克氏原螯虾WSD的PCR诊断及组织病理损伤研究

发布时间：2021-12-24 00:08

　　【目的】近年来白斑综合症病毒（WSSV）严重威胁着克氏原螯虾（Procambarus clarkii）的健康养殖,本研究旨在确定一例克氏原螯虾暴发性死亡的病因。【方法】对患病虾进行临床症状观察,取其鳃、心脏、肝胰腺、肠道、肌肉、眼睛等组织分别进行套氏PCR检测和组织病理学观察。【结果】患病虾临床剖解特征表现为肠段中空无食物,肠壁透明,肠管较细;套氏PCR结果显示患病虾体内WSSV呈阳性;PCR产物测序并进行系统发育树分析显示,该基因序列与WSSV的核苷酸序列同源性为100%,进一步证实本次患病克氏原螯虾体内携带WSSV。病理组织切片显示,该病靶器官主要为肝胰腺、心脏、鳃、肠道,患病虾均表现为中度至重度坏死性肝胰腺炎、中度充血性鳃炎、中度坏死性心肌炎、以及轻度肠炎,肌肉组织未发现明显病变。【结论】推断造成本次克氏原螯虾大量死亡的原因为WSSV感染。 

【文章来源】：江西农业大学学报. 2020,42(02)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

PCR检测WSSV

患病虾组织病理学表现

将-80℃保存的鳃、肝胰腺、肠道和肌肉进行混合匀浆，提取混合组织的DNA，用WSSV外引物进行PCR扩增，经1.5%琼脂糖凝胶电泳，结果显示，所有样品均扩增出一条1 447 bp的特异性条带（图2A）。接着使用WSSV内引物对样品进行套氏PCR检测，所有样品均扩增出一条约940 bp的条带（图2B）。套氏PCR产物经成都擎科梓熙生物技术有限公司进行序列测定后，获得长度为941 bp的序列。通过BLAST比对，显示该序列与GenBank中WSSV有100%的同源性，确定本次患病克氏原螯虾体内检测病毒为WSSV阳性。图2 PCR检测WSSV

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3549449