凡纳滨对虾性腺抑制激素定位及激素对性腺发育基因表达的影响
发布时间：2022-01-16 12:02
性腺抑制激素（Gonad inhibiting hormone，GIH）是甲壳动物X器官窦腺复合体（XO-SG complexs）合成分泌的一种重要的神经多肽激素，对雌性和雄性的性腺发育起抑制作用。本文以凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）为研究对象，利用SMARTer RACE技术克隆GIH的5’UTR（包含部分ORF），利用生物信息学对GIH序列和结构进行了分析预测，通过免疫组化技术研究了GIH蛋白在眼柄中的表达和分布，用荧光定量PCR技术检测了雌激素对GIH及眼柄激素对其它性腺发育相关基因（DMC1、VASA和VTG）表达的影响，主要结果如下：1. GIH基因的序列分析凡纳滨对虾GIH cDNA序列由865个核苷酸组成，其中5’端非编码区（5’UTR）有56bp，3’UTR（包括poly（A））有521bp，开放阅读框（ORF）有288bp，共编码96个氨基酸（包括17个氨基酸信号肽）。同源比对与进化关系显示，凡纳滨对虾GIH与斑节对虾GIH亲缘关系最近，同源性高达94%，与刀额新对虾同源性达63%，而与欧洲龙虾、美洲鳌虾、拟穴青蟹、青虾和鼠妇等甲壳动物GIH同...
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
1.1 甲壳动物眼柄神经内分泌系统概述
1.1.1 X 器官窦腺复合体（XO-SG）显微超微结构
1.1.2 X 器官窦腺复合体（XO-SG）内的神经多肽激素的类型、结构以及功能
1.1.3 眼柄神经激素的合成及分泌方式
1.2 眼柄中性腺抑制激素(GIH)的理化性质及分布
1.2.1 GIH 的理化性质
1.2.2 GIH 的分布
1.3 外源激素对甲壳动物的生殖调控
1.4 甲壳动物生殖相关基因
1.4.1 DMC16
1.4.2 VASA
1.4.3 卵黄蛋白原（Vitellogenin，VTG）
1.5 本研究的目的
2 凡纳滨对虾性腺抑制激素 GIH 5’UTR 的克隆及序列分析
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果
2.2.1 凡纳滨对虾 GIH 基因 5’UTR 的克隆
2.2.2 凡纳滨对虾 GIH 基因全长 cDNA 序列分析
2.3 讨论
3 GIH 在凡纳滨对虾眼柄中的定位
3.1 材料方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果
3.2.1 Western-blot 检测斑节对虾的 GIH 抗体特异性
3.2.2 凡纳滨对虾 GIH 在眼柄视神经中的定位
3.3 讨论
4 雌二醇（17β-E2）对凡纳滨对虾 GIH 表达的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.1.3 数据处理
4.2 结果
4.2.1 凡纳滨对虾卵巢发育时期的组织学变化
4.2.2 卵巢不同发育时期凡纳滨对虾眼柄中 GIH 的表达量
4.2.3 17β-E2联合雌激素受体拮抗物（TAM）在体注射对 GIH 表达的影响
4.2.4 17β-E2对离体眼柄 GIH 表达的影响
4.3 讨论
5 摘除眼柄与注射眼柄激素对生殖相关基因的表达
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 实验结果
5.2.1 摘除眼柄与注射眼柄激素对 DMC1 表达的影响
5.2.2 摘除眼柄与注射眼柄激素对 VASA 表达的影响
5.2.3 摘除眼柄与注射眼柄激素对 VTG 表达的影响
5.3 讨论
6 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]实时荧光定量PCR检测凡纳滨对虾和罗氏沼虾卵黄蛋白原mRNA在卵巢和肝胰腺中的表达[J]. 李媛媛,蔡生力,刘红. 水产学报. 2012(11)
[2]眼柄粗提物对凡纳滨对虾性分化的影响[J]. 朱春华,赵光凤,李广丽. 广东海洋大学学报. 2011(01)
[3]凡纳滨对虾促雄性腺的组织学初步观察[J]. 赵光凤,李广丽,朱春华. 广东海洋大学学报. 2010(06)
[4]Cloning,characterization,and expression analysis of the DEAD-box family genes,Fc-vasa and Fc-PL10a,in Chinese shrimp （Fenneropenaeus chinensis）[J]. 周倩如,邵明瑜,秦贞奎,康庆浩,张志峰. Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2010(01)
[5]拟穴青蟹卵巢早期发育的组织学观察[J]. 唐小林,沈琪,胡超群,张吕平. 海洋湖沼通报. 2009(03)
[6]凡纳滨对虾性别分化的初步研究[J]. 赵光凤,李广丽,朱春华. 广东海洋大学学报. 2009(03)
[7]Immunorecognition of estrogen and androgen receptors in the brain and thoracic ganglion mass of mud crab,Scylla paramamosain[J]. Haihui Ye*,Huiyang Huang,Shaojing Li,Guizhong Wang Department of Oceanography,Xiamen University,Xiamen 361005,China. Progress in Natural Science. 2008(06)
[8]17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹主要体征和卵巢发育影响的初步观察[J]. 沈蓓杰,杨筱珍,吴旭干,常国亮,成永旭. 上海水产大学学报. 2008(03)
[9]卵黄蛋白原的发生、结构及功能研究现状[J]. 张年国,张颖,孙大江,曲秋芝. 水产学杂志. 2007(01)
[10]克氏原螯虾X器官—窦腺复合体的组织学观察[J]. 殷海成,张训蒲,龚世园. 安徽农业科学. 2007(13)
博士论文
[1]中华绒螯蟹精巢组织cDNA文库构建和Dmcl基因的克隆与序列分析[D]. 张伟.华东师范大学 2012
硕士论文
[1]斑节对虾几种激素和基因与卵巢发育相关性的研究[D]. 周俊.上海海洋大学 2012
[2]凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）卵黄蛋白原mRNA合成部位的初步研究[D]. 李媛媛.上海海洋大学 2012
[3]凡纳滨对虾性腺抑制激素基因的克隆与表达[D]. 姜姝娜.广东海洋大学 2011
[4]环境因子对凡纳滨对虾性别分化的影响[D]. 冉维亮.广东海洋大学 2010
[5]中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其免疫定位的研究[D]. 马奎.河北大学 2007
本文编号：3592623
【文章来源】：广东海洋大学广东省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
1.1 甲壳动物眼柄神经内分泌系统概述
1.1.1 X 器官窦腺复合体（XO-SG）显微超微结构
1.1.2 X 器官窦腺复合体（XO-SG）内的神经多肽激素的类型、结构以及功能
1.1.3 眼柄神经激素的合成及分泌方式
1.2 眼柄中性腺抑制激素(GIH)的理化性质及分布
1.2.1 GIH 的理化性质
1.2.2 GIH 的分布
1.3 外源激素对甲壳动物的生殖调控
1.4 甲壳动物生殖相关基因
1.4.1 DMC16
1.4.2 VASA
1.4.3 卵黄蛋白原（Vitellogenin，VTG）
1.5 本研究的目的
2 凡纳滨对虾性腺抑制激素 GIH 5’UTR 的克隆及序列分析
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果
2.2.1 凡纳滨对虾 GIH 基因 5’UTR 的克隆
2.2.2 凡纳滨对虾 GIH 基因全长 cDNA 序列分析
2.3 讨论
3 GIH 在凡纳滨对虾眼柄中的定位
3.1 材料方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果
3.2.1 Western-blot 检测斑节对虾的 GIH 抗体特异性
3.2.2 凡纳滨对虾 GIH 在眼柄视神经中的定位
3.3 讨论
4 雌二醇（17β-E2）对凡纳滨对虾 GIH 表达的影响
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.1.3 数据处理
4.2 结果
4.2.1 凡纳滨对虾卵巢发育时期的组织学变化
4.2.2 卵巢不同发育时期凡纳滨对虾眼柄中 GIH 的表达量
4.2.3 17β-E2联合雌激素受体拮抗物（TAM）在体注射对 GIH 表达的影响
4.2.4 17β-E2对离体眼柄 GIH 表达的影响
4.3 讨论
5 摘除眼柄与注射眼柄激素对生殖相关基因的表达
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 实验结果
5.2.1 摘除眼柄与注射眼柄激素对 DMC1 表达的影响
5.2.2 摘除眼柄与注射眼柄激素对 VASA 表达的影响
5.2.3 摘除眼柄与注射眼柄激素对 VTG 表达的影响
5.3 讨论
6 结论
参考文献
致谢
作者简介
导师简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]实时荧光定量PCR检测凡纳滨对虾和罗氏沼虾卵黄蛋白原mRNA在卵巢和肝胰腺中的表达[J]. 李媛媛,蔡生力,刘红. 水产学报. 2012(11)
[2]眼柄粗提物对凡纳滨对虾性分化的影响[J]. 朱春华,赵光凤,李广丽. 广东海洋大学学报. 2011(01)
[3]凡纳滨对虾促雄性腺的组织学初步观察[J]. 赵光凤,李广丽,朱春华. 广东海洋大学学报. 2010(06)
[4]Cloning,characterization,and expression analysis of the DEAD-box family genes,Fc-vasa and Fc-PL10a,in Chinese shrimp （Fenneropenaeus chinensis）[J]. 周倩如,邵明瑜,秦贞奎,康庆浩,张志峰. Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2010(01)
[5]拟穴青蟹卵巢早期发育的组织学观察[J]. 唐小林,沈琪,胡超群,张吕平. 海洋湖沼通报. 2009(03)
[6]凡纳滨对虾性别分化的初步研究[J]. 赵光凤,李广丽,朱春华. 广东海洋大学学报. 2009(03)
[7]Immunorecognition of estrogen and androgen receptors in the brain and thoracic ganglion mass of mud crab,Scylla paramamosain[J]. Haihui Ye*,Huiyang Huang,Shaojing Li,Guizhong Wang Department of Oceanography,Xiamen University,Xiamen 361005,China. Progress in Natural Science. 2008(06)
[8]17α-羟基孕酮对性早熟中华绒螯蟹主要体征和卵巢发育影响的初步观察[J]. 沈蓓杰,杨筱珍,吴旭干,常国亮,成永旭. 上海水产大学学报. 2008(03)
[9]卵黄蛋白原的发生、结构及功能研究现状[J]. 张年国,张颖,孙大江,曲秋芝. 水产学杂志. 2007(01)
[10]克氏原螯虾X器官—窦腺复合体的组织学观察[J]. 殷海成,张训蒲,龚世园. 安徽农业科学. 2007(13)
博士论文
[1]中华绒螯蟹精巢组织cDNA文库构建和Dmcl基因的克隆与序列分析[D]. 张伟.华东师范大学 2012
硕士论文
[1]斑节对虾几种激素和基因与卵巢发育相关性的研究[D]. 周俊.上海海洋大学 2012
[2]凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）和罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）卵黄蛋白原mRNA合成部位的初步研究[D]. 李媛媛.上海海洋大学 2012
[3]凡纳滨对虾性腺抑制激素基因的克隆与表达[D]. 姜姝娜.广东海洋大学 2011
[4]环境因子对凡纳滨对虾性别分化的影响[D]. 冉维亮.广东海洋大学 2010
[5]中华绒螯蟹性腺抑制激素纯化及其免疫定位的研究[D]. 马奎.河北大学 2007
本文编号：3592623
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3592623.html
