鲫肠道潜在益生菌的筛选与功能研究

发布时间：2022-02-24 13:59

　　当前水产业面临细菌性疾病的严重威胁,使用抗生素是防治水产动物细菌性疾病的主要手段,而滥用抗生素会导致病原菌产生耐药性,也会对环境造成污染。因此,使用一些新的方法来替代抗生素的使用成为当前防治细菌性疾病的热点研究。有研究表明,益生菌具有促进水产动物的生长和提高免疫力的作用。内源益生菌具有在机体中的定植能力强、对宿主和环境安全、改善肠道菌群结构、调节机体免疫等特性。因此,新型内源性益生菌的开发研究对水产养殖业的发展具有重要促进作用。本研究初步分析了鲫肠道菌群结构特征,并筛选和分离出无溶血性和对嗜水气单胞菌具有体外抑制作用的潜在益生菌,进一步通过在体安全试验予以安全性评估。后期通过潜在益生菌拌饲投喂鲫,研究其对鲫生长、生理、免疫抗病力及其肠道菌群结构的影响。取得结果如下:1.使用FWA培养基从鲫肠道分离菌株,根据菌落形态特征,按比例随机挑选36株进行16S rDNA测序鉴定,发现其中优势菌为气单胞菌属、芽孢杆菌属、邻单胞菌属、土芽孢杆菌属和肠杆菌属,所占比例分别为46.88%、34.38%、6.25%、6.25%和6.25%。36株从鲫分离的菌株中共16株菌无溶血性,其中有三株菌维氏气单胞菌... 

【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 文献综述
    1.1 益生菌在水产养殖中的应用
        1.1.1 水产益生菌的来源
        1.1.2 水产益生菌的应用
        1.1.3 益生菌的作用机制
    1.2 鱼类肠道菌群研究进展
        1.2.1 肠道菌群结构的影响因素
        1.2.2 肠道菌群结构的调控
        1.2.3 宿主-肠道菌群相互作用
    1.3 研究目的及意义
第2章 肠道优势菌的分离与筛选
    2.1 试验材料
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 试验鱼和菌株
        2.1.3 试验试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 肠道细菌的分离
        2.2.2 肠道细菌的分子生物学鉴定
        2.2.3 潜在病原菌的剔除
        2.2.4 潜在益生菌的筛选
        2.2.5 潜在益生菌的安全性检验
        2.2.6 潜在益生菌的生理生化鉴定和系统发育树构建
        2.2.7 数据分析
    2.3 结果
        2.3.1 鲫肠道细菌数量与组成
        2.3.2 潜在病原菌的剔除
        2.3.3 潜在益生菌的筛选
        2.3.4 潜在益生菌的安全性检验
        2.3.5 潜在益生菌的鉴定
    2.4 讨论
    2.5 小结
第3章 潜在益生菌对鲫生长、免疫及抗病力的影响
    3.1 试验材料
        3.1.1 试验菌株
        3.1.2 试验饲料
        3.1.3 试验动物
    3.2 试验方法
        3.2.1 试验设计
        3.2.2 生长指标的测定
        3.2.3 血清样品采集
        3.2.4 抗凝血采集与血液指标的测定
        3.2.5 血清生化指标的测定
        3.2.6 肝脏样品采集及其生化指标的测定
        3.2.7 攻毒试验
        3.2.8 数据统计与分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 生长指标
        3.3.2 血常规指标
        3.3.3 血清生化指标
        3.3.4 肝脏生化指标
        3.3.5 攻毒试验
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 潜在益生菌对鲫肠道健康的影响
    4.1 试验材料
        4.1.1 主要仪器
        4.1.2 药品试剂
    4.2 试验方法
        4.2.1 试验设计
        4.2.2 肠道样品采集
        4.2.3 肠道消化酶活性
        4.2.4 肠道石蜡切片制作和形态观察
        4.2.5 微生物DNA提取、扩增与测序
        4.2.6 测序数据处理
        4.2.7 数据统计与分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 肠道消化酶活性
        4.3.2 中肠组织形态
        4.3.3 肠道菌群
    4.4 讨论
    4.5 小结
第5章 结论
参考文献
致谢
硕士期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]益生菌和复合营养剂对鱼虾混养池塘水质及细菌群落结构的影响[J]. 陈锦豪,郑锦滨,毛勇,苏永全,王军.  热带生物学报. 2019(01)
[2]渔源乳酸菌降解养殖水体氨氮的效果研究[J]. 李咏梅,任贻超,姜森灏,王金叶,王仁杰,李超.  水产科学. 2018(04)
[3]尼罗罗非鱼致病性类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）的分离鉴定及其病理学观察[J]. 刘志刚,可小丽,卢迈新,高风英,曹建萌,朱华平,王淼.  微生物学报. 2015(01)
[4]中国对虾成虾肠道微生物区系(英文)[J]. 王祥红,李会荣,张晓华,李筠,纪伟尚,徐怀恕.  青岛海洋大学学报(自然科学版). 2000(03)



本文编号：3642868