壳寡糖对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响
发布时间：2021-12-27 23:07
壳寡糖是壳聚糖的降解产物,其水溶性好,易吸收,能抗菌、抗肿瘤、提高机体免疫力。壳寡糖激活如巨噬细胞、脾脏T淋巴细胞等免疫细胞,活化的免疫细胞不仅产生活性氧、活性氮等活性物质,还能分泌细胞因子。相关研究表明,投喂壳寡糖可以增强鱼类的免疫应答及抗感染能力,但其具体的作用机制尚不清楚。因此,本研究通过体内和体外两种实验方法,以壳寡糖作为免疫刺激剂探究其对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响。主要的研究结果如下:1通过团头鲂头肾巨噬细胞的分离、纯化、鉴定,获得了纯度超过98%的团头鲂头肾巨噬细胞。2壳寡糖刺激巨噬细胞,吞噬含有GFP的大肠杆菌,通过荧光显微镜观察和酶标仪检测壳寡糖组比对照组吞噬细菌数显著增强,产生活性氧、活性氮、i NOS酶活显著增强。一氧化氮合酶的m RNA及NADPH氧化酶五个亚基（p91phox、p22phox、p40phox、p47phox、p67phox）m RNA水平与对照组相比显著提高。3投喂1%壳寡糖一周,投喂组分离的巨噬细胞产生活性氧、活性氮及IL-1βm RNA、TNF-αm RNA水平与对照组相比显著性增强。4克隆团头鲂一氧化氮合酶（i NOS）基因的全长序列...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
B.分离细胞的电镜照片标尺：2μMFig.2-1B.ElectronmicrographoftheseparatedcellsScalebar:2μM
壳寡糖对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响保守氨基酸序列用黑色表示，缺失碱基用（-）标注。下划线标示辅因子的结合位点。Fig 3-4 A Multiple Alignment of iNOS amino acid sequences among other fish.Amino acids identical in black are highlighted, and the dashes (-) stand for the missing ones.The sites for various cofactor binding were shown by underlined and labeled.
壳寡糖对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响结果糖对巨噬细胞存活率的影响选取不同浓度的壳寡糖作用巨噬细胞来探究其对巨噬细胞存TT 法，设置 5 个浓度的壳寡糖处理 96 孔板中的巨噬细胞，每孔以校准误差，实验至少重复三次排除偶然性。实验结果表明00 μg/ml 时细胞存活率没有显著性影响，当其浓度为 200 μg/ml显著性降低（图 4-1）。因此，本研究中壳寡糖的浓度选择在 0-存活率没有影响。
【参考文献】：
期刊论文
[1]壳寡糖对大肠杆菌抑菌作用的研究[J]. 闫海侠,刘佳,孟祥红. 农产品加工(学刊). 2014(07)
[2]3种壳聚糖对团头鲂体外头肾吞噬细胞呼吸爆发功能的影响[J]. 郗明君,刘立春,张涓,汤孝成,刘小玲,林蠡. 华中农业大学学报. 2014(03)
[3]药物治疗糖尿病的研究进展[J]. 蒋兰琴. 医药与保健. 2014(02)
[4]大黄鱼头肾巨噬细胞体外模型的构建[J]. 李庆飞,艾庆辉,麦康森,郑岳夫,徐玮,张文兵. 水生生物学报. 2013(05)
[5]壳寡糖对虹鳟生长性能、血清生化指标及非特异性免疫功能的影响[J]. 刘含亮,孙敏敏,王红卫,万文菊,王纪亭. 动物营养学报. 2012(03)
[6]草鱼诱导型一氧化氮合酶cDNA和启动子的克隆及分析[J]. 汪新艳,赵太强,郭嘉聪,杨牧,周红. 四川动物. 2011(04)
[7]壳寡糖对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、非特异性免疫及血液学指标的影响[J]. 孙立威,文华,蒋明,吴凡,刘伟,田娟,仲维玮,张明明. 广东海洋大学学报. 2011(03)
[8]壳寡糖对正常小鼠免疫功能的影响[J]. 蔡文娣,初金鑫,付辰炜,韩宝芹,刘万顺. 中国海洋药物. 2010(04)
[9]壳寡糖的免疫调节效应及其机制研究进展[J]. 熊宇龙,匡欣薇,陈卫国,徐艳清,高劲松. 现代生物医学进展. 2009(09)
[10]壳寡糖对大肠杆菌的抑制作用[J]. 杨玉红. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(16)
硕士论文
[1]壳寡糖对黄河鲤生产性能、免疫指标和肠道菌群影响的研究[D]. 张国启.河南工业大学 2012
[2]壳寡糖及其新型衍生物的制备和抗肿瘤活性初步研究[D]. 蔡圣宝.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
[3]VOHS、VOCC体外对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TLR2/4通路机制的影响[D]. 宋美芳.成都中医药大学 2009
本文编号：3552917
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
B.分离细胞的电镜照片标尺：2μMFig.2-1B.ElectronmicrographoftheseparatedcellsScalebar:2μM
壳寡糖对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响保守氨基酸序列用黑色表示，缺失碱基用（-）标注。下划线标示辅因子的结合位点。Fig 3-4 A Multiple Alignment of iNOS amino acid sequences among other fish.Amino acids identical in black are highlighted, and the dashes (-) stand for the missing ones.The sites for various cofactor binding were shown by underlined and labeled.
壳寡糖对团头鲂头肾巨噬细胞免疫功能的影响结果糖对巨噬细胞存活率的影响选取不同浓度的壳寡糖作用巨噬细胞来探究其对巨噬细胞存TT 法，设置 5 个浓度的壳寡糖处理 96 孔板中的巨噬细胞，每孔以校准误差，实验至少重复三次排除偶然性。实验结果表明00 μg/ml 时细胞存活率没有显著性影响，当其浓度为 200 μg/ml显著性降低（图 4-1）。因此，本研究中壳寡糖的浓度选择在 0-存活率没有影响。
【参考文献】：
期刊论文
[1]壳寡糖对大肠杆菌抑菌作用的研究[J]. 闫海侠,刘佳,孟祥红. 农产品加工(学刊). 2014(07)
[2]3种壳聚糖对团头鲂体外头肾吞噬细胞呼吸爆发功能的影响[J]. 郗明君,刘立春,张涓,汤孝成,刘小玲,林蠡. 华中农业大学学报. 2014(03)
[3]药物治疗糖尿病的研究进展[J]. 蒋兰琴. 医药与保健. 2014(02)
[4]大黄鱼头肾巨噬细胞体外模型的构建[J]. 李庆飞,艾庆辉,麦康森,郑岳夫,徐玮,张文兵. 水生生物学报. 2013(05)
[5]壳寡糖对虹鳟生长性能、血清生化指标及非特异性免疫功能的影响[J]. 刘含亮,孙敏敏,王红卫,万文菊,王纪亭. 动物营养学报. 2012(03)
[6]草鱼诱导型一氧化氮合酶cDNA和启动子的克隆及分析[J]. 汪新艳,赵太强,郭嘉聪,杨牧,周红. 四川动物. 2011(04)
[7]壳寡糖对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、非特异性免疫及血液学指标的影响[J]. 孙立威,文华,蒋明,吴凡,刘伟,田娟,仲维玮,张明明. 广东海洋大学学报. 2011(03)
[8]壳寡糖对正常小鼠免疫功能的影响[J]. 蔡文娣,初金鑫,付辰炜,韩宝芹,刘万顺. 中国海洋药物. 2010(04)
[9]壳寡糖的免疫调节效应及其机制研究进展[J]. 熊宇龙,匡欣薇,陈卫国,徐艳清,高劲松. 现代生物医学进展. 2009(09)
[10]壳寡糖对大肠杆菌的抑制作用[J]. 杨玉红. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(16)
硕士论文
[1]壳寡糖对黄河鲤生产性能、免疫指标和肠道菌群影响的研究[D]. 张国启.河南工业大学 2012
[2]壳寡糖及其新型衍生物的制备和抗肿瘤活性初步研究[D]. 蔡圣宝.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
[3]VOHS、VOCC体外对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TLR2/4通路机制的影响[D]. 宋美芳.成都中医药大学 2009
本文编号：3552917
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