚胎发育中的功能研究

发布时间：2021-12-16 18:31

　　蛋白质的可逆磷酸化作用对于许多生物的生长发育起着至关重要的调控作用,其中蛋白激酶和蛋白磷酸酶分别起着磷酸化和去磷酸化作用,蛋白磷酸酶-1（PP-1）是一种广泛存在于真核细胞内的蛋白磷酸酶,它能够将丝/苏氨酸蛋白底物去磷酸化。在本论文中,我们将重点研究和阐述PP-1的催化亚基C的异构体γ（Gama）基因（PP-1cy）在动物胚胎的生长发育过程中的功能与作用。首先,我们运用RACE克隆技术在金鱼中克隆出丫基因的cDNA全长；然后,运用RT-PCR技术检测γ基因在金鱼不同胚胎发育时期和不同组织中]mRNA水平的表达；最后,在金鱼受精卵中注射PP-1Cγ的Morpholino Oligomers （MO）或过表达PP-1cγ的质粒载体,以此来分析研究PP-1cy在金鱼的胚胎发育中所扮演的功能角色。具体研究结果如下：（1）金鱼中PP-1cy基因的的cDNA全长为1078bp,其中编码区972bp,编码一种含323个氨基酸的蛋白质。PP-1cγ蛋白的氨基酸序列进行不同物种同源性比对结果表明：该蛋白序列与斑马鱼的同源相似度为96.9%,与小鼠的为96.5%,与人的为96.5%。该结果表明了PP-1c... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
第一章 前言
    1 蛋白质磷酸化与去磷酸化
    2 蛋白激酶
    3 蛋白磷酸酶
        3.1 蛋白磷酸酶-1(PP-1)
        3.2 PP-1的催化亚基(PP-1c)
        3.3 蛋白磷酸酶-2A(PP-2A)
    4 本文研究概况
第二章 实验材料与方法
    1 实验材料及试剂
        1.1 实验材料
        1.2 实验试剂
        1.3 实验仪器
    2 实验方法
        2.1 人工受精
        2.2 显微注射
        2.3 总量RNA的提取
        2.4 反转录cDNA的获得
        2.5 RACE克隆
        2.6 显微镜观察及拍照
        2.7 石蜡切片
第三章 实验结果及讨论
    1. 实验结果
        1.1 PP-1cγ在金鱼中全长cDNA的克隆及同源分析
        1.2 PP-1cγ的mRNA水平表达分析
        1.3 PP-1cγ的显微注射表型分析
    2. 结果讨论
        2.1 金鱼PP-1cγ cDNA的克隆以及其在胚胎不同时期及组织中的表达
        2.2 PP-1cγ基因在金鱼胚胎发育不同时期中的功能研究
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]PP-1催化亚基（PP-1c）在成体小白鼠不同组织器官中的分化表达与定位[J]. 刘文彬,聂磊,惠珊珊,胡小慧,马慧,王玲,周磊,肖亚梅,李万程.  中国生物化学与分子生物学报. 2011(05)
[2]金鱼PP2A调节亚基PR55γ基因的克隆及表达分析[J]. 赵珺琼,谢斯思,陈培超,邹立军,刘文彬,肖亚梅,刘少军,刘筠,李万程.  水生生物学报. 2011(03)
[3]PP2A-Aα/β在金鱼及斑马鱼发育中的分化表达模式[J]. 刘姣,付淑君,胡雯峰,刘方元,傅永明,唐鸿钊,刘文彬,肖亚梅,刘筠,李万程.  水生生物学报. 2011(03)
[4]PP-1与PP-2A在金鱼眼（球）不同组织/细胞中的表达模式[J]. 刘文彬,胡小慧,惠珊珊,周洁,刘姣,肖亚梅,刘少军,李万程.  中国生物化学与分子生物学报. 2010(12)
[5]蛋白磷酸酶-2Ac在不同倍性鱼6种组织中的分化表达模式[J]. 刘文彬,王道,周洁,肖亚梅,刘少军,刘筠,李万程.  水生生物学报. 2009(06)
[6]蛋白磷酸酶PP-1c在不同倍性鱼6种组织中的分化表达模式[J]. 刘文彬,刘姣,马海立,郑春兵,付虎,袁丹,肖亚梅,刘少军,刘筠,李万程.  水产学报. 2009(05)
[7]Ser/Thr蛋白磷酸酶PPP家族结构研究新进展[J]. 王柏婧,魏群.  中国科学（C辑:生命科学）. 2008(07)
[8]Ⅰ型蛋白磷酸酶研究进展[J]. 王柏婧,谢秀杰,魏群.  微生物学报. 2008(02)
[9]蛋白磷酸酶2A与肿瘤关系的研究进展[J]. 黄朴,徐立红.  癌变.畸变.突变. 2006(05)



本文编号：3538622