杂色鲍变态中IIS信号通路对细胞凋亡和增殖的作用分析
发布时间：2022-01-02 11:44
杂色鲍（Haliotis diversicolor）是一种重要的经济贝类,其生活史中存在附着变态过程。本研究在实验室获得的杂色鲍转录组数据基础上,采用SMART-RACE技术克隆获得胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路（IIS）中的胰岛素诱导蛋白和胰岛素降解酶,分别命名为HdINSIG2和HdIDE。结合qPCR、原核表达、酶联免疫、RNAi和原位杂交技术研究了IIS信号通路成员HdINSIG2、HdIDE、HdIGFBP7和HdMIRP对杂色鲍幼虫细胞增殖和凋亡的作用。主要结果如下:1)HdINSIG2 cDNA全长为1400 bp;其中5’UTR为123 bp,3’UTR为677 bp,ORF为600 bp;编码199个氨基酸;含有5个跨膜结构域。qRT-PCR显示,在胚胎发育过程中,HdINSIG2在幼虫发育的卵裂阶段表达量相对较高;胚后阶段表达量显著低于卵裂阶段（P<0.05）。2)HdIDE cDNA长为4244 bp;其中5’UTR为118 bp,3’UTR为1054 bp,ORF为3072bp;编码1023个氨基酸;包含一个典型的蛋白酶M16功能域和两个蛋白酶M16C功...
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
杂色鲍各组织总RNA琼脂糖凝胶电泳结果
图 3-2 HdINSIG2 SMART-RACE 产物琼脂糖凝胶电2 Agarose gel electrophoresis of SMART-RACE productsarker；1：HdINSIG2 3’RACE 产物；2：HdINSIG2 5oducts of agarose gel electrophoresis of marker, 3’RACECE 的测序结果用 Vector NTI Advance 11 软件去tX 序列比对，验证序列的正确性。通过 ORF 基因的 ORF 引物，通过 PCR 反应扩增其 ORF图 3-3 所示，其中 HdINSIG2 的 ORF 长度为 6H3 的 ORF 长度为 411 bp。
图 3-2 HdINSIG2 SMART-RACE 产物琼脂糖凝胶电泳图.3-2 Agarose gel electrophoresis of SMART-RACE products of：Marker；1：HdINSIG2 3’RACE 产物；2：HdINSIG2 5’RA products of agarose gel electrophoresis of marker, 3’RACE anRACE 的测序结果用 Vector NTI Advance 11 软件去除lastX 序列比对，验证序列的正确性。通过 ORF Fin计基因的 ORF 引物，通过 PCR 反应扩增其 ORF 序如图 3-3 所示，其中 HdINSIG2 的 ORF 长度为 600HdH3 的 ORF 长度为 411 bp。
【参考文献】：
期刊论文
[1]西农萨能羊胰岛素诱导基因2（INSIG2）的克隆及组织表达分析[J]. 胡仕良,罗军,王慧,赵旺生,李君,孙雨婷,朱江江,石恒波. 农业生物技术学报. 2012(09)
[2]鲍幼虫变态分子机制的研究进展[J]. 王国栋,张丽莉,王艺磊. 集美大学学报(自然科学版). 2012(02)
[3]长牡蛎早期胚胎发育中脂肪酸和氨基酸组成变化的研究[J]. 刘鹏超,阙华勇,张国范. 海洋科学. 2011(10)
[4]CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究[J]. 邹颖,王文梅,朱雅男,杨卫东. 口腔医学研究. 2011(08)
[5]剔除离群值的学生化残差新方法[J]. 王中宇,张海滨,刘智敏. 仪器仪表学报. 2006(06)
[6]Caspase Family Proteases and Apoptosis[J]. Ting-Jun FAN Li-Hui HAN Ri-Shan CONG Jin LIANG College of Marine Life Sciences,Division of Life Science and Technology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China;College of Chemistry & Chemical Engineering,Ocean University of China,Qingdao 266003,China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(11)
[7]细胞凋亡的研究现状与发展趋势[J]. 高丰,金天明,姜宁,楮秀玲. 动物医学进展. 2003(06)
[8]杂色鲍的胚胎发育[J]. 吕军仪,陈志胜,吴金英,曾华,苏冠华. 动物学报. 2001(03)
[9]细胞凋亡与疾病防治[J]. 高利波,高洪. 动物医学进展. 2001(02)
本文编号：3564115
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
杂色鲍各组织总RNA琼脂糖凝胶电泳结果
图 3-2 HdINSIG2 SMART-RACE 产物琼脂糖凝胶电2 Agarose gel electrophoresis of SMART-RACE productsarker；1：HdINSIG2 3’RACE 产物；2：HdINSIG2 5oducts of agarose gel electrophoresis of marker, 3’RACECE 的测序结果用 Vector NTI Advance 11 软件去tX 序列比对，验证序列的正确性。通过 ORF 基因的 ORF 引物，通过 PCR 反应扩增其 ORF图 3-3 所示，其中 HdINSIG2 的 ORF 长度为 6H3 的 ORF 长度为 411 bp。
图 3-2 HdINSIG2 SMART-RACE 产物琼脂糖凝胶电泳图.3-2 Agarose gel electrophoresis of SMART-RACE products of：Marker；1：HdINSIG2 3’RACE 产物；2：HdINSIG2 5’RA products of agarose gel electrophoresis of marker, 3’RACE anRACE 的测序结果用 Vector NTI Advance 11 软件去除lastX 序列比对，验证序列的正确性。通过 ORF Fin计基因的 ORF 引物，通过 PCR 反应扩增其 ORF 序如图 3-3 所示，其中 HdINSIG2 的 ORF 长度为 600HdH3 的 ORF 长度为 411 bp。
【参考文献】：
期刊论文
[1]西农萨能羊胰岛素诱导基因2（INSIG2）的克隆及组织表达分析[J]. 胡仕良,罗军,王慧,赵旺生,李君,孙雨婷,朱江江,石恒波. 农业生物技术学报. 2012(09)
[2]鲍幼虫变态分子机制的研究进展[J]. 王国栋,张丽莉,王艺磊. 集美大学学报(自然科学版). 2012(02)
[3]长牡蛎早期胚胎发育中脂肪酸和氨基酸组成变化的研究[J]. 刘鹏超,阙华勇,张国范. 海洋科学. 2011(10)
[4]CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究[J]. 邹颖,王文梅,朱雅男,杨卫东. 口腔医学研究. 2011(08)
[5]剔除离群值的学生化残差新方法[J]. 王中宇,张海滨,刘智敏. 仪器仪表学报. 2006(06)
[6]Caspase Family Proteases and Apoptosis[J]. Ting-Jun FAN Li-Hui HAN Ri-Shan CONG Jin LIANG College of Marine Life Sciences,Division of Life Science and Technology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China;College of Chemistry & Chemical Engineering,Ocean University of China,Qingdao 266003,China. Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(11)
[7]细胞凋亡的研究现状与发展趋势[J]. 高丰,金天明,姜宁,楮秀玲. 动物医学进展. 2003(06)
[8]杂色鲍的胚胎发育[J]. 吕军仪,陈志胜,吴金英,曾华,苏冠华. 动物学报. 2001(03)
[9]细胞凋亡与疾病防治[J]. 高利波,高洪. 动物医学进展. 2001(02)
本文编号：3564115
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