哲罗鱼早期发育阶段免疫指标变化及vasa基因的克隆与表达分析
发布时间:2022-08-11 13:50
哲罗鱼生长速度快,肉质鲜美,属珍稀冷水性鱼类,具有较高的经济价值。随哲罗鱼人工养殖规模的不断扩大,苗种的需求量不断增加,高质量仔稚鱼的大量产出是苗种培育的关键,苗种死亡率高成为制约哲罗鱼人工养殖发展的因素之一。因此迫切需要对哲罗鱼早期阶段的免疫能力和生殖发育进行研究。因此,本实验研究了哲罗鱼早期发育阶段的免疫酶活性和抗氧化物含量,睾酮和雌二醇的含量变化,仔稚鱼期性腺发育情况,并对哲罗鱼vasa基因进行克隆和表达分析,结果如下:1在哲罗鱼早期发育阶段,通过测定不同发育时期碱性磷酸酶(AKP),酸性磷酸酶(ACP),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)活力和还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,研究鱼体内免疫酶活性变化和抗氧化物含量变化,发现哲罗鱼胚胎期ACP活性明显低于成鱼期[1],说明在胚胎期ACP未发挥重要作用;但在破膜时,ACP活性显著升高,推测ACP在哲罗鱼出膜期发挥重要作用。在随后的仔稚幼鱼发育期,ACP活性一直维持在较高水平,保护鱼体。而AKP活性显著低于ACP。在胚胎期,AKP活性低且有所下降,只在破膜后至破膜后30d短暂升高后再次下降,表明在胚胎期A...
【文章页数】:54 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
英文摘要
引言
1 哲罗鱼概述
2 鱼类早期阶段的免疫机制
2.1 鱼类免疫系统
2.2 胚胎至仔稚幼鱼的免疫和抗氧化机制
3 鱼类性腺分化
3.1 原始生殖细胞
3.2 PGCs 的分子标记 vasa 基因
第一章 哲罗鱼早期阶段免疫指标和抗氧化物酶的活性变化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 ACP 和 AKP 活性变化
2.2 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 SOD 和 CAT 活性变化
2.3 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 GSH 水平变化
2.4 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 MDA 水平变化
3 讨论
3.1 哲罗鱼早期发育阶段磷酸酶的变化
3.2 哲罗鱼早期发育阶段抗氧化系统
3.3 哲罗鱼早期发育阶段 MDA 的变化
第二章 哲罗鱼早期阶段性腺发育和性类固醇激素的含量变化
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 数据处理
2 结果
2.1 哲罗鱼早期阶段 E2 水平的变化
2.2 哲罗鱼早期阶段 T 水平的变化
2.3 哲罗鱼早期阶段性腺发育
3 讨论
第三章 哲罗鱼 vasa 基因的克隆
1 vasa 基因研究的意义和研究进展
1.1 DEAD-box 家族
1.2 vasa 基因的研究进展
2 哲罗鱼的生长阶段划分
2.1 胚胎阶段
2.2 雌性哲罗鱼卵巢发育分期
3 实验目的和意义
3.1 目的
3.2 意义
4 哲罗鱼 vasa 基因的克隆和序列特征分析
4.1 材料
4.2 哲罗鱼 vasa 基因克隆方法
4.3 结果
4.4 讨论
第四章 哲罗鱼 vasa 基因的表达分析
1 材料
1.1 实验用鱼
1.2 试剂和仪器
2 引物设计
3 实验方法
3.1 总 RNA 的提取和转录
3.2 半定量 PCR
3.3 荧光定量 PCR
4 结果
5 讨论
小结
参考文献
致谢
本文编号:3674775
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【学位级别】:硕士
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摘要
英文摘要
引言
1 哲罗鱼概述
2 鱼类早期阶段的免疫机制
2.1 鱼类免疫系统
2.2 胚胎至仔稚幼鱼的免疫和抗氧化机制
3 鱼类性腺分化
3.1 原始生殖细胞
3.2 PGCs 的分子标记 vasa 基因
第一章 哲罗鱼早期阶段免疫指标和抗氧化物酶的活性变化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 ACP 和 AKP 活性变化
2.2 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 SOD 和 CAT 活性变化
2.3 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 GSH 水平变化
2.4 胚胎至仔稚幼鱼期哲罗鱼的 MDA 水平变化
3 讨论
3.1 哲罗鱼早期发育阶段磷酸酶的变化
3.2 哲罗鱼早期发育阶段抗氧化系统
3.3 哲罗鱼早期发育阶段 MDA 的变化
第二章 哲罗鱼早期阶段性腺发育和性类固醇激素的含量变化
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.3 数据处理
2 结果
2.1 哲罗鱼早期阶段 E2 水平的变化
2.2 哲罗鱼早期阶段 T 水平的变化
2.3 哲罗鱼早期阶段性腺发育
3 讨论
第三章 哲罗鱼 vasa 基因的克隆
1 vasa 基因研究的意义和研究进展
1.1 DEAD-box 家族
1.2 vasa 基因的研究进展
2 哲罗鱼的生长阶段划分
2.1 胚胎阶段
2.2 雌性哲罗鱼卵巢发育分期
3 实验目的和意义
3.1 目的
3.2 意义
4 哲罗鱼 vasa 基因的克隆和序列特征分析
4.1 材料
4.2 哲罗鱼 vasa 基因克隆方法
4.3 结果
4.4 讨论
第四章 哲罗鱼 vasa 基因的表达分析
1 材料
1.1 实验用鱼
1.2 试剂和仪器
2 引物设计
3 实验方法
3.1 总 RNA 的提取和转录
3.2 半定量 PCR
3.3 荧光定量 PCR
4 结果
5 讨论
小结
参考文献
致谢
本文编号:3674775
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