墨吉明对虾蜕皮抑制激素MIH1基因克
发布时间：2022-01-05 06:30
墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）蜕皮抑制激素（molt-inhibiting hormone,MIH）,属于甲壳动物高血糖激素（crustacean hyperglycemic hormone,CHH）家族神经肽,由眼柄神经内分泌调控中心X器官-窦腺复合体（X-organ-sinus-gland,XO-SG）合成分泌。蜕皮抑制激素和蜕皮类固醇激素（molting hormone,MH）相互拮抗而调控蜕皮活动,并且其在甲壳动物的生长、繁殖和渗透压调节等一系列活动中发挥重要作用。近年来,随着墨吉明对虾遗传育种工作的开展,因此对其生长、繁殖、蜕皮等相关基因的克隆、表达及功能研究意义重大。本研究利用RT-PCR和RACE技术首次克隆获得墨吉明对虾蜕皮抑制激素MIH1的cDNA、gDNA全长并对其进行生物学特性描述;运用实时荧光定量PCR技术检测了MIH1基因在墨吉明对虾不同组织、不同蜕皮时期的表达分布;同时运用原核重组表达技术成功获得FmMIH1重组蛋白,注射FmMIH1重组蛋白和双链对MIH1进行功能研究。FmMIH1拥有二型眼柄神经肽CHH/MIH/GIH...
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
眼柄神经节示意图
图 1-2 甲壳动物 CHH 家族激素生理调控与功能模式图Fig.1-2 Illustration of physiological regulation and function of CHH-family hormo近二十年来，甲壳动物神经内分泌系统相关基因的克隆表达、功能及调控方研究一直是一个研究核心问题[15-17,26]。随着生物科技技术的快速发展， CHH 家经肽分离纯化、基因克隆、功能及调控机制研究方面的实验技术也不断进步，为步阐明其生理功能提供便利。
最终得到 827bp 大小的 FmMIH1 cDNA 全长序列(图2-1)，包括 70 bp 的 5′- UTR、318 bp 的开放阅读框(ORF)和 459 bp 的 3′- UTR。最终拼接的 FmMIH1 cDNA 经 BLASTX 分析发现与大多数十足目甲壳纲动物已知的 MIH1 序列具有较高的氨基酸序列一致性，其中与斑节对虾和凡纳滨对虾的MIH1 核苷酸序列同源性最高为 86%。开放阅读框(ORF) 共编码 105 个氨基酸残基，5′端带有起始密码子(ATG)，3′端有带有终止密码子(TGA)。SignalP 4.1 在线检测推导的氨基酸序列发现信号肽切割位点在第29位的S和第30位的F之间，因此1~29位氨基酸残基编码FmMIH1信号肽，30~105位氨基酸残基则编码FmMIH1成熟肽。FmMIH1成熟肽第11位为甘氨酸残基，并拥有 6 个
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同条件下副溶血弧菌对墨吉明对虾致病性研究[J]. 赵吉臣,王毓勉,王刚,陈兆明,孙成波. 中国农学通报. 2015(32)
[2]丰南区南美白对虾养殖产业存在的问题及发展对策[J]. 张玲,马云聪,张珏,刘洪文,李飞. 河北渔业. 2015(09)
[3]温度和盐度对墨吉明对虾（Fenneropenaeus meiguiensis）生长与存活的联合效应[J]. 钱佳慧,栗志民,叶宁,刘建勇,胡志国,郑开江. 渔业科学进展. 2015(03)
[4]环境温度和盐度对墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）胚胎发育的影响[J]. 杨世平,王成桂,黄海立,陈兆明,孙成波. 海洋与湖沼. 2014(04)
[5]三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH基因mRNA水平与蜕皮激素浓度变化[J]. 汪春建,朱冬发,亓一舟,胡则辉,谢熙,沈洁. 水生生物学报. 2013(01)
[6]中国对虾新品种“黄海2号”的培育[J]. 孔杰,罗坤,栾生,王清印,张庆文,张天时,孟宪红,王伟继,阮晓红. 水产学报. 2012(12)
[7]pH胁迫对中国明对虾抗氧化系统酶活力及基因表达的影响[J]. 王芸,李健,李吉涛,何玉英,常志强,刘德月. 中国水产科学. 2011(03)
[8]甲壳动物蜕皮抑制激素调控机制的研究进展[J]. 亓一舟,朱冬发,杨济芬,苏青. 动物学杂志. 2010(02)
[9]北部湾墨吉明对虾和斑节对虾形态性状对体质量的影响分析[J]. 胡贤德,孙成波,李镇泉,陈科光,王平,李义军,徐安敏. 海南大学学报(自然科学版). 2009(01)
[10]微卫星技术对黄、渤海海域7个不同地理群体中国对虾的遗传结构和遗传分化研究[J]. 孟宪红,孔杰,王清印,刘萍. 海洋水产研究. 2008(05)
硕士论文
[1]日本沼虾性腺抑制激素免疫定位及莠去津处理对其表达量的影响[D]. 张凤娟.河北大学 2015
[2]青虾RNAi技术的研究及其在蜕皮抑制激素（MIH）基因功能研究中的应用[D]. 江丰伟.南京农业大学 2014
[3]三疣梭子蟹和日本蟳的线粒体DNA序列比较分析及三疣梭子蟹蜕皮抑制激素基因的SNP位点筛选[D]. 高俊娜.中国海洋大学 2011
[4]中华绒螯蟹性腺抑制激素基因克隆[D]. 王颖.河北大学 2009
本文编号：3569919
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
眼柄神经节示意图
图 1-2 甲壳动物 CHH 家族激素生理调控与功能模式图Fig.1-2 Illustration of physiological regulation and function of CHH-family hormo近二十年来，甲壳动物神经内分泌系统相关基因的克隆表达、功能及调控方研究一直是一个研究核心问题[15-17,26]。随着生物科技技术的快速发展， CHH 家经肽分离纯化、基因克隆、功能及调控机制研究方面的实验技术也不断进步，为步阐明其生理功能提供便利。
最终得到 827bp 大小的 FmMIH1 cDNA 全长序列(图2-1)，包括 70 bp 的 5′- UTR、318 bp 的开放阅读框(ORF)和 459 bp 的 3′- UTR。最终拼接的 FmMIH1 cDNA 经 BLASTX 分析发现与大多数十足目甲壳纲动物已知的 MIH1 序列具有较高的氨基酸序列一致性，其中与斑节对虾和凡纳滨对虾的MIH1 核苷酸序列同源性最高为 86%。开放阅读框(ORF) 共编码 105 个氨基酸残基，5′端带有起始密码子(ATG)，3′端有带有终止密码子(TGA)。SignalP 4.1 在线检测推导的氨基酸序列发现信号肽切割位点在第29位的S和第30位的F之间，因此1~29位氨基酸残基编码FmMIH1信号肽，30~105位氨基酸残基则编码FmMIH1成熟肽。FmMIH1成熟肽第11位为甘氨酸残基，并拥有 6 个
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同条件下副溶血弧菌对墨吉明对虾致病性研究[J]. 赵吉臣,王毓勉,王刚,陈兆明,孙成波. 中国农学通报. 2015(32)
[2]丰南区南美白对虾养殖产业存在的问题及发展对策[J]. 张玲,马云聪,张珏,刘洪文,李飞. 河北渔业. 2015(09)
[3]温度和盐度对墨吉明对虾（Fenneropenaeus meiguiensis）生长与存活的联合效应[J]. 钱佳慧,栗志民,叶宁,刘建勇,胡志国,郑开江. 渔业科学进展. 2015(03)
[4]环境温度和盐度对墨吉明对虾（Fenneropenaeus merguiensis）胚胎发育的影响[J]. 杨世平,王成桂,黄海立,陈兆明,孙成波. 海洋与湖沼. 2014(04)
[5]三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH基因mRNA水平与蜕皮激素浓度变化[J]. 汪春建,朱冬发,亓一舟,胡则辉,谢熙,沈洁. 水生生物学报. 2013(01)
[6]中国对虾新品种“黄海2号”的培育[J]. 孔杰,罗坤,栾生,王清印,张庆文,张天时,孟宪红,王伟继,阮晓红. 水产学报. 2012(12)
[7]pH胁迫对中国明对虾抗氧化系统酶活力及基因表达的影响[J]. 王芸,李健,李吉涛,何玉英,常志强,刘德月. 中国水产科学. 2011(03)
[8]甲壳动物蜕皮抑制激素调控机制的研究进展[J]. 亓一舟,朱冬发,杨济芬,苏青. 动物学杂志. 2010(02)
[9]北部湾墨吉明对虾和斑节对虾形态性状对体质量的影响分析[J]. 胡贤德,孙成波,李镇泉,陈科光,王平,李义军,徐安敏. 海南大学学报(自然科学版). 2009(01)
[10]微卫星技术对黄、渤海海域7个不同地理群体中国对虾的遗传结构和遗传分化研究[J]. 孟宪红,孔杰,王清印,刘萍. 海洋水产研究. 2008(05)
硕士论文
[1]日本沼虾性腺抑制激素免疫定位及莠去津处理对其表达量的影响[D]. 张凤娟.河北大学 2015
[2]青虾RNAi技术的研究及其在蜕皮抑制激素（MIH）基因功能研究中的应用[D]. 江丰伟.南京农业大学 2014
[3]三疣梭子蟹和日本蟳的线粒体DNA序列比较分析及三疣梭子蟹蜕皮抑制激素基因的SNP位点筛选[D]. 高俊娜.中国海洋大学 2011
[4]中华绒螯蟹性腺抑制激素基因克隆[D]. 王颖.河北大学 2009
本文编号：3569919
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