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三个Tetraspanin蛋白的表达及其在WSSV感染中的作用分析

发布时间:2022-02-15 08:56
  白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是目前对虾养殖业最严重的病原,给全世界范围内的对虾养殖业带来了巨大损失,到目前为止尚无有效的治疗手段。因此分析WSSV的侵染机制和致病机理对寻找WSSV的防治方法至关重要。Tetraspanin蛋白是一类较保守的四次跨膜糖蛋白,广泛分布于不同物种中。通过形成tetraspanin蛋白网格参与细胞生长、信号转导等生命活动,此外在病原的侵染、肿瘤细胞迁移等免疫过程中也起到重要作用。本文研究了tetraspanin蛋白在WSSV感染中的作用,主要研究内容包括以下几个方面:第一章:根据Gen Bank公布的中国明对虾Tetraspanin-3(Fc T3)基因序列,设计特异性引物,经PCR扩增得到Tetraspanin-3蛋白大胞外环区域(Large extracellularloop,LEL)的基因片段,酶切后成功构建原核表达载体p BAD/gⅢA-T3L并转化入大肠杆菌TOP10感受态细胞中。测序正确的菌株进行扩大培养,经L-阿拉伯糖诱导表达。采用钴离子亲和层析法纯化表达的蛋白,质谱分析显示表达的蛋白为Fc T3... 

【文章来源】:上海海洋大学上海市

【文章页数】:90 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

三个Tetraspanin蛋白的表达及其在WSSV感染中的作用分析


PCR扩增FcT3L.Fig.1-1.AmplicationofFcT3LbyPCRM:DNA标准品DL2000;1:阴性对照;2:T3L基因;M:DNAMarkerDL2000;1:Negativecontrol;

菌落PCR,标准品,测序,相符合


菌落PCR结果,Fig.1-2.Colony-PCRM:DNA标准品DL2000;1:阴性对照;2-3:重组FcT3LM:DNAMarkerDL2000;1:Negativecontrol;2-3:RecombinantFcT3L

质量标准,分析表,条带,菌液


SDS-PAGE分析表达的FcT3L.Fig.1-3.SDS-PAGEanalysisofFcT3LexpressedinE.coliM:蛋白分子质量标准;1:对照;2:FcT3L菌液M.ProteinmolecularweightMarker;1:Control;2:RecombinantFcT3L

【参考文献】:
期刊论文
[1]对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白VP19的融合表达及其抗病毒感染作用[J]. 贾启军,孟小林,徐进平,王健,鲁伟.  Virologica Sinica. 2006(06)
[2]白斑症病毒感染与病毒囊膜完整性的关系[J]. 王晓洁,邢婧,绳秀珍,周丽,战文斌.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2005(05)

博士论文
[1]中国对虾白斑症病毒(WSSV)血细胞受体蛋白的研究[D]. 唐小千.中国海洋大学 2010



本文编号:3626333

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